儿科学专业优秀论文 中药止泻液对鼠轮状病毒肠炎肠道水通道蛋白影响的研究

儿科学专业优秀论文中药止泻液对鼠轮状病毒肠炎肠道水通道蛋白影响的研究关键词轮状病毒肠炎水通道蛋白中药止泻液摘要目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。正文内容目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后的不含轮状病毒的细胞培养物150UL向乳鼠灌胃。4中药止泻液干预模型的建立C，D组乳鼠分别于接种轮状病毒后第24小时，第48小时给予灌注止泻液（186G/ML），每日三次，每次50UL。5取材分离乳鼠肠段（空肠，回肠，结肠），标记后置于液氮保存。6实时荧光定量PCR对肠道水通道蛋白的MRNA作定性与相对定量，由于MRNA经过表达后成为蛋白质，两者成正比关系，所以可以通过MRNA推测蛋白质的性质与数量。1）肠道组织总RNA的提取；2）对总RNA行逆转录反应；3）实时荧光定量PCR检测肠道水通道蛋白1，3，4，8MRNA。7结果用SPSS110统计软件分析。结果1轮状病毒性肠炎动物模型乳鼠感染SA11株第2天后出现明显的临床腹泻症状，至少在感染后连续6天动物大便中可检测到较高滴度的轮状病毒（RV）抗原；乳鼠感染人轮状病毒后，连续观察6天均未出现腹泻症状，动物大便中亦未检测到RV抗原。2中药止泻液干预模型干预组（C组）乳鼠在接种病毒液后48H，其中4只乳鼠出现明显的RV感染症状，主要表现为腹泻（淡黄色水样便），腹泻率为33，喂毒后第3，4天，4只腹泻乳鼠临床症状减轻，表现为排黄色糊状便，肠外症状不明显。接毒后第5至7天，乳鼠均无腹泻，排黄色成形便。干预组（D组）乳鼠在接种病毒液后48H，10只乳鼠均出现明显腹泻症状（淡黄色水样便），腹泻率为100，接毒后72H，乳鼠腹泻程度减轻，接毒后第4，5天乳鼠排黄色糊状便，接毒后第6，7天，乳鼠无腹泻，排黄色成形便。3实时荧光定量PCR结果1）空白组乳鼠空肠，回肠和近端结肠肠道黏膜均有水通道蛋白1，3，4，8MRNA的表达；2）空肠AQP8MRNA在腹泻组乳鼠中表达量显著高于空白组；3）回肠AQP1MRNA在腹泻组中表达显著低于空白组；4）在空肠，回肠中，腹泻组与空白组其余水通道蛋白MRNA表达量无统计学差异；5）结肠，腹泻组与空白组AQP1，3，4，8MRNA表达无统计学意义；6）C与D组空肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；7）C与D组回肠组织中，4种水通道蛋白MRNA表达量与空白组无明显差异；8）C与D组结肠组织中，AQP1MRNA表达明显比空白组上升，两组差异有统计学意义；其余AQP3，4，8MRNA表达量C，D组与空白组无明显差异。结论1昆明乳鼠对SA11株易感，对人轮状病毒不易感。2腹泻组乳鼠空肠AQPSMRNA表达上升，提示AQP8参与肠道水的吸收与分泌，代偿性表达增加，可以减轻乳鼠腹泻症状。3腹泻组乳鼠回肠AQP1MRNA表达下降，提示随着AQP1减少，回肠吸收功能障碍，水吸收量减少，导致粪便稀薄形成水样便。4AQP8MRNA表达量增加不及AQP1MRNA表达量减少的程度，使腹泻组乳鼠仍以水样便为主要表现。5轮状病毒肠炎的致泻机制可能与近端结肠AQP1，3，4，8无关。6中药干预组（C，D组）乳鼠结肠AQP1MRNA表达上升，提示中药液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1MRNA的表达，可能通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。7在本研究中，中药液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8没有明显的影响。8中药在不同时间点喂予轮状病毒肠炎乳鼠，对肠炎乳鼠的病程有影响，在接毒后第24小时喂服中药止泻液，药效较好，可使乳鼠腹泻率下降（C组腹泻率为33；D组腹泻率为100）。同时可使轮状病毒肠炎病程缩短（C组腹泻病程为03天，D组腹泻病程为24天）。目的1轮状病毒性肠炎动物模型的建立；2轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的改变；3中药止泻液对轮状病毒性肠炎肠道水通道蛋白的影响。材料与方法1研究对象清洁级昆明种乳鼠，由中山大学实验动物中心提供。2轮状病毒人轮状病毒于2007年11月取自广州市儿童医院门诊诊断为轮状病毒感染患儿的粪便。猴轮状病毒（SA11株）由中国协和医科大学生物学研究所馈赠。3轮状病毒性肠炎动物模型的建立腹泻组（B组）每只乳鼠分别用150UL含1104TCID50轮状病毒液灌胃；空白组（A组）用冻融离心后