实验动物中心.ppt

實驗動物中心 中央研究院生物醫學科學研究所 使用說明會 2002年2月27日 一 動物中心改建簡述 生醫所舊動物室原位於前棟大樓6樓 因為下列幾項原因改建 寄養動物遭受病毒 寄生蟲等感染硬體設備 無恆溫 恆溼 和空氣過濾設備 寄養空間不足符合國際期刊對實驗動物的規定改建經過原寄養動物由舊大樓六樓搬遷至新大樓十樓 4 2001 院方同意撥款改建 9 2001 改建工程於2001年10月23日招標 11月1日施工 於2002年2月28日完工原飼養動物於1 2002安樂死 新動物中心預定3月啟用請黃坤正博士擔任動物室整建計劃總顧問新動物中心位於生醫所前棟大樓6 7樓 佔地大約500坪 動物中心講習會目的 讓使用者熟悉動物中心各項設施 讓使用者了解操作實驗動物的正確方法 以符合國家法律規定 讓使用者明瞭並遵守動物中心的各項規定 絕對避免實驗動物再次遭受感染 無特定病原動物繁殖區 8 無特定病原動物寄養區 7 兩棲動物寄養區 2 感染動物寄養區 2 無特定病原區入口 六樓平面圖 清洗區 七樓平面圖 一般小鼠 大鼠寄養室 Rm710 711 兔房 60隻 Rm703 動物行為實驗室 Rm704 705 706 707 二 實驗動物之使用概念 實驗動物之感染病原 note 病毒 如MouseHepatitisVirus SendiVirus Adenovirus等 Mycoplasma細菌 如Leptospira Pasteurella Listeria等 黴菌寄生蟲 如Mybia Coccidia Syphacia等 實驗動物之感染途徑 note 避免嚙齒類病源菌進入生醫所避免嚙齒類病源菌進入生醫所動物中心將嚙齒類病源菌鎖定在最小的感染區間 並儘快消滅 Reagents CelllinesBloodproducts 如何降低污染發生 空氣 動物房內之空氣皆通過HEPAfilter 食物 放射線處理 飲水 逆滲透純水 墊料籠架及用品 經高壓滅菌鍋處理 儀器 需經消毒處理 生醫所舊動物室或其他動物中心採取的血液 細胞製品 絕對禁止攜入新動物中心人員 應避免與嚙齒類感染源接觸 家中不養寵物鼠 原則上禁止進入其他動物中心 如必須進入其他動物中心 必須先行報備 暫時取消進入生醫所動物中心密碼 之後 需經重新申請 於兩週後方得進入本所動物中心 動物保護及動物權 Replacement替代Reduction減少Refinement精練 3R概念 note 農委會制定 動物保護法 所依據之原則國際上對動物實驗之基本要求 三 動物中心組織 相關單位位階 動物實驗管理小組 本小組依 動物保護法 第十六條第四項規定及 動物實驗管理小組設置辦法 設置之 成員 依動物實驗管理小組設置辦法之規定 由本所副所長擔任召集人 遴選動物實驗相關之P I 五人 動物中心主任為當然成員 加上動物中心獸醫師共七人所組成 現有成員為 王寧副所長 Dr 陶秘華 動物中心主任 Dr 唐堂 Dr 李小媛 Dr 何美鄉 Dr 趙麗洋 孫家信 動物實驗管理小組職責 每月至少開會一次 聽取動物中心之業務報告 並提出意見 對本所 動物實驗申請表 審核 提供本所有關動物實驗之科學應用諮詢意見 提供本所有關實驗動物飼養設施改善之建議 監督本所實驗動物之取得 飼養管理及應用等行為 提供本所年度執行實驗動物之監督報告 訂定本所動物中心之相關使用規則 對於違反動物中心規則及相關規範者 制定懲處規定 動物中心人員執掌 1 動物中心主任將聘僱專職人員 在此之前 可由生醫所實驗室P I 兼任 兩年一任 動物中心人員執掌 2 職稱 姓名 工作職掌 臨時 助理 黃麗蓉 繁殖區動物飼養 動物訂購單處理 臨時 助理 劉文英 實驗區動物飼養 無菌服裝用品準備 手術 房清潔維護 臨時 助理 王仁豪 檢疫房動物飼養 無菌用品滅菌及準備 飼 料庫房清潔維護 臨時 助理 羅如熙 七樓兔房 Rat 房 Mice 房飼養管理 外包 用品清洗 飲水及墊料裝填 清洗滅菌區及 走道清潔維護 動物屍體冷凍庫整理 四 動物中心使用規則 一 人員之出入 使用者資格 使用之申請 使用時間 活動範圍 參觀本中心 使用者資格 凡是生醫所P I 博士後研究員 助理 學生皆可利用本中心 短期 兼任 合聘人員及暑期生等 以個案提出申請 送交 動物實驗管理小組 討論 使用人離職或因職務變更時 須事先與在職同仁交接 更改使用人並填寫 使用人員交接書 後 才可簽辦相關手續 使用之申請 1 所有動物實驗需先填寫 動物實驗申請表 由動物實驗管理小組審核同意後方可進行 相關申請表格及說明已經上網 提供下載 生醫所首頁 行政文件下載 動物室 動物實驗申請表 及其 動物實驗申請表說明 以WINZIP解壓縮成WORD文件 Macusers或無法解壓縮者 請直接與動物中心聯絡 動物實驗申請表 必須以打字填寫 填寫請參照 動物實驗申請表說明 之範例 以WORD直接鍵入 建議使用標楷體 12號字 填寫後 請將列印好之文件及電子檔各一份 送交動物中心彙整後 由 動物實驗管理小組 進行分組審查 使用之申請 2 第一次使用本中心 請於一週前向本中心提出 使用申請書 經動物中心主任同意後使用之 為維護本中心之安全 初次使用者在使用前 必須接受本中心之 實驗動物中心使用說明會 並經考試及格 將發予證書與及格編號 核准使用 使用時間 為了方便使用者進行實驗研究 本中心全年 全天候開放使用 由於光照週期的紊亂將造成實驗動物體內激素的改變 干擾正常之生理反應 因此希望使用者能盡量在預設之光照時間 8 00AM 8 00PM 內進行實驗 燈光控制 在非預設光照時間使用動物房 必須在進入SPF動物區前 先至獸醫檢驗房旁 將該動物房之燈光控制開關轉到手動 工作完畢後 記得將開關轉回自動 否則以違規處置 燈光控制盤位置 自動 手動 活動範圍 本中心包含生醫所前棟大樓6 7樓 每人使用本中心範圍 將以刷卡管制 為了避免交互感染 除了指定的實驗室及動物飼育室外 嚴禁進入其他區 室 不得代人刷卡 不得自行邀請他人進入自己的動物飼養房參觀 個別飼養房中之儀器 推車等 不得私自移動 刷卡門禁 本中心採用門禁刷卡管制系統 並以攝影機輔助監控 人員進入時 每一個人皆需刷卡 不得借卡或代刷 違者如經查獲 將報請 動物實驗管理小組 嚴懲 如果忘記帶卡 請向動物中心申請 以取得密碼進入 參觀本中心 嚴禁自行帶所外人士及非本實驗人員至本中心參觀 擬到本中心參觀者 請事先向本中心提出書面申請 經本中心主任同意後方得進入參觀 非經同意 不得於本中心內拍照 攝影 為了本中心的安全 嚴防污染源帶入本中心 參觀者在進入時 必須嚴格遵守本中心相關之規定 二 動物之訂購與出入 訂購動物 入室之申請 檢疫 動物之出入 訂購動物 向國內地區或機構購入動物時 請填寫 實驗動物代訂申購單 後交至動物中心 其訂購及付款手續 將由本中心代為統籌辦理 如向國外地區或機構購入動物時 則請使用單位自行辦理 並於購買同時 知會動物中心 以利日後作業 訂購動物前 請先向動物中心確認 是否該計劃項下仍有實驗動物額度 入室之申請 如由本中心代訂國內動物 則於填寫 實驗動物代訂申購單 時一併填寫 動物入室申請書 待飼養空間確認允許後 才向該單位訂購 若無空間飼養時 本中心將回覆申請者 取消動物申購 購自國外之動物 請於抵達前一週先向本中心提出 動物入室申請書 並附上相關之動物資料 待本中心確定飼養空間之準備狀況後 於三日內通知使用單位動物搬入之日期 若動物數量或抵達時間有所更改 請立即通知動物中心 以便進行調度 如需將動物移動至不同區室 請於一周前填寫 動物入室申請書 送交動物中心 核可後方能搬運 檢疫 除了本中心自行生產 特殊品係鼠 或國家實驗動物中心所生產之動物外 都得經過本中心一定期間之檢疫 合格後方得搬入動物飼育室供做實驗用 每一批訂購動物 必須提供一隻作為檢疫之用 檢疫時動物飼養在特製的isorack飼養車 20盒 每個飼養盒完全隔離 檢疫期間通常為兩週 必要時得延長檢疫期間 一但動物未通過檢疫 不得進入本中心 動物之出入 使用者不得無故擅自變更動物放置的區 室位置 入室時間確定後 如超過預定時間48小時仍未入室 以自動放棄論 欲再使用時 須重新提出申請 本中心內之動物移動採單一方向制 本所內動物攜帶方式 使用加濾蓋鼠盒 並用塑膠袋包裹攜出 入 生醫所動物中心動物移動方向 不同區間之動物運輸方式 動物進出各區皆採人員與動物分離的方式 人員進出各區 需按規定換穿衣服 如需攜帶動物進入不同區域 請於一周前向動物中心提出 動物入室申請書 搬運動物當天 請通知動物中心工作人員協助無特定病原動物繁殖區 少量 由PassBox進出 大量 由AirShower旁走道進出 無特定病原動物寄養區 由AirShower旁走道進出 三 儀器設備之出入 1 任何需要放置在動物中心的實驗裝置 手術器材等 要搬入或搬出動物中心時 使用者須事先到本中心填寫 申請書 經本中心主任同意後行之 儀器入室有使用期限規定 最長期限為一年 但得逐年申請 連續使用 攜入本中心之各實驗室專用的實驗用具 應用不易消失之筆墨 標明使用者所屬單位名稱 藥劑 物品則標明使用者姓名 品名及日期 並於申請期限到期前 清理後 按照規定帶離動物中心 三 儀器設備之出入 2 一般實驗器材 如針筒 針頭 手術器械等 需經酒精噴霧消毒 方得進入動物中心 大型實驗儀器進入各區室前 請先向動物中心申請 如無法以酒精噴霧直接消毒者 需先以酒精棉將外圍擦拭後 以室內UV照射約5分鐘後 方能進入各區室 如有疑問 請洽動物中心人員詢問處理方式 四 動物之飼養管理 1 動物飼育區室之分配 基本上將指定P I 使用固定之實驗房號 在本中心內飼養或實驗中的動物 其飼養管理原則上由本中心人員負責 如須限飼 限水 餵飼特別飼料等請在 飼養管理表 上記錄並於籠上標註 四 動物之飼養管理 2 動物飼養將依據各動物飼育室空間大小調整檯車數目 每台車最多放置 mice兩面共十排 每排最多七盒 每盒最多五隻rats則最多放置一面共五排 每排最多五盒 300克以下每盒最多五隻 400克以上每盒最多三隻 500克以上每盒最多兩隻 如實驗中有需要自行繁殖動物 幼鼠最遲應於四週齡前離乳分籠 飼養籠 車 錯誤示範 飼養管理紀錄表 每一使用者在動物搬入 出動物飼育室時 必須填妥飼養 管理記錄表 此表隨附在使用者分配之動物飼育室 以便使用者在動物飼養期間據實填寫 此表亦可做本中心與使用者間之聯絡用 諸如 動物之健康狀況 手術前絕食 運動及預定使用等 動物中心工作人員每週定期核對該表 並以此作為收費之用 逃鼠處理 note 操作時 應以一次開一籠為原則 並請隨手蓋上盒蓋 以防老鼠逃脫 若不慎逃出時 請立即以空鼠盒倒扣方式補捉 以防遭鼠咬 若無法尋獲時 應小心勿使逃出門外 並馬上向本中心工作人員報告 如因假日無法通知動物中心人員處理時 請於動物房及入口大門處貼上警告標示 提醒後來之使用者注意 並於次一個上班日時 於第一時間通知動物中心人員處理 操作時 老鼠掉落地面 如能馬上拾起 可放回盒內繼續飼養 如果老鼠逃行一段距離 捕獲後 必須施以安樂死 違規處理 使用者在動物飼養期間 如有實際飼養動物數與記錄不符 記錄不確實 逾期飼養及其他飼養上之違規事項 動物中心將發予 違規通知單 給各P I 如三日內不見改善 動物中心將再次發出 二次違規通知單 並以e mail通知P I 同時報請動物實驗管理小組處理 健康監測 為維護本中心的動物品質 除針對各可能污染源嚴密管制外 並且每隔一個半月 對各飼養區 含七樓 室進行健康監測 各籠車中央需空出一格 放置監測用衛兵鼠 監測項目包含Mousehepatitisvirus Mycoplasma SendiVirus之ELISA檢驗 病理解剖 細菌培養等 如有區 室發生感染 該區 室將立即予以隔離動物中心將根據進出紀錄 追查可能的感染來源 並報請 動物實驗管理小組 討論處理方法 五 動物屍體 污物之處理 1 為了保持本中心內的清潔 動物屍體或易腐敗的污物 請放入本中心預備之塑膠封口袋 貼上貼紙並註記實驗人員姓名及動物隻數後 放入本中心入口處之屍體放置專用冰箱中 由本中心專職人員統一處理 請勿使用薄而易破的普通塑膠袋裝放屍體 污物 確保冷凍箱及周圍環境之清潔 五 動物屍體 污物之處理 2 利用放射線物質或其他有毒物質進行之動物實驗 其屍體之處理 請遵照本所安全之相關規定 交由安全室放於專用冷凍庫 統一處理 動物中心飼養人員如發現有動物死亡 將以塑膠封口袋 貼上貼紙並註記實驗人員姓名及動物隻數後 放入獸醫檢驗室內 放置動物屍體之專用冰箱中 並立即以電話通知實驗人員所屬之實驗室處理 五 動物屍體 污物之處理 3 實驗人員或其代理人 應於24小時內 與動物中心獸醫聯絡 討論處理及採樣方式如逾時 則本中心獸醫將依一般屍體解剖程序進行 初步判定是否有重大傳染病的可能性 以便做進一步的處理 冰箱位置 安樂死之處理 本中心主要以CO2對動物進行安樂死 由各實驗助理於實驗結束後或依實驗需求進行 如有需要使用以其他方式進行安樂死 請個別洽動物中心人員 CO2操作方式 動物放入盒中時須留意不要一次放入太多隻數 當老鼠重疊時 下層老鼠不易安樂死 緩緩打開CO2鋼瓶金屬閥至標線位置 一下子開量太大 易造成動物驚恐不安 2分鐘後可先將CO2鋼瓶關閉 但仍保持盒蓋密閉 安樂死所需時間 Mice Rat約須4分鐘 Rabbit約須10分鐘 死亡與否 以動物心跳停止為準 發現無CO2時 請依順時針方向旋轉黑色調壓閥 若旋至底仍無CO2 請通知中心專職人員更換 Mice之安樂死Rats之安樂死 六 各區室之使用 無特定病原動物繁殖區 無特定病原動物寄養區 感染動物寄養區 一般動物寄養區 兩棲動物寄養區 手術室 一般通則 1 首次使用者 得依規定 先向本中心提出使用申請書 經本中心主任同意後使用 除本中心之專職人員 及申請合格之研究人員外 未經本中心主任許可 嚴禁任何人擅自進入 請盡量減少進出動物中心次數 一天以一次為原則 每次進出動物中心將收取費用 進入動物中心前 請將手錶 戒指等取下 以利充分消毒並避免污染 一般通則 2 研究人員離室前 務請在 飼養管理記錄表 上記錄任何異動情形 離室前 必須把自己用過之空間整理清掃乾淨 以方便其他使用者 垃圾請帶出置於指定處所 離室後 必須確認本室內之燈源保持在自動狀態 一般實驗動物操作 原則上僅限於該動物房中 如該動物採取組織後即予以安樂死 則可使用走廊之無菌操作檯 一般通則 3 每間房間有一移動式操作車和一高腳椅 如果不夠 可按規定向動物室申請 工作結束後 請隨時保持操作車之淨空 在動物房中使用針頭等尖銳物品後 請確實清除 以保障後續使用人員之安全 動物進出請確實清點數目 以及早發現脫逃動物 避免中心環境之污染 收費標準 SPFMice5元 籠 日SPFRats12元 籠 日六樓無菌衣45元 次七樓Mice3元 籠 日七樓Rats 吊籠 3元 籠 日七樓Rats PC盒 6元 籠 日七樓兔子30元 籠 日七樓無菌衣45元 週 人 無特定病原動物繁殖區 無菌操作檯位置 無特定病原動物繁殖區 1 進入無特定病原動物繁殖區時 請嚴守下列各項規定 於進入無特定病原動物繁殖區時 先在第一更衣室 脫衣室 內 脫去鞋 襪及外衣褲 放入衣櫥內後 用藥皂洗手 並將手腳用噴霧器噴霧消毒後 通過AirShower進入第二更衣室 於第二更衣室內 穿上本區專用之白色防護衣 褲 戴上帽子 口罩 手套及襪子 並改穿本區專用之拖鞋後 方得進入本區 請記得要帶識別證 先消毒 以便刷卡進入動物房 無特定病原動物繁殖區 2 離開時 請先通過AirShower進入第一更衣室 將自己衣物穿上 並將用過之防護衣 褲 帽子 口罩 手套 襪子帶出更衣室 集中置放 由本中心人員處理 人員於進入 無特定病原動物繁殖區 前 應先確認健康狀況 如有腹瀉 咳嗽等症狀 原則上不宜進入 各實驗室應將使用 無特定病原動物繁殖區 的人員 控制在最少數目 垃圾請集中置於無菌操作檯旁之垃圾筒內 無特定病原動物寄養區 無菌操作檯位置 無特定病原動物寄養區 進入 無特定病原動物寄養區 時 在入口處先用藥皂洗手 然後進入更衣室 用噴霧消毒器消毒手腳 脫去實驗衣 放入櫃子內 穿上本區專用之綠色防護衣 褲 戴上帽子 口罩 手套及襪子 並改穿本區專用之拖鞋後 方得通過AirShower進入本區 離開時 請先通過AirShower進入更衣室 將自己實驗衣穿上 並將用過之防護衣 褲 帽子 口罩 手套 襪子帶出更衣室 集中置放 由本中心人員處理 垃圾請集中置於無菌操作檯旁之垃圾筒內 感染動物寄養區 無菌操作檯位置 進行人