江苏省淮安中学高三生物总复习 13-3DNA的粗提取与鉴定学案

用心 爱心 专心1 第十三部分第十三部分 生物技术实践生物技术实践 第第 3 3 课时 课时 DNADNA 的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 具体要求具体要求 具体内容考纲学习要求 尝试对植物或动物组织中 的 DNA 进行粗提取 A 理解实验目的 原理 方法和操作步骤 掌握 相关的操作技能 并能将实验涉及的方法和技 能进行综合运用 了解 DNA 的物理化学性质A 知道生物大分子的性质及一般的提取方法 明 确 DNA 的粗提取和鉴定方法 理解 DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理 B 能对实验现象和结果进行解释 分析和处理 能对实验方案做出恰当的评价和修订 基础知识基础知识 一 原理一 原理 提取生物大分子的基本思路是 对于 DNA 的 粗提取而言 就是要利用 等在物理和化学性质方面的差异 提取 DNA 去除其他成分 1 1 DNADNA 的溶解性的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同 利 用这一特点 选择适当的盐浓度就能使 充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 此外 DNA 不溶于 溶液 但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精 利用这一原理 可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离 思考 如何用坐标表示 DNA 随 NaCl 溶液变化的 溶解性曲线 2 2 DNADNA 对酶 高温和洗涤剂的耐受性对酶 高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 但是对 没有影 响 大多数蛋白质不能忍受 60 80oC 的高温 而 DNA 在 以上才会变性 洗涤剂 能够瓦解 但对 DNA 没有影响 3 3 DNADNA 的鉴定的鉴定 在 条件下 DNA 遇 会被染成 色 因此 二苯胺 可以作为鉴定 DNA 的试剂 二 实验步骤二 实验步骤 1 1 实验材料的选取 实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑 但是使用 的生物组织 成功的可能性更大 思考 在下面的生物材料中选取适合的实验材料 鱼卵 猪肝 菜花 花椰菜 香蕉 鸡血 哺乳动物的红细胞 猕猴桃 洋葱 豌 豆 菠菜 在液体培养基的大肠杆菌 2 2 破碎细胞 获取含 破碎细胞 获取含 DNADNA 的滤液的滤液 动物细胞的破碎比较容易 以鸡血细胞为例 在鸡血 细胞液中加入一定量的 同时用 搅拌 过滤后收集滤液即可 思考 如果实验材料是植物细胞 需要先用 溶解细胞膜 例如 提取洋葱 的 DNA 时 在切碎的洋葱中加入一定的 和 进行充分的搅拌和研磨 过滤后收集研磨液 3 3 去除滤液中的杂质 去除滤液中的杂质 思考 用高盐浓度的溶液和用低盐浓度的 NaC 溶液为什么能够除去与 DNA 溶解度不同 的多种杂质 4 4 DNADNA 的析出与鉴定的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤 加入与滤液体积 冷却的 静置 溶液中 会出现 这就是粗提取的 DNA 用玻璃棒 搅拌 卷起丝状物 并用 用心 爱心 专心2 滤纸吸取上面的水分 DNA 溶解在 2 mol l的 NaCl 溶液中 二苯胺试剂 溶液颜色变 思考 鉴定粗提取的 DNA 为什么要进行对照实验 三 典型例题 1 09 通州 DNA 的粗提取和鉴定 实验的叙述 正确的是 A 利用 DNA 能溶于酒精溶液 而蛋白质不溶于酒精溶液 可将 DNA 与蛋白质分离 B 利用高温能使蛋白质变性 却对 DNA 没有影响的特性 可将 DNA 与蛋白质分离 C 在 DNA 滤液中加入一定量蛋白酶 可将 DNA 与蛋白质分离 D 在溶有DNA 的 2mol L 氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水 搅拌后 取滤液进行以后实验 2 09 南通 下列对 DNA 的粗提取和鉴定 实验的叙述 正确的是 A 利用 DNA 能溶于酒精溶液 而蛋白质不溶于酒精溶液 可将 DNA 与蛋白质分离 B 利用85 的高温能使蛋白质变性 却对DNA 没有影响的特性 可将DNA 与蛋白质分离 C 利用 DNA 在 0 14 mol L 1NaCl 溶液中溶解度最大的特点 可将 DNA 与杂质分离 D 在 DNA 滤液中加入嫩肉粉 通过木瓜蛋白酶的作用 可将 DNA 与蛋白质分离 3 09 扬州 下列关于 DNA 粗提取和鉴定实验的叙述中 正确的是 A 选材 鸡血 因为鸡血红细胞有细胞核 其它动物红细胞没有细胞核 B DNA 粗提取 不同浓度的 NaCl 溶液 因为 DNA 在其中溶解度不同 C 提纯 酒精 因为 DNA 溶于酒精 蛋白质不溶于酒精 D 鉴定 二苯胺试剂 因为 DNA 溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色 4 下列操作可以达到目的的选项是 选 项 操作目的 A 溶解海藻酸钠时用大火加热海藻酸钠可以快速溶解 B 将装有蛋白质粗制品的透析袋 玻璃纸 制成 放入透析液中 蛋白质与其他小分子化合物分 离 C 在 DNA 粗提取实验中 鸡血中加入蒸馏 水 稀释血液 防止凝固 D 洋葱根尖解离后漂洗使细胞分散 有利观察 5 多选 09 苏北四市 DNA 的粗提取和鉴定 实验的叙述 不正确的是 A 利用 DNA 能溶于酒精溶液 而蛋白质不溶于酒精溶液 可将 DNA 与蛋白质分离 B 利用高温能使蛋白质变性 却对 DNA 没有影响的特性 可将 DNA 与蛋白质分离 C 在 DNA 滤液中加入一定量蛋白酶 可将 DNA 与蛋白质分离 D 在溶有 DNA 的 2mol L 氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水 搅拌后取滤液进行以后实验 6 6 0909 兴兴化 化 某同学以菜花为实验材料 进行 DNA 的粗提取与鉴定 实验 步骤如下 步骤一 称取 30g 菜花 去梗取花 切碎 步骤二 将碎菜花放入研钵中 倒入 10mL 研磨液 充分研磨 10min 步骤三 在漏斗中垫上滤纸 将菜花研磨液过滤到烧杯中 在冰箱中放置几分钟 取 上清液 步骤四 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的某溶液中 并用玻璃棒缓缓 轻轻地搅 拌溶液 将絮状物缠绕在玻璃棒上 请回答下列问题 1 请指出并改正该同学实验操作中的错误 用心 爱心 专心3 2 步骤二的目的是使菜花细胞破碎 释放 DNA 加入研磨液的主要成分有 和 等 3 如要使步骤三所得上清液中杂质减少 可进行 操作后再置于冰箱 4 步骤四中所用两倍体积的某溶液为 需 缓缓 轻轻地 搅拌 溶液的原因是 5 简要说明鉴定步骤四所得絮状物是 DNA 的基本实验设计思路 1 滤纸应