Ezrin蛋白与肿瘤转移PPT课件.ppt

,Ezrin蛋白与肿瘤转移的关系,项目负责人：罗茜项目组成员：徐晓萌、刘华旭、刘丹、周瑞泉指导老师：王悦副教授2010-04-11,1,项目实施背景,癌症是全世界人口死亡的重要原因之一。约80的恶性肿瘤患者死于肿瘤转移。侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，是肿瘤患者死亡的主要原因。埃兹蛋白(ezrin)即为近年在肿瘤侵袭和转移研究中的相关蛋白，大量研究表明该蛋白在很多肿瘤组织中都有异常表达，并与促肿瘤转移有关。,2,项目实施背景,埃兹蛋白(Ezrin)为膜细胞骨架连接蛋白，是连接细胞膜和细胞骨架之间的ERM(Ezrinradixinmesin，埃兹蛋白根蛋白膜突蛋白)家族成员之一。常与根蛋白、膜突蛋白共同表达于细胞膜内侧。现在普遍认为它通过与CD44，E钙黏素(Ecadherin)、整合素等细胞表面分子形成复合体，调节细胞粘附，参与肿瘤细胞信号转导和肿瘤细胞吞噬等机制。,3,项目实施目的,通过查阅文献，我们发现有关埃兹蛋白与肿瘤转移的关系并不十分明确。埃兹蛋白在不同的细胞中过表达或低表达，对肿瘤转移的影响也是不同的。我实验小组拟通过研究分析肺癌细胞系中埃兹蛋白（Ezrin）的过度表达与低表达对肿瘤转移活性的影响，探讨埃兹蛋白在肿瘤发生发展中的作用，从而对于肿瘤转移机制有更进一步的认识。,4,项目实施意义,Ezrin,了解肿瘤侵袭和转移的机制,为临床观察肿瘤患者预后，转移提供参考指标,可能成为肿瘤分子靶向治疗的突破点,5,实验2组,对照组,RT-PCR技术检测与肿瘤转移相关基因的mRNA水平表达情况,实验1组,Ezrin蛋白高表达的肺癌细胞（PG-LH7）,Ezrin蛋白低表达的肺癌细胞（BE1）,统计学分析,正常昆明小鼠,结论,荷瘤小鼠,肿瘤形态学观察检测（形态、大小、重量、腹水形成、HE染色）,实验流程图,6,实验方法,10只，标准条件下喂养,16只，将BE1注射到种鼠中，引起癌性腹水。抽取腹水稀释后，每只小鼠腹部注射癌瘤液0.2ml。,16只，将PG-LH7注射到种鼠中，引起癌性腹水。抽取腹水稀释后，每只小鼠腹部注射癌瘤液0.2ml。,对照组,实验1组,实验2组,造模及分组,7,小鼠成活时及死亡后，从新鲜癌旁组织提取mRNA用PCR仪分析，对比3组样品中，已确定的与肿瘤转移有关的基因表达相关的mRNA（如IL-6、MMP-2，4，9、VEGF等）表达差异,小鼠死亡后，予以解剖，取出肿瘤组织，用游标卡尺测量肿瘤组织的直径，用电子天平称量肿瘤重量,Ezrin蛋白与肿瘤转移关系,观察指标,mRNA水平观察,形态学观察,8,预实验：熟练建立模型，掌握PCR技术,实施实验，观察记录,分析指标,2010.052010.06,2010.072010.10,2010.11-2011.01,项目实施进度和安排,实验成果总结，撰写论文,2011.02-2011.04,Ezrin蛋白与肿瘤转移关系,9,探索Ezrin蛋白与肿瘤转移的相关性促进？抑制？无关？,预期成果,发表核心期刊论文1篇,Ezrin蛋白与肿瘤转移关系,10,经费预算,Ezrin蛋白与肿瘤转移关系,11,主要参考文献,1YuY，KhanJ，KhannaC，eta1ExpressionprofilingidentifiesthecyToskeletalorganizerEzrinandthedevelopmentalhomeoproteinSix一1askeymetastaticregulatorsJNatMed，2004，10(2)：1752谢丽，杨俊玲，张培莲，细胞骨架蛋白Ezrin的生物学特性，现代肿瘤医学2009年1月第17卷第1期3MartinTA，HarrisonG，ManselRF，eta1TheroleoftheCD44-EzrincomplexincancermetastasisJCritRevOncolHematol，2003，46(2)：1654史荣亮，李建芳，翟颖，等肿瘤转移相关基因Ezrin在胃癌中的表达及意义J中华胃肠外科杂志，2006，9(5)：433-4355HushesSC，FehonRGUndemandingERMproteins-theaweBornepowerofgeneticsfinallybroutobearJCurtOpinCellBio，2OO7，19(1)：51566SaotomeI，CurtoM，McOatchey,4F13nisessentialforepithelialorganizationandvillusmorphogenesisinthedevelopingintestineJDevCell，2004，6(6)：8558647TamuraA，KikuchiS，HataM，eta1Achlorhydriabyezrinknockdown：DefectsintheformationexpansionofapicalcanaliculiingastricraietalcellsJJCelBiol，2005，169(1)：21288屈洪波,Ezrin蛋白与肿瘤侵袭转移的研究进展,实用癌症杂志2009年1月第24卷第1期9ShenZY，XuLY，ChenMH，eta1UpregulatedexpressionofFFinandinvasivephenotypeinmalignantlytransformedesophagealepithelialcellsJWorldJGastroenterol，2003，9(6)：11821186,12,ThankYou!,请各位老师指正！,13,实验进