蛙神经-肌肉标本的制备及刺激与肌肉收缩的关系

蛙神经-肌肉标本的制备及刺激与肌肉收缩的关系,李涛Tel666049Email:,一、实验目的,1.观察给予不同强度刺激时骨骼肌的收缩情况，验证刺激强度与肌肉收缩的关系。2.观察剌激频率与收缩形式之间的关系，了解单收缩和强直收缩。,二、实验原理,坐骨神经是由多条神经纤维组成的神经干，神经干中各组成纤维的兴奋性有所不同。刚刚引起肌肉收缩所需的刺激强度称为阈刺激强度。随着刺激强度的增加，坐骨神经干中发生兴奋的纤维数目随之增多，肌肉收缩的幅度也随之增大。当神经干中的全部纤维都发生兴奋时，所需的最低刺激强度称为最大刺激强度。阈刺激强度至最大刺激强度之间的刺激称为阈上刺激强度。超过最大强度的刺激，神经所支配肌肉的收缩幅度不再增强。,二、实验原理,肌肉组织对于一个阈上强度的刺激发生一次迅速的收缩反应，称为单收缩。两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经肌肉标本，如果刺激间隔小于单收缩的时程，则出现两个收缩反应的重叠，称为收缩的总和。 强直收缩：不完全强直收缩；完全强直收缩,三、试剂与器材,蛙、计算机、MedLab生物信号处理系统、解剖针、手术剪、圆头手术镊、尖头手术镊、玻璃勾针、蛙板、肌槽、连接导线、张力换能器、刺激输出线、任氏液、棉花、棉线、烧杯。,神经肌肉标本（自己制备）在神经上施加电刺激准确记录骨骼肌张力,借助Medlab,四、实验步骤,1.材料和方法 (Materials and methods ),实验动物（laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad）,雄性蟾蜍皮肤光滑，前肢趾上有黑色婚垫，会鸣叫。雌性蟾蜍皮肤粗糙，无婚垫，不会鸣叫。,婚垫,雄蟾,雄蟾,雌蟾,1.破坏脑和脊髓,！判断脑脊髓破坏成功的标准四肢肌肉松软，呼吸消失。,图1-1 破坏蟾蜍脑脊髓的方法,2.剪除躯干上部及内脏,！注意勿损伤脊柱两侧的坐骨神经。,图1-2 剪除躯干上部及内脏,3.剥皮,！注意保护脊柱两侧的坐骨神经束，镊子不要夹住坐骨神经。,图1-3剥掉后肢皮肤,将标本放入盛有任氏液烧杯中，不能用自来水清洗标本洗净手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械。,任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成，每升溶液含NaCl 6.5g、KCl 0.14g、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。可用于蛙的组织、器官润湿和营养。,4.分离两腿,！注意不可剪歪，以防坐骨神经损伤,图1-4分离坐骨神经,5.分离坐骨神经,！玻璃针钝性分离！忌用金属器械触、夹神经，防止过度牵拉神经。！用任氏液保持神经湿润。,5.坐骨神经-腓肠肌标本,图1-5坐骨神经腓肠肌标本,6.仪器标本连接将张力换能器固定在铁支架上，肌肉标本的股骨固定于支架下端，腓肠肌跟腱的结扎线连于张力换能器的受力片上，连线应松紧适宜，并与桌面垂直，张力换能器的输入端接Medlab系统的1通道插座。把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上或将刺激电极与肌肉直接接触。,完整的标本应包括四部分：一段脊柱骨、坐骨神经、腓肠肌、一段股骨头。,肌肉收缩检测模式图,earth,刺激电极,记录电极,神经传导动作电位检测