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微生物技术论文2000字 微生物技术是现代生物技术中的一种,是生物技术的重要组成部分下面小编给大家分享微生物技术论文2000字大家快来跟小编一起欣赏吧 论文摘要：目的验证氨金黄敏颗粒的微生物限度检查方法是否适用于该供试品的检查方法细菌计数采用低速离心培养基稀释法霉菌及酵母菌计数按常规检查法控制菌按常规检查法结果稀释剂对照组的菌回收率大于70%试验组的菌回收率大于70%;阴性对照组未检出阴性对照菌试验组检出阳性试验菌结论可以用该微生物限度检查法进行氨金黄敏颗粒的检查 主题词：氨金黄敏颗粒检验 中图分类号：R122.1+2 为了保证检验方法的科学性现对某公司生产的氨金黄敏颗粒的微生物限度检查方法进行方法学验证 一、材料与仪器 1、试验样品药品名称：氨金黄敏颗粒批号：090901、090902、090903 2、验证用仪器 电热恒温干燥箱、电冰箱、电热恒温培养箱、恒温水浴锅、离心机、蒸汽灭菌锅、集菌仪等 玻璃器皿锥形瓶、培养皿、量筒、试管、吸管等 3、验证用菌种金黄色葡萄球菌;大肠埃希菌;枯草芽孢杆菌;白色念珠菌;黑曲霉 4、验证用培养基及稀释剂营养琼脂培养基;玫瑰红钠琼脂培养基;胆盐乳糖培养基;营养肉汤培养基;改良马丁培养基;曙红亚甲蓝琼脂培养基 二、验证条件 无菌室环境洁净度为10000级局部洁净度为100级净化消毒30min以上供试品及灭菌的器具等经传递窗紫外杀菌灯照射30min置无菌室内试验人员手消毒后穿无菌服进入操作间 三、方法与结果 1、菌液制备接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜斜面培养物接种于营养肉汤培养基中于35培养1824小时分别取各菌种培养液1ml加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml中10倍依次稀释金黄色葡萄球菌稀释至105大肠埃希菌稀释至107枯草芽孢杆菌稀释至105约为50100cfu/ml备用 接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中于2328培养2348小时取培养液1ml加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml中10倍依次稀释至105约为50100cfu/ml备用 取黑曲霉的新鲜斜面培养物用0.9%无菌氯化钠溶液5ml将孢子洗下吸取此溶液1ml置一个无菌的比色管中加0.9%无菌氯化钠溶液适量与标准比浊管进行比浊取比浊后的菌悬液1ml加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml中10倍依次稀释至104约为50100cfu/ml备用 2、供试液制备取供试品10g加pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液至100ml用匀浆仪分散混匀作为110的供试液 3、细菌、霉菌及酵母菌计数验证试验 试验组细菌计数采用低速离心培养基稀释法取110供试液10ml500转/分离心5分钟取全部上清液用pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液补足至原量混匀再从中取1ml分别加入5个平皿中(每皿0.2ml)加入各阳性细菌试验菌1ml立即倾注相应的琼脂培养基置32恒温培养箱中培养48h测定细菌数霉菌及酵母菌计数采用常规法取110供试液1ml加入各霉菌及酵母菌试验菌1ml立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基置25恒温培养箱中培养72h测定霉菌及酵母菌数 菌液组取稀释好的各菌液1ml分别加入平皿中加入相应培养基置规定条件培养测定所加的试验菌数 供试品对照组按试验组方法测定供试品本底菌数 稀释剂对照组取稀释剂替代供试液方法同试验组 试验组菌回收率(%)=(试验组平均菌落数供试品对照组平均菌落数)/菌液组平均菌落数100% 稀释剂对照组菌回收率(%)=(稀释剂对照组平均菌落数/菌液组平均菌落数)100% 4、控制菌检查方法的验证 试验组取110的供试液10ml置无菌条件下离心(500转/分)5分钟取上清液置无菌试管中pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液补足至原量混匀加至胆盐乳糖培养基100ml中再加阳性对照菌大肠埃希菌菌液1ml摇匀置3537恒温培养箱中培养1824小时大肠埃希菌浓度同细菌、霉菌及酵母菌数验证 阴性对照组方法同试验组加入1ml阴性菌(即金黄色葡萄球菌浓度同细菌、霉菌及酵母菌数验证)置3537恒温培养箱中培养1824小时 3.5结果分析 3.5.1细菌、霉菌及酵母菌计数验证结论在三次试验中稀释剂对照组的菌回收率均大于70%试验组的菌回收率均大于70%故可照供试液制备方法和计数法测定氨金黄敏颗粒的细菌、霉菌及酵母菌数 3.5.2控制菌验证结论在三次试验中阴性对照组未检出阴性对照菌试验组检出阳性试验菌故可用此供试液制备法和控制菌检查法进行氨金黄敏颗粒的控制菌检查 四、讨论 1、许多药品本身的特性(如抑菌性)会对检验结果