夏枯草中的黄酮类化合物研究.doc

夏枯草中的黄酮类化合物研究作者：王祝举 唐力英 付梅红 赫炎 方婧【摘要】 目的研究夏枯草的药效成分。方法利用硅胶柱色谱法等对夏枯草进行分离纯化，根据光谱数据分析和化学方法鉴定化合物的结构。结果分离鉴定了3个化合物，鉴定其分别为槲皮素-3-O-D-葡萄糖苷；橙皮苷，即5，7，3-三羟基-4-甲氧基二氢黄酮-7-O-L-吡喃鼠李糖基-(16)-D-吡喃葡萄糖苷；芦丁。结论化合物为首次从夏枯草中分离得到。 【关键词】 夏枯草 黄酮苷 化学成分Abstract:ObjectiveTo study the constituents in the flower of Prunella vulgaris L.MethodsThe herb was extracted and purified with the column chromatography on silica gel and Sephadex LH20,identified by the spectrum analysis and chemical method.Results3 compounds were isolated from the plant ,and their structures were elucidated as quercetin-3-O-D-glucoside,hesperidin and rutin.ConclusionCompound was isolated for the first time from Prunella vulgaris L.Key words:Prunella vulgaris L.； Flavonoids； Constituents夏枯草为唇形科植物夏枯草Prunella vulgaris L.的干燥花穗，是一味常用中药，始载于神农本草经，具有几千年的药用历史。传统医学认为具有清火、明目、散结、消肿之功效，用于目赤肿痛、头痛眩晕、瘰疬瘿瘤、乳腺肿痛等病症。现代研究表明，它具有降压、抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤及降糖等多种药理作用，临床上用于治疗肺结核、淋巴结核、胸膜炎、菌痢、高血压病及甲状腺肿瘤等疾病。为了进一步研究夏枯草的药效成分，更好地控制其质量标准，我们曾报道了其三萜、黄酮及缩酚酸等成分的提取分离及结构鉴定13，继前研究工作，我们从夏枯草中又分离得到3个黄酮苷类化合物，经波谱和理化性质分析，鉴定其分别为槲皮素-3-O-D-葡萄糖苷；橙皮苷；芦丁。其中化合物为首次从夏枯草中分离得到。1 仪器与材料X4型数字显微熔点测定仪（北京福凯科技发展有限公司），温度计未较正。UV-260型紫外分光光度仪（Shimadzu）。AL-300型核磁共振仪（300 Hz，日本JEOL公司）。 层析用硅胶为青岛海洋化工厂生产，Sephadex LH-20为Pharmacia公司产品；柱层析聚酰胺粉为浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂产品；所用溶剂及试剂均为分析纯。2 提取分离夏枯草粗粉10 kg用10倍量95%乙醇渗滤提取，渗滤液减压浓缩至无醇味，加入适量水混悬后，依次用石油醚、氯仿和正丁醇萃取，回收溶剂得到正丁醇萃取物70 g。取40 g进行硅胶柱层析（100200目），氯仿-甲醇梯度洗脱，收集220个流分，分为3个部分，其中部分(65110份)，先经Sephadex LH20柱层析，然后再经反相硅胶柱层析，甲醇-水梯度洗脱，得到化合物。部分(135185份)经Sephadex LH-20柱层后，用聚酰胺柱层析，得到化合物和。3 结构鉴定化合物：黄色粉末（MeOH），mp.189191。盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阳性，所以化合物可能为黄酮类化合物。1H-NMR（DMSO-d6）：6.19（1H，d.J=1.5 Hz,H6），6.39（1H，d,J=1.5 Hz,H8），为黄酮类化合物A环上的质子，为间位耦合，所以A环为间位取代。7.56(1H，br.s，H2)，6.83（1H，d,J=8.5 Hz，H5），7.66(1H,d,J=8.5 Hz,H6)，为黄酮类化合物B环上的质子，为ABX偶合系统，由此可知B环为3，4二取代形式；5.45(1H,d,J=7.0 Hz,H1)为糖的端基质子信号。13CNMR（DMSOd6）:156.3(C2)，133.3（C3），177.4(C4)，161.2(C5)，98.6（C6），164.2（C7),93.5(C8),156.1(C9),104.0(C10),121.2(C1),115.2(C2),144.8(C3),148.5(C4),116.2(C5),121.6(C6)；100.8(C1)，7.42(C2)，76.5(C3)，69.9(C4)，77.6(C5)，60.9(C6)。酸水解薄层检出D葡萄糖。将其13CNMR谱数据与槲皮素3OD葡萄糖苷4相比，数据吻合，所以确定化合物为槲皮素3OD葡萄糖苷（quercetin3ODglucopyranoside）。化合物：白色粉末（MeOH），mp.259263。盐酸-镁粉反应阳性。Molish反应阳性，其1H-NMR和13C-NMR谱特征显示为黄酮类化合物。UVMeOHmaxnm：284，326；加NaOMe：240，286，355；加AlCl3：305，383；加AlCl3+HCl：307，381；加NaOAc：284，327；加NaOAc+H3BO3：284，326。1HNMR中可见2.75（1H，br，d，J=14.4 Hz）信号，13CNMR中有197.0，78.4和42.0 3个二氢黄酮特征碳信号，显示化合物为二氢黄酮类化合物。H-NMR中还有4.98（1H，d,J=7.0 Hz),4.50(1H,br,s)两个糖端基氢信号，同时13C-NMR中有100.6和99.4两糖端基碳信号，说明化合物2为含有两个糖的二氢黄酮苷。由1H-NMR和13CNMR数据可推知两个糖分别为L鼠李糖和D葡萄糖，另外，1H-NMR谱中显示6.92（3H，m）信号，为B环上氢信号，6.11（2H，d,J=2.5Hz），为A环上氢信号，3.76（3H，s）甲氧基信号以及12.01（1H，s），9.09（1H，s）两个羟基信号。综合以上信息，化合物与橙皮苷的结构比较吻合。其13CNMR（DMSOd6）ppm：78.4(C2)，42.0(C3)，197.0(C4)，163.0(C5)，96.4(C6)，165.1(C7)，95.5(C8),162.5(C9),103.3(C10),130.9(C1)，114.1(C2)，146.4(C3)，147.4(C4),112.0(C5),117.9(C6),55.7(OCH3),99.4(C1),73.0(C2),76.2(C3),69.6(C4)，75.5(C5)，66.0(C6)，100.6(C6),70.2(C2),70.7(C3),72.0(C4),68.3(C5),17.8(C6)。将其1HNMR和13C-NMR波谱数据与文献报道的橙皮苷数据5比较，基本一致，所以化合物鉴定为橙皮苷，即5，7，3-三羟基-4-甲氧基二氢黄酮7OL吡喃鼠李糖基(16)D吡喃葡萄糖苷。 化合物：黄色粉末（MeOH）,mp.185188。盐酸-镁粉反应阳性，Molish反应阳性。由其1H-NMR和13C-NMR可知为黄酮苷类化合物。1HNMR(DMDOd6)ppm为：6.20（1H，d,J=1.5 Hz,H6），6.39(1H，d,J=1.5 Hz，H8)，7.53(1H,d,J=2.0 Hz,H2)，6.84(1H,d,J=8.0 Hz,H-5)，7.54(1H,dd,J=8.0，2.0 Hz,H6)，5.33(1H,d,J=8.0 Hz,H1)，4.38(1H,br.s,H1)，1.07(3H,d,J=6.0,CH3).13CNMR(DMSOd6)ppm为：156.5(C2)，133.3(C3)，177.4(C4)，161.3(C5)，98.7(C6)，164.1(C7)，93.7(C8)，156.7(C9),104.0（C10）,121.2(C1)，115.3(C2)，144.8(C3)，148.5(C4)，116.3(C5)，121.7(C6)，101.2(C1)，74.1(C2)，76.5(C3)，70.4(C4)，75.9(C5)，67.1(C6)，100.8(C1 )，70.0(C2 ),70.6(C3 )，71.9(C4 )，68.3（C5 )，17.8(C-6 )。与芦丁共薄层，Rf值及显色均一致，NMR数据与文献报道6的数据吻合，故确定化合物为芦丁。 【参考文献】 1王祝举，赵玉英，涂光忠，等.夏枯草化学成分的研究J.药学学报，1999，34（9）：679.2ZHU-JU Wang,YU YING Zhao,BIN Wang,et al.Depsides from Prunella vulgarisJ.Chinese Chemical Letter,2000,11(11):997.3Wang Zhuju,Zhao Yuying ,Wang Bin,et al.A New Phenylpropanoid from Prunell