大学生论文干细胞研究综述.doc

学号：20101310108本科毕业论文题 目：干细胞的研究应用发展与存在问题院 系：生命科学技术学院专 业：生物工程班 级：2010级生工（二）班学生姓名：王姣导师姓名：刑雪琨 二一四年六月毕业设计（论文）诚信声明书本人声明：本人所提交的毕业论文肿瘤生物治疗的研究进展是本人在指导教师指导下独立研究、写作的成果，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢辞中加以说明并深致谢意。本论文和资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者： （签字） 时间： 年 月 日指导教师已阅： （签字） 时间： 年 月 日 目 录摘要1Abstract21 干细胞介绍31.1干细胞的定义和分类31.2干细胞特征31.3干细胞的调控机制42干细胞应用52.1干细胞研究意义及价值52.2干细胞研究的应用62.2.1干细胞与临床结合62.2.2干细胞与基因工程结合72.2.3干细胞的基础研究72.2.4干细胞与药物学的结合72.3干细胞应用新思路新进展83干细胞研究面临的问题83.1干细胞研究需要攻克的技术难关83.2干细胞研究需要正视的伦理问题94我国应对干细胞研究局势的对策和建议105展望106参考文献12致 谢12第 14 页 新乡医学院生命科学技术学院毕业论文干细胞的研究应用发展与存在问题摘要21世纪作为生命科学科学技术发展的飞速时期，干细胞应用研究为生物经济时代 的到来将扮演重要角色之一，成为生命科学和临床医学具有强大生命力的重要领域，大有发展之势。由于干细胞具有自我更新和多向分化潜能的功能，使得人们用干细胞治疗多种疾病成为可能。首先对干细胞研究的历史、最新进展，干细胞的应用加以介绍，然后分析研究前景存在的问题和我国发展现状，同时由此带来了一些法律和伦理道德上的争论本文将围绕这些问题加以阐述。关键词：胚胎干细胞；成体干细胞；可塑性；移植治疗Application development and problems of stem cellsAbstractAs the 21st century, the rapid development of science and technology during the life sciences, the application of stem cell research for the arrival of the era of the bio-economy will play an important role as an important field of life sciences and clinical medicine has strong vitality, great development potential. Because stem cells have self-renewal and differentiation potential of features that make people use stem cells to treat a variety of diseases possible. First of history, recent advances in stem cell research on stem cell applications to be introduced， and then analyzed the problems and prospects of the development status quo, while some of the resulting legal and ethical debate on this article will elaborate on these issues.Key words： Embryonic Stem Cells；Adult stem cells；Plasticity；Transplantation therapy1 干细胞介绍1.1干细胞的定义和分类通过查阅文献获知2001年6月17日NIH在广泛综合了当前世界上从事干细胞研究的科学家1200多篇论文的基础上，发表 的干细 胞科学进 展和前景指南（Stem cells：Scientific Progress and Future Research Directions）一书， 对相关概念作了统一定义1,2。干细胞（Stem cell）是来自胚胎、胎儿或成人的是有持久或终身自我更新能力的细胞， 它能产生特异的细胞类型形成人体组织和器官。细胞是动物机体内的一种发育全能性细胞。根据其发育阶段 ，可分为胚胎干细胞（Embryonic Stem Cell）和成体干细胞（Adult Stem Cell）。胚胎干细胞包括 ES 细胞（Embryonic Stem Cell）、EG细胞（Embryonic Germ Cell）;成体干细胞包括神经干细胞（Neural Stem Ce11，NSC）、血液干细胞（Hematopoietic Stem Cell，HSC）、骨髓间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell，MSC）、表皮干细胞（EP idexmis Stem Cell）等。多能干细胞（Pluripotent Stem cell）来自胚泡内层细胞团或胎儿生殖嵴， 具有自我更新能力且维持正常染色体组型的细胞。多能干细胞能产生构成人体生长的所有细胞类型（中、内、外胚层250种以上细胞）3。胚胎干细胞（Embryonic stem cell）是来自胚泡（blastocyst，胚胎早期 45天）内层细胞团（inner cell mass）的一组细胞， 从胚泡分离后可培养成胚胎干细胞。实验室中这些细胞本身不能发育成胚胎。胚胎生殖细胞（Embryonic germ cell）来源于59周胎儿性腺嵴上原始生殖细胞。后期发育的中性腺嵴（primordial germ cell）产生卵子或精子，胚胎干细胞和胚胎生殖细胞都是多能干细胞，但它们的特性和特征不同4。成体干细胞（adult stem cell）：是一种具有终生自我复制（identical copies）或自我更新（self - renewal）能力的未分化细胞 ，它分布于不同的组织，并可演变成为各种类型的组织细胞。成体干细胞分裂产生祖细胞（progenitor）或前体细胞（precursor cell），然后再分化为具有特定形态和功能的“成熟”细胞，如具有收缩功能的肌细胞和有信息传导功能的神经样细胞，来源包括骨髓、血液、眼角膜和视网膜、脑、骨骼肌、齿髓、肝、皮肤、胃肠道黏膜层和胰腺等，其中造血干细胞已用于治疗某些疾病5。1.2干细胞特征干细胞是人体及其各种组织细胞的最初来源，具有高度自我复制能力、高度增殖和多向分化潜能。目前公认的干细胞所应具备的几点主要的细胞生物学特点：（1）具有自我更新能力与自我维持能力，也就是说它可以分裂，分裂后的子细胞与母细胞一样不但能保持其原有的各种细胞生物学特性，而且还可以不断地分裂下去。干细胞一旦形成，在机体内终生都具有自我更新能力，不同于那些具有有限自我更新能力的祖细胞。这对于维持机体组织器官的稳定性有很重要的意义。（2）具有多向分化的能力（多能性或全能性），即可以分化发育成各种胚层组织的细胞（ES细胞），或者可以分化成为本系统各谱系的细胞（特定组织干细胞，如造血干细胞）。（3）具有高度增殖能力，在体内干细胞的高度扩增具有非常重要的意义，如造血干细胞通过高度扩增补充由于细胞正常衰老而丧失的细胞；同时由于干细胞虽具有多能性但数量不多，因而只有通过体外扩增才能对其进行研究。因此干细胞高度扩增不但对机体正常功能的维持起着非常重要的作用，而且对干细胞的研究和应用也有着非常重要的作用。（4）既具有生理性的更新能力，也具有对损伤或疾病导致的反应与修复能力，如骨髓间充质干细胞等。（5）干细胞的自我更新与分化需要特定的微环境，即nitches，也就是说干细胞往哪一种方向分化，必须在该细胞生存的特定微环境前提下进行分化。已有诸多的实验表明，如将 ES细胞种植入小鼠大脑内，这些干细胞将向神经系统分化6,7。 胚胎干细胞（Embryonic Stem cell，ESC）因为其特点成为关注和研究的热点。ES细胞具有以下特性： 全能性：在适宜条件下，胚胎干细胞可被诱导分化为各种细胞组织，这一特性使其在基础研究、移植治疗和基因治疗中具有诱人的应用前景；无限增殖性：理论上，ES 细胞在体外适宜条件下，能在未分化状态下无限增殖，这为 ES 细胞进行的研究和应用提供了用之不竭的细胞来源；遗传上可操作性：即可导入异源基因、报告基因或标志基因、诱导基因突变、基因打靶或导人额外的原有基因使之过度表达等，利用该特性可制作各种实验模型并进行各种基因功能分析8。因此，ES 细胞已成为研究胚胎发生发育、细胞分化和组织形成、基因表达调控及遗传病和癌症发生和治疗等工作的理想模型，同时必将对人类一系列疾病的治疗提供更为有效的方法。可塑性（plasticity）是指一定条件下来自于一种组织的成人干细胞产生另一种组织的特异性细胞的能力， 如骨髓成人干细胞产生类似于神经细胞9。成人干细胞与胚胎干细胞的共同点是，都能自我复制，并能分化成特定细胞类型，移植时均有免疫排斥反应。可塑性其实是干细胞在不同微环境条件下表现出的一种灵活性作用。是干细胞为适应环境而具备的一种特性。干细胞是自我复制还是分化成为功能细胞，主要由于细胞本身的状态和微环境因素所决定。干细胞本身的状态，包括调节细胞周期的各种周期素，周期素依赖酶 ，基因转录因子，响细胞不对称分裂的细胞质因子。微环境因素，包括干细胞与周围细胞，干细胞与外基质以及干细胞与各种可溶性因子的相互作用。1.3干细胞的调控机制干细胞进行自我复制的关键步骤就是它的不对称性分裂。研究发现，对干细胞调控的因素有内源性调控和外源性调控两种。内源性调控因子主要有细胞内的一些结构蛋白和多肽因子，转录因子就是其中之一。如核转录因子Kb（NF-Kb）可以直接刺激肌肉干细胞的增殖与分化，促进伤后的肌肉进行修复10。又如哺乳动物胚胎细胞表达的转录因子Oct-4，在ES细胞的发生中，它通过诱导成纤维细胞生长因子（FGF-4）F的表达和分泌，影响干细胞周围的滋养层细胞成熟，从而调节干细胞的进一步分化11。细胞端粒体的长度也与干细胞的增殖与分化有着密切的关系，研究发现敲除了端粒体基因的小鼠造血干细胞的自我复制能力有显著下降，雄性小鼠的精原细胞发育也受到障碍。由于端粒体的长度影响染色体的功能，从而影响到细胞的分化与增殖。外源性调控因子主要有一些细胞因子。一般而言至少有两种细胞因子在不同的组织甚至不同的种属中调节干细胞的增殖和分化，如转化生长因子TGF和Wnt（编码一组调节胚胎发育的分泌蛋白）家族，TGF对角膜缘干细胞的增殖和分化具有显著的调节作用；TGF-可促使间充质干细胞（MSC）向骨组织分化。Wnt可通过阻止一种细胞粘附分子-Catenin的分解从而激活转录因子Tef/Lef的表达，促进干细胞的分化12。其他因子如神经营养因子（NTF），可促进神经干细胞向神经元分化并促进其存活、生长。此外，细胞外基质对干细胞也有调控作用，其整和素家族是介导干细胞与细胞外基质黏附的最主要的受体，它由和亚单位组成，其中亚单位的胞内段具有酪氨酸酶的活性，参与细胞外基质的信息传递，从而可以直接激活多种生长因子受体，为干细胞的增殖提供合适的微环境13,14。而细胞外基质又是通过整和素的表达和激活来调节基底膜成分的变化及干细胞的微环境中分泌因子的含量，进而影响干细胞的分布和分化方向的。2干细胞应用2.1干细胞研究意义及价值干细胞是人体及其各种组织细胞的最初来源，具有高度自我复制能力、高度增殖和多向分化潜能。因其高度可塑性和在组织器官移植、细胞治疗、组织工程、新药筛选以及生殖遗传工程方面的潜在应用价值，近年来已成为生命科学研究领域中最热点的课题之一，并逐渐成为基础医学和临床研究的新兴领域。胚胎干细胞是细胞的源头，具有多能或全能性，并能够无限分化，能够制造机体需要的全部细胞，因此在医学和生物学上具有巨大潜力，应用前景广阔。当前，对干细胞的分离和培养技术获得了重大进展，随着利用胚胎干细胞衍生的运动神经细胞让瘫痪鼠获得行走能力，以及利用胚胎干细胞培养的精子与卵细胞结合而生育出幼鼠，标志着干细胞技术正从一种实验室概念，转变成能够看得见的现实15,16。干细胞研究正在向现代医学各个领域交叉渗透，干细胞技术为核心的替代或再生治疗为束手无策的、严重危害人类健康的各种慢性或退行性疾病的治疗与康复带来了希望。但关于干细胞研究是论理学之争也一刻也没有停止过。人类干细胞研究取得真正里程碑式的突破是在1998年，这一年University of Wisconsin- Madison的James Thomson从人早期胚胎（胚泡Blastocyst）的内层细胞团分离培养出第一例人胚胎干细胞株；同时Johns Hopkins University的John Gearhart培养成功第一例人类胚胎生殖细胞株（Embryonic germ cell）， 建立了人多能干细胞细胞株， 从此干细胞研究取得了飞跃式发展17。2.2干细胞研究的应用2.2.1干细胞与临床结合组织器官的损伤以及功能障碍是危害人类健康的主要因素之一， 很多人类疾病与特定器官、组织、细胞的病变或受损有关， 如心血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤、帕金森氏症、严重烧伤、脊髓损伤、肝硬化等。移植治疗目前已经成为临床上治疗疾病的一个重要的治疗手段如器官的移植、细胞的移植等，而干细胞移植是移植治疗中的重中之重。干细胞移植不仅能加快组织器官的修复与愈合，而且还能使组织器官的修复达到最高境界：解剖结构与生理功能的彻底恢复。目前临床上进行的替代治疗多来自于供体捐献，例如从流产胎儿脑组织中分离多巴胺能神经元移植治疗帕金森氏症患者18， 或从健康供者胰腺分离胰岛组织移植治疗I 糖尿病患者以及肝、肾等供体器官移植19。然而，供体来源匮乏是当前替代治疗面临的最大困境。寻找新的移植物来源成为当务之急。由于具有多向分化潜能， 干细胞被认为是替代治疗最佳的“种子细胞”。干细胞分化的多种细胞类型可用于细胞替代治疗，将其与组织工程技术结合，在实验室中培育出可用于移植的各种组织和器官。在医学的应用理论上讲，干细胞可以用于临床细胞移植治疗各种疾病和构建人工组织或器官， 应用干细胞治疗疾病较传统方法具有很多优点： 低毒性或无毒性， 一次药有效；不需要完全了解疾病发病的确切机理；不存在传播疾病的风险; 还可能应用自身干细胞移植， 避免产生免疫排斥反应20。临床上常有大面积烧伤皮肤的移植治疗临床上常有大面积烧、创伤的患者因无法迅速恢复其皮肤的屏障功能，导致体液的大量丧失、感染而致死。如果在治疗大面烧、创伤患者时，在患者的创面上移植体外培养扩增的干细胞（表皮干细胞或ES细胞）或由其形成的全层皮肤组织，那么患者的症状相比传统医学疗法将得到很大改善21。 在治疗肌肉损伤方面也为我们带来了曙光，不管是横纹肌还是平滑肌，一旦受创部位的肌膜受到损伤，只能以纤维瘢痕进行修复，且修复后的肌纤维虽然可以修复但是其功能的恢复范围非常的有限。尤其是心肌，毫无再生能力，一旦发生坏死就难以修复。干细胞的出现和应用，将大大改观肌肉组织创伤后的修复方式，使瘢痕愈合成为历史，目前利用骨髓干细胞移植修复心肌实验研究已经取得成功22,23。 近年来，瑞典的神经学家应用从流产胎神经组织的移植治疗瑞典的神经学家应用从流产胎儿脑中分离的神经干细胞，将其移植入帕金森病患者的大脑内进行移植治疗，结果发现有一半以上患者症状得到明显的改善，并且在对术后10年的患者跟踪调查中发现，患者中移植的经干细胞仍然存活并继续产生多巴胺24。 在遗传病的治疗上，干细胞的应用也为我们解决了部分医学难题。遗传性疾病的根治是几个世纪以来人们一直梦寐以求的，现在根据胎儿具有宫内免疫耐受性的特点，利用干细胞进行宫内植治疗遗传性疾病，已经使这一梦想成为了现实。据文献报道利用胎儿造血干细胞进行宫内移植，成功地治疗了纯合子型地中海贫血症并且未发现有嵌和体25。另1996年Wengler等用胎儿父亲的骨髓造血干细胞经宫内移植，治疗X连锁症伴性的严重免疫陷病XSCID也取得了成功26。 此外利用造血干细胞进行骨髓移植治疗造血系统疾病以及癌症等疾病早已成了临床上的重要治疗手段。相信随着干细胞技术的不断发展，干细胞与临床的结合将会越来越广泛，造福人类，减轻患者痛苦。2.2.2干细胞与基因工程结合近十年来，有关将外源基因导入细胞的技术有很大的发展，但是外源基因能成功整合入细胞基因组并长期稳定表达的效率并不高， 而干细胞具有很强的自我扩增能力，能够耐受基因导入后长时间的筛选过程，一旦与外源基因整合，单个稳定表达的细胞就能无限扩增成为稳定的转基因细胞系用于研究，从而避免了体细胞增殖能力有限，需要反复导入的问题。因此，可以利用干细胞作为基因治疗的载体进行移植27,28。由于对基因的改造和修饰可以在体外培养的细胞中完成，减少了基因直接用于人体治疗的未知不良影响，是生产转基因动物的高效载体。利用胚胎干细胞作载体使外源基因的整合筛选等工作能在细胞水平上进行，使操作简便可靠。利用干细胞克隆动物可以克服许多用体细胞克隆无法克服的弊端，如提高成功率、降低早衰率。Wakayama等曾利用长期传代（30以上）的小鼠ES细胞克隆出31只小鼠，存活14只，可见存活率有了大大地提高29。2.2.3干细胞的基础研究胚胎干细胞是认识人胚胎早期发育、解释遗传缺陷并预防和纠正遗传缺陷的关键环节。可以以干细胞作为模型，在体外再现从内细胞团分化至各个组织器官发育的过程，为研究人类早期发育的机制提供了平台。这将有助于阐明某些早期胚胎发育缺陷的相关机制， 帮助我们找到预防与治疗的方法， 有助于我们利用发现的关键基因和因子定向诱导干细胞向特定的功能细胞分化等， 这为发育生物学研究提供了良好的体外模型系统30,31。因此，胚胎干细胞提供了在细胞和分子水平上研究个体发育过程中极早期事件的良好材料和方法。随着分子生物学的发展， 通过比较胚胎干细胞不同发育阶段的干细胞和分化细胞的基因转录和表达， 可确定胚胎发育及细胞分化的分子机制、发现新基因。结合基因打靶技术， 可发现不同基因在生命活动中的功能等32。2.2.4干细胞与药物学的结合目前药物的筛选大多采用整体动物模型或细胞株作为进行药理、毒理的检测系统。动物模型具有物种间的差异，不能完全代表人体反应，而大多数人细胞株多为永生化的肿瘤细胞系，难以反映正常人类细胞的反应性。以干细胞体外分化作为正常人类发育的模型，可用于检测药物对发育的影响，或正常体细胞，可用于检测药物对不同细胞的毒理作用33。干细胞及其相关技术的发展有可能为现有的药物筛选体系带来革命性的进步。高效新型药物的发现、筛选及动物和人类疾病的模型胚胎干细胞提供了新药物的药理药效、毒理及药物代谢等研究的细胞水平的研究手段，利用胚胎干细胞体外分化的细胞组织检验筛选新药， 可大大减少药物实验所需实验动物的数量及其人群数量， 胚胎干细胞还可用来研究动物和人类疾病的发生机制和发展过程以便找到有效和持久的治疗方法34,35。德国 Axiogenesis生物技术开发了被命名为R.E.Tox 的干细胞研究技术。这种技术用的不是活体实验动物，而是由小鼠的胚胎干细胞培育出来的可以用来测试物质毒性的心脏细胞来测试某种物质是否对人类有毒性36。2.3干细胞应用新思路新进展近年来随着对肿瘤研究的不断进展。人们发现许多肿瘤的发生都与成体干细胞有着密切的关系，并提出了肿瘤干细胞（tumor stem cells，TSC）的概念37。实验证实肿瘤干细胞是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的源泉，并通过很多试验，在多种器官的肿瘤中已证实了肿瘤干细胞的存在38。目前对肿瘤干细胞的认识还处于初始阶段，精确定义肿瘤干细胞目前还有困难，但普遍认为具有以下几方面的特性可认定为肿瘤干细胞：在肿瘤组织中具有致瘤性的细胞；其表面标志与非致瘤性肿瘤细胞有显著差异，形成肿瘤的组成与原肿瘤成分相同或相似，并具有自我更新能力。肿瘤细胞异质性的现象只有用肿瘤干细胞的理论才能解释。肿瘤干细胞是肿瘤的根源，消灭了肿瘤干细胞就意味着消灭了肿瘤。根据肿瘤干细胞理论，当前肿瘤治疗应该针对肿瘤干细胞，只要杀死肿瘤干细胞，即使肿瘤体积没有缩小，但由于其他肿瘤细胞增殖能力有限，肿瘤终将逐渐退化、消失，人类就能够真正治愈肿瘤。干细胞的理论将治疗的重心转向肿瘤干细胞，在信息途径的研究中寻找新的诊治靶点是方向之一39,40。通过对干细胞生物学特性的研究，有可能在细胞水平上进一步认清肿瘤的发病机制，并最终找出治疗肿瘤的新方法，对于肿瘤的诊断、治疗及判断、预防将产生深远影响。3干细胞研究面临的问题3.1干细胞研究需要攻克的技术难关近年来，随着研究水平和手段的不断更新和发展，干细胞研究取得了突破性进展，某些方面已有初步的应用，但是许多理论问题亟待解决。 首先，针对目前研究的两个主要领域成体干细胞和胚胎干细胞是，有关两者谁更适合成为未来替代治疗的“种子细胞”一直存在着争论。人胚胎干细胞之所以倍受瞩目，在于它具有成体干细胞无可比拟的优势： 可在体外无限增殖并能分化为体内任何一种细胞类型。形象地说，胚胎干细胞将可能成为一个取之不尽、用之不竭的人类零部件加工厂，但胚胎干细胞真正应用于临床还有很多问题亟待解决。第一，胚胎干细胞不能直接用于移植， 其自然的分化具有多向性。当前面临的挑战是如何诱导胚胎干细胞定向分化为特异的细胞类型， 以及移植后如何促进移植物与机体其他细胞的功能整合。第二，胚胎干细胞分化产物的移植仍然属于同种异体移植，为避免移植后的免疫排斥， 可能的方法包括：“治疗性克隆”， 即将患者体细胞核移植入去核卵母细胞中构建重构胚， 再从中分离胚胎干细胞，获得的胚胎干细胞具有与受体细胞完全一致的基因型，从而避免了免疫排斥; 通过基因工程技术敲除引起免疫反应的关键基因（如 MHC 基因）；或将同一胚胎干细胞系诱导分化所获得的造血干细胞与待移植细胞一起移植，诱导患者免疫耐受，都是可能避免排斥发生的途径。这些技术依然不成熟还有待于更多的研究。 一方面，目前取得的进展都是在阐明干细胞的生物学特性，以及对干细胞的选择性分化和生长，然而如何对干细胞进行很好控制还没弄清楚。此外，干细胞分化的启动信号，比如化学刺激、基质或底物偶连刺激、物理因子的作用、机械刺激等，这些都还存在争议，必须进行阐明。 另一方面，将干细胞应用于临床 ，可能会带来许多问题。尽管应用干细胞治疗疾病具有很多的优点：无毒性或低毒性；不需要了解疾病发病的机制；应用自身的干细胞移植还可以避免产生排斥反应，有着非常广泛的应用前景。但是它也存在着许多的困难：（1）种子细胞的来源，ES细胞虽然已经建系，但是它的应用却受到社会伦理学的制约，横向分化的发现打破了干细胞只能来源于胚胎或受精卵细胞的限制，但目前仅有几种成体干细胞找到了存在的部位。（2）干细胞的分化机制尚未清楚，只有搞清楚干细胞的分化机制才能充分利用它的强可塑性，完美实现细胞替代。（3）体外培养的细胞组织能否适应体内的环境继续生长还未得到确切的证明，体外培养是一种优化的培养环境，它不受其他因素的干扰，而体内细胞组织的生长则受到神经、体液和周围环境的影响。（4）干细胞在体外培养的过程中易于分化难以保持其原始状态。（5）不能在实际应用中避免免疫排斥反应。此外，在干细胞的分离、提纯、鉴定、生物支架等方面尚存在着许多有待解决的难题。 最后，当对细胞有了大量需求时 ，那么干细胞将通过何种最佳方式进行增殖 ，需要什么样的新式生物反应技术 ，以及从适当的标准机体获得干细胞时需要什么样的过程质量控制，怎样对干细胞进行尽可能好的传代 ，以利用它们进行治疗。在大多数情况下 ，单独移植干细胞 ，是最好的策略。但有些情况 ，将细胞附着在某种结构上（比如 ，将细胞种植在一个支架上）会更好。这种支架可能是一种合成材料 ，也可能是一种天然生物材料。细胞在不同培养系统中的表现也不同，这还需做更深入的研究。3.2干细胞研究需要正视的伦理问题干细胞研究不断取得突破性进展的时候， 科学与伦理之争也将其推到了风口浪尖， 各国也纷纷建立法律限制其发展。这对于今后研究和应用无疑是一个巨大的阻碍。由于目前胚胎干细胞的获取主要还是来自早期发育的胚胎，而在这一阶段则涉及到许多对生命和“人”的界定伦理问题。为获取ES细胞杀死人胚，从人胚中获取胚胎干细胞是不道德的，因为人的生命没有得到珍重，人的胚胎也是获取生命的一种形式，无论目的如何高尚，破坏是不可想象的。理论上，用体细胞核转移的方法生成自体干细胞引起的争议会少一些。由于实验用的卵细胞是去核和未受精的，它无不同个体的遗传物质融合，未发生受精过程，所以用这种方法制造的干细胞在道德和伦理上更容易被人们接受47,48。但体细胞核转移产生的胚泡也有可能克隆出一个个体，即克隆人。如果不加限制地放任干细胞技术的发展，对人类未必是一件好事。我们有理由相信，随着干细胞研究的日益深入、成果的不断涌现，作为对自然科学研究具有一定指导意义的生命伦理学也会随着干细胞的研究而不断发展，并积极地促进干细胞研究领域的健康发展，在所涉及的伦理问题上找到一个大家公认的“平衡点”和需要大家共同遵守的准则。历史经验也告诉我们，许多重大的科学发现和进展往往对传统的道德观念， 包括伦理学产生剧烈的冲击。我们应当促使科学与道德协调发展， 坚持科学研究的宗旨， 为人类的生存、幸福和发展，坚持趋利避害，坚持公正的恒久道义。配套的相关国家政策法规的制定， 应当尽快完善干细胞研究的各项法规，使干细胞研究走上正规化、法律化的道路49。4我国应对干细胞研究局势的对策和建议首先，我国应继续加大干细胞、治疗性克隆及诱导性多能干细胞的研究力度。我国人口众多，尤其早期人口增长过快，使我国比发达国家更早进入到老龄化社会，而老年性疾病的防治措施与策略对我国建设和谐社会具有重要的影响。考虑我国的基本国情和发展趋势，我国迫切需要继续积极推进干细胞的研究工作，以期干细胞替代治疗能够早日应用于临床，重视治疗性克隆的研究。再有，加大资助干细胞库的建立幅度，建立规模化、正规化、干细胞库，重点建立临床级别的干细胞库。 加强开放以及和其他国家干细胞库的交流、合作，进行国际资源整合，使我国在该领域具有一定的国际影响力。加大对干细胞研究领域的科技投入，建立中央政府、地方政府和科研单位的多渠道良性投入体系， 加大优势研发队伍、基地、项目的结合，加强共享，提高资源使用效率， 加强科学研究与成果转化的结合50,51。同时，要加强项目的应变反应机制，跟踪重大科技项目国际研究最新进展，加强信息时效性，设立重大科技项目的应变反应机制，实施项目的动态管理，将管理和技术有机融合。建立和完善国家在干细胞治疗等方面的法律法规，建立干细胞、组织工程产品临床试验和临床应用的行业准入制度。5展望生命科学技术作为未来行业发展的主流，干细胞研究毫无疑问必将在未来主流中占据重要位置。我们相信，在我国政府的大力支持与宏观调控下，我国干细胞研究领域的发展会越来越好、越来越快，在积极参与国际竞争的同时，能够推动国内其他研究领域产业化的布局，最终建立从基础研究到临床应用的完整产业链，在我国建设和谐化社会的整体思想指导下发挥重要作用。6参考文献1 NIH. Stem Cells: Scientific Progress and Future Research Directions. (August 6, 2001) 2 NIH. NIH Publishes Final Guidelines for Stem Cell Research. ( August 23, 2000) . 3 NIH. National Institutes of Health ( NIH) Update on Existing Human Em bryonic Stem Cells. ( August 27, 2001) . 4 何志旭干细胞技术及其应用进展J中华肿瘤防治杂志，2006，13（8）：1-45 益波，苗永旺成体干细胞的研究现状与展望J中国畜牧兽医，2007，34（4）：79-816 干细胞研究进展J淮北煤炭师范学院学报，2006，27（4）：45487 胚胎干细胞研究进展J. 医学与哲学，2006，27（2）：11 - 128 胚胎干细胞的研究现状及运用前景 J 陕西医学杂志，2006，35（11）：1483 - 14849 殿奎干细胞与肿瘤发生的研究进展J天津医科大学学报，2006，12（4）：165-1610 胡敏，张文怡外消旋聚乳酸对血管内皮细胞活性的影响.北京口腔医学，2005，13（3）：153215511 李玉晶应用不同方法进行人牙髓细胞原代培养的比较.北京口腔医学，2005，13（3）：148215212 A-l Hajj M， Wicha MS， Benito-Hernandez A， et al. Prospective identification of tumorigenic breast cancer cells. Proc Natl Acad Sci USA, 2003, 100: 3983-3988.13 Kondo T， Stoguchi T. Persistence of a small subpopulation of cancer stem-like cells in the C6glioma cell line.Proc Natl Acad Sci USA, 2004, 101: 781-786.14 Singh SK， Clarke ID，Terasaki M， et al.Identification of a cancer stem cell in human brain tumors. Cancer Res. 2003, 63: 5821-5828.15 卢光锈，王绮如两种条件培养基促进鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞 J中南大学学报, 2007，32（1）： 64 -6716 刘兆轩，刘小春等体外定向诱导小鼠胚胎干细胞向内皮细胞分化的研究 J中国修复重建外科杂志, 2007，21（9）：994-99617 何晓顺，郑启昌等胚胎干细胞来源的肝细胞对急性肝功能衰竭小鼠的移植治疗作用 J中华医学杂志, 2006, 86 (46) : 3281-328418 丁义涛骨髓干细胞的可塑性及其转化为肝细胞的研究进展 J世界华人消化杂志，2005，13（24） ：2813-281719 王学浩，张峰等.HGF质粒体内表达诱导脐血干细胞向肝系细胞分化 J世界华人消化杂志，2006，14（8）：767-77120 韩春茂，赖平平等. 人骨髓间质干细胞向表皮细胞分化的研究 J中华烧伤杂志，2007，23（1）：66-6821 王顺和神经干细胞定向分化为少突胶质细胞的实验研究 J重庆医科大学学报，2007，32 （8）： 812-81622 黄丹平，黄冰，等.Hoechst 33342标记恒河猴皮肤干细胞向结膜上皮细胞分化J中山大学学报医学科学版, 2007, 28 (3) : 263 - 26723 Thomson JA，Itskovitz- Eldor J，Shapiro SS，et al.Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts. Science, 1998, 282(5391): 1145-114724 Pacacios R， Golunski E， Samaridis J. In vitro generation of hematopoetic stem cells from an embryonic stem cell line. roc Natl Sci USA， 1995， 92: 7530-7534.25 Weissman I L . Stem cells: units of development, units of regeneration, and units in evolution. Cell, 2000, 100(1):157- 168.26 Reynolds B A， Weiss R S. Generation of neurons and astrocytes form isolated cells of the adult mammalian ce Ntral ervous system. Science， 1992， 255:1707-1710.27 Krause DS， Theise ND， Collector MI，et al. Multi- organ， multi- lineage engraftment by a single bone marrow- derivedstem cell. Cell， 2001，105(3):369-377.28 杨跃进， 杨伟宪 ， 等经冠脉注射法移植成年犬自体骨骼肌成肌细胞治疗急性心肌梗死的疗效研究 J中国分子心脏病学杂志 ， 2005， 20 (4) : 392 - 394.29 秦仁义肿瘤干细胞的研究现况 J . 山东医药.2007，47（9）：167 16830 胡翔，刘德明黄芪诱导表皮干细胞增殖构建组织工程皮肤治疗皮肤缺损 J中药药理与临床，2004，20（5）：16 - 1731 孙辉生，刘振旗等复方接骨中药对骨髓间充质干细胞体外增殖及向成骨细胞分化的影响 J中国组织工程研究与临床康复，2007，11（10）：1818 - 182132 曾和平，王春燕等中药龟板提取物化学成分及其调控鼠骨髓间充质干细胞( rMSCs) 增殖活性的实验研究 J化学学报，2007，65 (3) : 265 - 27033 刘金保，董燕湘等中药诱导大鼠骨髓间质干细胞分化的实验 J中国临床康复， 2005，9（9）：21234 董晓先，何慧华等大鼠骨髓间质干细胞用中药绞股蓝诱导为神经细胞的研究 J. 中华神经科杂志，2003，36（5）：355 - 35735 王金福中药对造血干/祖细胞扩增和分化的影响 J中国中西医结合杂志，2004，24（7）：666 - 66736 黄绍良，周其峰等体外定向诱导小鼠胚胎干细胞发育为造血干/组细胞方法的初步研究J. 中国病理生理杂志，2003，19（4）：443-44737 Alison MR, Poulsom R, Jeffery R, et al. Hepatocytes from non- hepatic adult stem cells. Nature, 2000 Jul 20; 406:257.38 Vescovi AL, Rietze R, Magli MC, et al. Hematopoietic potential of neural stem cells. Nat Med, 2002 Jun; 8(6):535.39 谢安，汪泱胚胎干细胞研究进展J江西医学检验，2006，24（2）：158161