绪论2012年下半年.ppt

绪论 一 组织学与胚胎学的研究内容二 组织学与胚胎学的发展简史三 组织学与胚胎学的研究技术四 组织学与胚胎学的常用术语五 组织学与胚胎学的学习方法 一 组织学与胚胎学的研究内容 组织学 histology 研究机体微细结构及其相关功能的科学 胚胎学 embryology 研究个体发生 生长 发育机制的科学 2 胚胎学研究内容 1 组织学研究内容 细胞 精子卵子 胚前 胚胎 胚后 了解内容自学 二 组织学与胚胎学的发展简史 三 组织学与胚胎学研究技术 1 组织切片技术 石蜡切片制作技术 取材和固定脱水和透明浸蜡和包埋切片和贴片染色与封固 H EstainingHematoxylin苏木精 basicdye purple blueEosin伊红 aciddye pink Frozensection 冰冻切片 Betterforpreservingchemicalcomponents e g enzymes Freezing cryotome staining 2 组织化学技术 1 一般组织化学技术 PAS反应 糖 紫红色油红O 脂滴 红色甲基绿 焦宁 DNA 蓝紫色RNA 红色 PSA反应 过碘酸雪夫氏反应 periodicacidSchiffreaction 简称PAS反应 是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法 原理 多糖 PA 氧化 醛 Schiff试剂 亚硫品红 紫红色沉淀 猫小肠PAS染色示杯状细胞 复旦大学上海医学院组织胚胎学教研室供图 2 免疫细胞 组织 化学技术利用抗原 antigen Ag 抗体 antibody 特异结合的原理 用已知抗体检测未知抗原的一种方法 辣根过氧化物酶 过氧化物酶 抗过氧化物酶复合法 简称PAP法 peroxidase antiperoxidasecomplexmethod PAP 抗生物素 卵白素 生物素法 简称ABC法 avidinbiotincomplexmethod ABC 链霉亲和素 生物素化酶复合法 简称SABC法 streptavidin biotincomplex SABC 链霉亲和素 即链霉素抗生物素蛋白streptavidin SA 3 活体组织研究技术 组织培养 体外实验invitro 活体染色细胞电泳细胞融合细胞分离低温生物学 4 放射自显影术 亦称 同位素示踪术 是应用某种具有放射性的同位素标记物 注入动物体内或加入细胞的培养基中 该物质被细胞摄取后 将组织或细胞制成切片或涂片 并在暗室中将切片或涂片表面涂一层感光乳胶 这时细胞中的放射性同位素产生的射线就会慢慢地使乳胶感光 经显影 定影处理后 在显微镜下观察标记物的分布和数量情况 就会细胞对某种物质的吸收 合成 分泌和代谢过程 eg 用3H标记的亮氨酸 注入动物体内 3 5min在RER出现 20min在G 1 4h后聚集于酶原颗粒 5 细胞形态结构测量术 细胞形态计量术 应用 图像分析仪 计算细胞内各微细结构的体积 周长 表面积 数量及分布等数值 流式细胞术 应用 流式细胞仪 对单个细胞生物化学和物理特征进行快速定量测定 显微分光光度测量术 应用 显微分光光度计 对标本中微细结构的化学成分及其含量进行测定 6 显微镜技术 据光源不同分为 光学显微镜和电子显微镜 1 光学显微镜 一般光学显微镜 生物显微镜 特殊光学显微镜荧光显微镜相差显微镜暗视野显微镜偏光显微镜倒置显微镜共聚焦激光扫描显微镜 2 电子显微镜 透射电子显微镜 TEM 观察细胞内部结构扫描电子显微镜 SEM 观察组织或细胞表面的立体结构超高压电子显微镜 TransmissionElectronMicroscope TEM ScanningElectronMicroscope SEM ScanningElectronMicroscope SEM 1 HE染色 是用碱性染料苏木精和酸性伊红染色方法 2 嗜碱性 组织或细胞内的酸性物质被碱性染料苏木精染成蓝色 组织或细胞内的这种物质所具有染色特性 3 嗜酸性 组织或细胞内的碱性物质被酸性染料伊红染成红色 组织或细胞内的这种物质所具有染色特性 4 嗜中性 组织或细胞内的某些物质都不被碱性染料苏木精和酸性染料伊红染色 该物质所具有染色特性 5 异嗜性 组织或细胞内的物质染色时 会出现与染料完全不同的颜色 该物质所具有染色特性 四 组织学与胚胎学的常用术语 6 PAS反应 过碘酸 雪夫氏反应 7 Wright和Giemsa染色 瑞特和姬姆萨染色 用正甲蓝 伊红 天青染料 对血涂片进行染色的方法 8 银染法 又称镀银法 染液内含硝酸银溶液 浸染切片后 银离子被还原成黑色颗粒沉淀 某些结