【0712】6年高考生物真题按知识点分类汇编 5蛋白质的提取和分离.doc

蛋白质的提取和分离2012广东29 （16分）食品种类多，酸碱度范围广。生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋白酶，查阅相关文献，得知：（1）ph对不同蛋白酶的活力影响有差异。据图12可知，_更适宜作为食品添加剂，理由是_。蛋白酶的活力可用_的量来表示。（1） 该蛋白酶的提取工艺流程如下：兴趣小组分别对酶保护剂浓度、提取液ph进行了探究实验。结果显示，酶保护剂浓度在0.020.06mol/l范围内，酶活力较高；提取液ph在6.08.0范围内，酶活力较高。他们认为，要进一步提高粗酶制剂的酶活力，以达到最佳提取效果，还需对酶保护剂浓度和提取液ph进行优化，并确定以此为探究课题。请拟定该课题名称，设计实验结果记录表。【答案】（1）木瓜蛋白酶 由图可以看出，木瓜蛋白酶的活性不随ph的变化而变化单位时间内底物消耗（产物产生）（2）课题：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适ph单位时间内底物的消耗量提取液的ph6.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.0酶保护剂的浓度0.020.030.040.050.06【解析】（1）审题结合图形和文字，在题目中已经提供了信息“食品种类多，酸碱度范围广”，所以选择的食品添加剂应该有较广的酸碱适应范围。从图形中，可以看出木瓜蛋白酶的适应范围最广，所以可以选作食品添加剂。酶的活力，一般用酶催化的底物消耗量或者产物生成量来表示。（2）实验设计，应该明确实验目的：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适ph值，所以可以将酶保护剂的浓度和提取液的ph值作为自变量，因变量为单位时间内底物的消耗量。【试题点评】本题以蛋白酶在食品方面的应用为背景，考查了蛋白酶的应用、活力测定、蛋白酶的提取流程等内容和学生绘制表格的能力，难度不大。2012安徽31（24分）甲型血友病是由x染色体上的隐性基因导致的遗传病（h对h为显性）。图1中两个家系都有血友病发病史，iii2和iii3婚后生下一个性染色体组成是xxy的非血友病儿子（iv2），家系中的其他成员性染色体组成均正常。 图1（1）根据图1， （填“能”或“不能”）确定iv2两条x染色体的来源；iii4与正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是 。（2）两个家系的甲型血友病均由凝血因子viii（简称f8，即抗血友病球蛋白）基因碱基对缺失所致。为探明iv2的病因，对家系的第iii、iv代成员f8基因的特异片段进行了pcr扩增，其产物电泳结果如图2所示，结合图i，推断iii3的基因型是 。请用图解和必要的文字说明iv2非血友病xxy的形成原因。（2） 现iii3再次怀孕，产前诊断显示胎儿（iv3）细胞的染色体为46，xy；f8基因的pcr检测结果如图2所示。由此建议iii3 。 图2（4）补给f8可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分离纯化f8时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是 ；若f8比某些杂蛋白先收集到，说明f8的相对分子质量较这些杂蛋白 。（5）利用转基因猪乳腺生物反应器可生产f8。要使乳腺细胞合成f8，构建表达载体时，必须将f8基因cdna与猪乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起。f8基因cdna可通过克隆筛选获得，该cdna比染色体上的f8基因短，原因是该cdna没有 。（6）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入 ，构成重组胚胎进行繁殖。【答案】（1）不能 0（2）xhxh，遗传图解如下：说明： 2产生异常的xhy精子和3产生正常的卵细胞xh结合而成xhxhy在iii3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因h的姐妹染色单体移向细胞的同一极，形成xhxh卵细胞，xhxh卵细胞与正常精子结合形成xhxhy受精卵。（3）终止妊娠。（4）洗涤平衡凝胶，并使凝胶装填紧密 大（5）启动子 内含子（6）去核的卵母细胞【解析】（1）因为2的染色体组成可能是xhxh，也可能是xhxhy，所以不能确定，4的基因型为xhy，所以后代女性中没有患病个体。（2）由图可知第一条带是显性，第二条带是隐性，所以3基因型为xhxh，图解如下：在iii3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因h的姐妹染色单体移向细胞的同一极，形成xhxh卵细胞，xhxh卵细胞与正常精子结合形成xhxhy受精卵。（3）由题可知，iv3是血友病患者，所以建议iii3终止妊娠。（4）采用凝胶色谱法从血液中分离纯化f8时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是洗涤平衡凝胶，并使凝胶装填紧密；若f8比某些杂蛋白先收集到，说明f8的相对分子质量较这些杂蛋白较大。（5）要使乳腺细胞合成f8，构建表达载体时，必须将f8基因cdna与猪乳腺蛋白基因的启动子和终止子等调控组件重组在一起。f8基因cdna可通过克隆筛选获得，该cdna比染色体上的f8基因短，原因是该cdna没有内含子。（6）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入去核卵细胞，构成重组胚胎进行繁殖。【试题点评】本题考查了遗传规律，减数分裂，血红蛋白的提取，基因工程，胚胎工程；遗传规律是近几年的考查热点，但每年考查的都有区别，在解遗传题时，要记住一些常用解题方法，减数分裂的图示是高中生物的基本技能，会画，能理解，能够对遗传规律有个很高的认识，遗传实质都体现在其中。至于选修部分，基因工程、胚胎工程是近几年的考查热点，而血红蛋白的提取，是今年生物考试说明中有，意味着我们要认真阅读考试说明。总体来说，该题是本试卷中的难题，原因是，遗传本身对于学生来说就难，加之选修部分题目较偏僻，从该题可以看出，安徽高考对于选修的考查，与必修部分建立了联系，进行了学科内的综合，希望学生在备考的过程中多加注意。2011广东5.以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是（d）a洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂b猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少c血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测d在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较少的杂蛋白移动慢2011山东34.（8分）（生物生物技术实验）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。（3）培养基中的尿素可为乳酸菌a生长提供_。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度_。答案： （3）碳源和氮源 越慢09年广东38. （10分）生物技术实践（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：中的主要成分为 ；中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。答案：（2）小分子杂质， 凝胶色谱法：根据蛋白质之间的分子大小、吸附性质等差异进行纯化（或电泳法：根据蛋白质之间的电荷、分子大小等差异进行纯化）；2008山东34.(8分)【生物生物技术实践】科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法其原理是根据蛋白质分子的 、大小及形状不同，在电场中的 不同而实现分离。答案：(1)电荷(带电情况) 迁移速度 (2)碳源 氮源2008江苏18下列叙述中错误的是a改变nacl溶液的浓度只能使dna溶解而不能使其析出b在沸水浴中，dna遇二苯胺试剂会呈现蓝色c加盐和加酒都能抑制微生物的生长d密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染答案：a2007江苏38（8分）单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为bb、bb，镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。 (1)从图中可见，该基因突变是由于 引起的。巧合的是，这个位点的突变使得原来正常基因的限制酶切割位点丢失。正常基因该区域上有3个酶切位点，突变基因上只有2个酶切位点，经限制酶切割后，凝胶电泳分离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱，正常基因显示 条，突变基因显示 条。 (2)dna或rna分子探针要用 等标记。利用核酸分子杂交原理，根据图中突变基因的核苷酸序列(acgtgtt)，写出作为探针的核糖核苷酸序列 。(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿-lii-4中基因型bb的个体是 ，bb的个体是 ，bb的个体是 。【答案】（8分）(1)碱基对改变(或a变成t)2 1(2)放射性同位素(或荧光分子等)ugcacaa (3)一l和一4一3一207新课标广东卷41（现代生物科技专题，15分）香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（bbtv，单链环状dna病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。请根据上述材料，回答下列问题：（5）如何利用afp基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株?在运用转基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题?（列举两点）【答案】（15分）（5）将afp基因插入土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。生态安全问题包括