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山东省新人教版生物高三单元测试27选修1专题5dna和蛋白质技术(满分:100分 时间:90分钟)一、选择题(每小题2分,共50分)1. dna的粗提取与鉴定实验,与下列哪项原理无关a. dna在0.14mol/l的nacl溶液中,溶解度最低b. dna易被龙胆紫溶液染成紫色c. dna溶液中加入二苯胺试剂,加热后产生蓝色d. 加入95%的冷酒精,dna会从溶液中析出2. 在利用鸡血进行“dna的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是a.用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14 mol/l,滤去析出物b.调节nacl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质c.将丝状物溶解在2 mol/l nacl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色d.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同3. 向溶解dna的nacl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是a加快溶解dna的速度b加快溶解杂质的速度c减少dna的溶解度,加快dna析出d减少杂质的溶解度,加快杂质的析出4. 有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是:( ) a、它们都是分离蛋白质的重要方法 b、它们的原理相同 c、使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要 d、以上说法都正确5. 在进行pcr操作时,如果枪头受到污染,则会影响到 a. 复制循环速度b. dna分子纯度c. dna分子大小 d. 酶催化活性6. 下列关于pcr技术的叙述,正确的是( )a. pcr技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上b. 该技术需要解旋酶和热稳定的dna聚合酶c. 该技术需要一对特异性的引物,要求一对引物的序列是互补的d. 该技术应用体内dna双链复制原理,也需要模板、原料、能量、酶等条件7. 下列有关pcr技术的说法,错误的是:adna复制所需要的引物的作用是使dna聚合酶能从3端延伸dna链b引物与dna母链的关系是碱基互补配对c添加缓冲溶液的作用是维持ph基本不变ddna聚合酶可以用来合成引物8. 多聚酶链式反应(pcr)是一种体外迅速扩增dna片段的技术。pcr过程一般经历下述三十多次循环:95下使模板dna变性、解链55下复性(引物与dna模板链结合)72下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关pcr过程的叙述中不正确的是a变性过程中破坏的是dna分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现b复性过程中引物与dna模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成c延伸过程中需要dna聚合酶、atp、四种核糖核苷酸dpcr与细胞内dna复制相比所需要酶的最适温度较高9. 下列对pcr技术的叙述中不正确的a. 遵循的基本原理是dna双链复制 b. 聚合酶链反应在常温下就可以迅速进行,所以可用来短时间获得大量目的基因 c. 扩增仪内必须加入引物、原料和dna聚合酶 d. 成指数式扩增,约为2n,n为扩增次数10凝胶色谱法操作正确的是()a将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴b将橡皮塞下部切出凹穴c插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面d将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片11在实验室中,做pcr通常使用的微量离心管是一种薄壁塑料管,此过程可以使用玻璃离心管吗?为什么()a可以,玻璃离心管、塑料微量离心管都可以使用b不可以,玻璃离心管易碎,使用不安全c不可以,玻璃离心管一般较大,不适合作为微量离心管d不可以,玻璃离心管容易吸附dna12某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的肌肉,他想了解该巨型动物的dna与现今印度大象的dna的相似性,于是做了如下检测工作,其中正确的操作步骤及顺序是()降低温度,检测处理后的杂合dna双链通过pcr技术扩增巨型动物和大象的dna把巨型动物的dna导入大象的细胞中在一定温度条件下,将巨型动物和大象的dna水浴共热a bc d13下面说法不正确的是()a在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液ph的影响,维持ph基本不变b缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成c电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程d透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内14.下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作,其中正确的是()a可采集猪血作为实验材料b用蒸馏水重复洗涤红细胞c血红蛋白释放后应低速短时间离心d洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液15.对“dna的粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是()a利用dna能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将dna与蛋白质分离b利用高温能使蛋白质变性,却对dna没有影响的特性,可将dna与蛋白质分离c在溶有dna的2 mol/l氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,取滤液进行以后的实验d在dna滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将dna 与蛋白质分离16.下列对有关实验的叙述,不正确的是()a血红蛋白的提取和分离实验中使用的交联葡聚糖凝胶g75,其中“75”表示每克凝胶膨胀时吸水7.5克b在色素的提取和分离的实验中,叶绿素b在层析液中的溶解度最低,扩散速度最慢c用洋葱作实验材料进行dna的粗提取与鉴定实验时,加入一定的食盐的目的是有利于溶解dnad制取细胞膜、血红蛋白的提取和分离均以鸡血细胞作为实验材料17.有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,不正确的是()a可通过sds聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度b将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质c血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂d整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构18.聚合酶链式反应(pcr技术)是体外酶促合成特异dna片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的dna得以迅速扩增,其简要过程如下图所示。下列关于pcr技术叙述不正确的是()apcr技术是在实验室中以少量dna制备大量dna的技术b反应中新合成的dna又可以作为下一轮反应的模板cpcr技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增d应用pcr技术与探针杂交技术可以检测基因突变19.蛋白质的提取和分离分为哪几步()a样品处理、凝胶色谱操作、sds聚丙烯酰胺凝胶电泳b样品处理、凝胶色谱操作、纯化c样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定d样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定20.下列关于dna的粗提取实验和血红蛋白的提取实验,叙述正确的是()a前者选择鸡血细胞作为材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好b样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色c在dna粗提取实验中,往2 mol/l氯化钠溶液中加入蒸馏水析出dna时,应该缓慢加入,直到出现黏稠物即止d洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等21蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是()a根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不同的蛋白质分离b根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等,可通过电泳分离蛋白质c根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质d根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质22.以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是()a红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水,重复洗涤3次b将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的nacl溶液中透析12小时c凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在d蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢23.下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,正确的是()a用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面杂蛋白b将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质c血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂d整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构24.下列关于dna粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是()试剂操作作用a柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固b蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状c蒸馏水加入到溶解有dna的nacl溶液中析出蛋白质d冷却的酒精加入到过滤后含dna的nacl溶液中产生特定的颜色反应25.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。下列相关叙述正确的是()a血红蛋白在红细胞中的作用体现了蛋白质具有调节功能b甲装置中a是蒸馏水,乙装置中c溶液的作用是洗脱血红蛋白c甲装置的目的是去除样品中分子量较大的杂质d乙装置分离时,待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液二、简答题1. 在dna鉴定过程中,需大量的dna,而pcr技术可以使样品dna扩增,获得大量dna分子。下图表示这一过程(图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将dna扩增几百倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)a过程(交性)表示 ,细胞内实现该过程的方法是 。(2)某样品dna分子中共含3000个碱基对,碱基数量满足:,若经5次循环后,获得与样品相同的dna分子,至少需要向试管中加入 个腺嘌呤脱氧核苷酸(忽略引物所对应的片段)。(3)当温度降低(退火)时, 原则保证引物能与模板末端特异性结合。升温至72,在 酶的作用下,按53方向延伸子链。2.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带o2或co2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:_、_、_和_。(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_。在样品处理中包括红细胞的洗涤、_、分离血红蛋白溶液、透析。洗涤红细胞的目的是_,你如何知道红细胞已洗涤干净?_分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是_。若离心速度过高和时间过长结果会怎样?_。(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。透析的目的是_。透析的原理是_。(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经sds聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_。血红蛋白有什么特点?_。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?_。3.1970年,特明和巴尔的摩证实了rna病毒能以rna为模板合成dna,并发现了催化此过程的酶。图为形成cdna的过程和pcr扩增过程示意图。请据图回答:(1)催化过程的酶是_。(2)过程也称为dna的变性,此过程在温度高达9095时才能完成,说明dna分子具有_性。(3)由图中信息分析可知,催化过程的酶都是_,两者在作用特性上的区别是_。(4)江苏有一道凉菜白斩鸡,鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。其加工过程中添加了从木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉。”下列有关嫩肉粉的叙述中,正确的是()a“嫩肉粉”可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现“嫩肉”的b与高温蒸煮相比,“嫩肉粉”是通过降低反应活化能而实现“嫩肉”的c“嫩肉粉”应在蒸煮鸡肉时加入,才能实现“嫩肉”d“嫩肉粉”是一种化工产品,不利于人体健康,实际应用中能少则少、能无则无4血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中o2和部分co2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。(1)将实验流程补充完整:a为_,b为_。凝胶色谱法的基本原理是根据_而达到蛋白质分离的有效方法。(2)洗涤红细胞的目的是去除_,洗涤次数过少,无法除去_;离心速度过高和时间过长会使_一同沉淀。达不到分离的效果。洗涤干净的标志是_。释放血红蛋白的过程中起作用的是_。(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20m mol/l的磷酸缓冲液(ph为7.0)的目的是_。如果红色区带_,说明色谱柱制作成功。5下图为细胞内dna复制过程示意图,该过程在体外也可进行,以获得大量相同的dna片段,该项技术称之为pcr技术,又称多聚酶链式反应,请分析回答:(1)pcr过程与细胞内dna复制相比,主要有两点不同:_、_。(2)pcr技术过程的三个步骤:_、_、_。(3)假设pcr过程中,只用一条dna片段作为模板,请计算30次循环后,反应物中大约有多少个这样的dna片段?_。(4)pcr技术能在几小时内将极微量的dna片段特异性地扩增上百万倍,从而解决了样品中dna含量低,难以分离的难题。试举两例,说明pcr技术的应用。_。答案一、单选题1. b2. b3. c4. a5. b6. d7. d8. c 9. b 10.解析:选a。凝胶色谱柱制作时,首先选择合适封堵玻璃管口的橡皮塞,将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴;插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面;把尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片。11.解析:选d。本题考查多聚酶链式反应扩增dna片段的有关知识。dna亲和玻璃,在进行dna操作时应用塑料器皿。12.答案:d13.解析:选d。透析袋一般是用硝酸纤维素制成的。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。14.【解析】为防止细胞吸水涨破,洗涤时要用生理盐水;释放出血红蛋白后,以2 000 r/min 的高速离心;在分离时,要等到红色蛋白质接近色谱柱底端时开始收集流出液。【答案】a15.【解析】利用dna不溶于酒精溶液,蛋白质溶于酒精溶液的特点,可将dna与蛋白质分离;高温能使蛋白质、dna变性,蛋白质在6080可变性,而dna在80以上也会变性,所以高温对dna有影响;在溶有dna的2 mol/l氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,得到dna黏稠物,用dna黏稠物进行以后的实验;在dna滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的专一性作用,可将dna与蛋白质分离。【答案】d16.【解析】血红蛋白的提取和分离以鸡血细胞作为实验材料;制取细胞膜不能用鸡血细胞,鸡血细胞有核膜及其他细胞器膜。【答案】d17.【解析】可通过sds聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度。将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质。血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解细胞膜。整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构。【答案】c18.【解析】pcr技术是人工合成dna的方法,原料是脱氧核苷酸而不是核糖核苷酸。【答案】c19.【解析】蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。a中凝胶色谱操作及sds聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程的技术。【答案】c20.【解析】鸡血细胞有细胞核,适于提取dna;哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中,洗涤红细胞时,不能加清水,应该加入生理盐水,否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合,加大提取难度。dna初次析出时,加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白,以利于血红蛋白的分离和纯化。【答案】a21.【解析】蛋白质分子不能透过半透膜,而溶液中的小分子物质则可以透过半透膜,因此可以将蛋白质和溶液中的小分子物质分离。【答案】a22.【解析】红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的生理盐水,重复洗涤3次目的是除去杂蛋白。透析时使用物质的量浓度为20 mmol/l的磷酸缓冲液,而不是用0.9%的nacl溶液。蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的在凝胶外部移动,移动速度快。在装填凝胶柱时,不得有气泡存在,气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。【答案】c23.【解析】红细胞的洗涤用的是生理盐水,其目的是去除血浆蛋白等杂质,有利于后续步骤的分离纯化,而不是去除细胞表面杂蛋白;而本实验中蒸馏水的作用是涨破红细胞使血红蛋白释放。将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质。血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解细胞膜。整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构。【答案】d24.【解析】柠檬酸钠溶液有抗凝血的作用。第一次加入蒸馏水是为了让细胞吸水涨破。在浓nacl溶液(2 mol/l)中,dna核蛋白的溶解度很大,而rna核蛋白的溶解度很小,在稀nacl溶液(0.14 mol/l)中dna的溶解度最低,蛋白质的溶解度很高,而出现盐溶现象。用乙醇沉淀法可使其他物质溶于酒精而进一步纯化dna,但不会出现颜色反应。【答案】a25.【解析】血红蛋白在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能;甲装置中a应是磷酸缓冲液;甲装置的目的是去除样品中分子量较小杂质。【答案】d二、简答题1.
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