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文档简介
分子生物学基础练习题1、 填空题1沃森(Wason)和克里克(Crick)1953年对威尔金斯(Maurice Wilkins)DNA的X-射线衍射图分析,发现了( DNA双螺旋结构 ),阐明了( DNA半保留复制模式 ),鉴定了现代分子生物学研究的基础。1953年4月25日,他们联名在自然杂志上发表的题为( DNA分子结构 )的论文,1962年诺贝尔医学和生理学奖。2.2012年诺贝尔生理学或医学奖授予英国科学家( 约翰格登 )和日本医学教授( 山中伸弥 ),以表彰他们在( 体细胞重编程技术 )领域做出的革命性贡献。3.美国细菌学家艾弗里在1944年通过( 灭活S菌的分离提取 )试验证明了转化因子是( DNA ),而不是( 蛋白质 )。4.1952年赫尔希等进行的( 噬菌体 )感染试验,进一步阐明了( DNA )是遗传信息的携带者。5.PALevene等弄清了核酸的基本化学结构,证实核酸是由许多核苷酸组成的大分子,核苷酸是由碱基、核糖和磷酸构成,并认为4种碱基在核酸中的量相等,从而错误地推导出核酸的基本结构是由4个含不同碱基的核苷酸连接成四核苷酸,以此为基础聚合成核酸,这就是较著名的( 四核苷酸 )假说。6. DNA是由4种脱氧核糖核苷酸通过( 3,5 磷酸二酯键 )连接起来的直线或环形的多聚体。7.真核生物染色体由DNA和蛋白质构成,其基本单位是( 核小体 )。8. 天然DNA的存在形式因生物种类不同存在差异,染色体DNA为( 双键线 )状,高等生物的线粒体、叶绿体DNA为(双链环 )状,细菌质粒DNA为( 双链环 )状,病毒如X174和M13的DNA为( 单 )链DNA9.原核基因的编码区是(连续 )的,( 全部都可以 )转录出mRNA,编码出蛋白质。而真核基因的编码区是( 不连续 )的,又分为( 内含子 )和( 外显子 ) ,(外显子 )能够转录出mRNA,编码出蛋白质,而( 内含子 )在mRNA后加工过程中被剪掉,不可以编码蛋白质。10.DNA聚合酶I由一条肽链组成,含三种酶活性,即( 5 3聚合酶活性 )、(35 外切酶活性 )和( 5 3外切酶活性 )。蛋白水解酶subtilisin酶解后得到的大片段部分为Klenow fragment,拥有两个酶活性,去掉了( 5 3外切酶 )活性。11. DNA复制时,往往先由引物合成酶在DNA模板上合成一段( RNA引物 ) 。12. DNA链的延伸,由( DNA pol )所催化。当冈崎片段形成后,(DNA pol )通过其( 5 3外切 )酶活性切除冈崎片段上的( RNA引物 ),并利用后一个冈崎片段作为引由53合成DNA填补缺口。最后由(DNA连接酶 )将冈崎片段连接起来,形成完整的DNA滞后链。13.DNA的复制发生在细胞的( s )期。14.原核生物与真核生物DNA复制模式有较大的区别,原核生物为( 单)起点、( 单 )方向与( 单 )起点、( 双 )方向;而真核生物为( 多 )起点、(双 )方向与( 多 )起点、( 单 )方向,15.DNA复制的方向是( 5 3 ),RNA转录的方向是( 5 3 ),蛋白质的生物合成方向是( N端C端 )。16.一个基因的有义链是( 编码 )链,其序列与mRNA( 一致 )。17.大肠杆菌的RNA聚合酶由( 核心酶 )和( )因子组成,参与转录起始的是( 因子 ),而参与延伸的是( 核心酶 )。18.使用( -鹅膏蕈碱 )可以将三种真核细胞RNA聚合酶区分开,其中(RNA pol )对它的作用最为敏感。RNA聚合酶控制( -鹅膏蕈碱 )基因转录,聚合酶控制( 编码蛋白质 )基因转录,聚合酶控制( tRNA、5SrRNA和一些稳定小分子 )基因转录。19.真核细胞的RNA聚合酶最大亚基的CTD都含有高度保守的( )肽重复序列,这段重复序列富含( 丝氨酸、苏氨酸 )氨基酸残基,它的功能是( 磷酸化 )和( RNA链的延伸 )。20.一个基因的+1位置的核苷酸代表的是(转录起始位点 ),它一般是( A )。21.原核细胞启动子的-10序列称为(TATA区 ),其一致序列为( TATAAT )。22.真核细胞内基础转录因子的功能是( 帮助RNA聚合酶与启动子的结合 )和( 促进转录开始 )。23.存在于核mRNA的加尾信号是( AAUAAA )。24.细菌基因转录的终止有两种机制,一种是( 弱终止子 ),另一种是( 强终止子 )。25.在真核3UTR含有AUUUA序列的mRNA比没有这种序列的mRNA的稳定性要( 大 )。26. 实验室常用( 放线菌素D )研究核酸的生物合成。27.(溴化乙啶 )常用于检测DNA、RNA,与DNA结合后( 抑制复制和转录 ),是强致癌物,使用时要注意安全。29.带鱼银色粉末状的细鳞含有大量的蛋白质、无机盐和油脂,经酸处理后可制取盐酸鸟嘌呤,而盐酸鸟嘌呤是合成抗癌药品( 六硫鸟嘌呤 )的主要原料。30.核糖体上与tRNA结合的部位有( A 位 ) 、( P位 )和( E 位 ),其中与空载的tRNA结合的部位是( E位 ),与起始tRNA结合的部位是( P位 )。31.翻译起始密码子通常是(AUG ),也可以是(GUG、UUG ),它们都编码( 甲硫氨酸 )。终止密码子有( UAA )、( UGA )和( UAG )。32.原核生物和真核生物在翻译时第一个被掺入的氨基酸分别是( 甲酰甲硫氨酸 )和( 甲硫氨酸 )。33.SD序列是指原核细胞mRNA分子上位于ORF的5富含( 嘌呤 )碱基的序列,其功能是( 核糖体结合位点 ),与SD结合的序列位于( 原核16s )rRNA的3端。34.原核生物在蛋白质生物合成时,参与起始阶段的起始因子有( 3 )种,其中与起始tRNA结合的是( IF-2 );参与延伸阶段的延伸因子有( 3 )种,其中与氨酰tRNA结合的是( EF-Tu ) ;终止释放因子有(RF-1、 RF-2、 RF-3 ),其中能够水解GTP的是( RF-3 )。而真核生物翻译起始因子有( 12种 ),延伸因子有( 3种 eEF-1、 eEF-2、 eEF-3)。35.某tRNA的反密码子GGC,它识别的密码子是( GCU )和( GCC )。二、是非题(判断并改正)1.遗传物质是DNA ,而不是其它生物分子。2.生物单倍体基因组中DNA总量称为C值。高等生物的C值一定大于低等生物。3.内含子是垃圾DNA。4.基因组是指某一生物全部基因的总称。5.富含CG的DNA双螺旋比富含AT的双螺旋稳定的原因是GC碱基对比AT碱基对多一个氢键。6.冈崎片段只有DNA组成。5.细胞内DNA复制即需要DNA聚合酶,又需要RNA聚合酶。7.DNA的前导链与后随链的复制完全一样。8.除T被U替换外,.mRNA的序列与编码链的序列完全相同。9.原核生物的Pribnow盒与转录起始位点的距离为5-9bp。10.TF同时具有激酶和解链酶的活性。11.RNA病毒因为无基因组DNA,所以遗传信息的流向省去了DNA到RNA的过程。12.AAUAAA是真核细胞mRNA的主要加尾信号,该序列在加尾完成后被切除。13.研究表明真核生物mRNA的外显子突变频率低于内含子,其主要原因是内含子的长度大于外显子。14.既然内含子大都是遗传“垃圾”,所以在RNA剪接的时候不必进行精确的切除。15.原核生物基因的启动子总是位于基因的上游,真核生物则不一定。16.根据摆动法则,tRNA上的反密码子在第三个位置上的核苷酸处于摆动的位置。17.密码子的第一位碱基发生突变要比第三位突变危害大得多。18.催化大肠杆菌起始甲硫氨酰-tRNA合成酶识别的是甲酰甲硫氨酸。19.多数tRNA能读不止一个密码子。20.一个细胞内tRNA的种类大于氨酰-tRNA合成酶的种类。三、单项选择1.根据Chargaff规则,一个典型的双螺旋DNA(E)。A. A=G B.A=C C.A=U D.A+T=C+G E. A+G=T+C2.双螺旋DNA具有的典型特征是(C)。A.沿着一条链是大沟,另一条链是小沟。 B.碱基对的排列与螺旋轴平行C.嘌呤碱基数与嘧啶碱基数相同 D. 螺旋的方向总是右手 E. 两条链的极性相同。3.所有DNA聚合酶的共同特性是(无35 聚合酶活性)。A.无核酸聚合酶活性。 B.无外切核酸酶活性。C.无外切核酸酶活性。 D.既有外切核酸酶活性,又有外切核酸酶活性。E.既无外切核酸酶活性,又无外切核酸酶活性。4.细胞内DNA复制时,DNA聚合酶的(5 3外切)酶活性能够切除RNA引物,保证复制的忠实性。5.RNA聚合酶与DNA聚合酶的具有的相同功能是(A)。A.以单链DNA链为模板催化相邻的碱基形成35磷酸二酯键。B.都需要引物 C.都有校对功能 D.都有外切核酸酶的活性 E.都有修复能力6.原核生物DNA的复制起始点及强终止子都有一段回文序列,二者碱基组成特点是(A)。A.复制起始点富含AT,强终止子富含CG. B.复制起始点富含CG,强终止子富含ATC.二者均富含AT D.二者均富含CG E. ATCG随机分布7.具有校对活性的转录因子是EA.TFA B. TFB C.TFD C.TFH E. TFS8.在正常的生长条件下,某一细菌基因的启动子的Pribnow盒由TCGACT突变为TATACT,由此引起该基因转录水平发生变化,以下几项描述正确的是(A)A.转录增加。 B.转录降低。 C.不能转录。 D.转录没有变化。 E.转录起始位置发生变化。9.RNA聚合酶的CTD富含(D)。A.碱性氨基酸。 B.酸性氨基酸。 C.疏水氨基酸。 D.羟基氨基酸。E.Gly。10.如果你想设计一种抗菌药物,其作用对象是原核细胞的RNA聚合酶,那么,你所设计的药物作用的最佳靶点应该是(E)。A.亚基 B. 亚基 C. 亚基 D. 亚基 E. 亚基5AGTCTAGGTTACGTATGC3C11.下图显示的是一个正在复制的DNA,由DNA聚合酶催化,下面一条链上的C是新生链上最后掺入的核苷酸,那么下一个掺入的核苷酸将是(B)。A.A B.T C.GD.C E.U12.RNA聚合酶(缩写为Pol)所需的各种基础转录因子以及RNA聚合酶本身与启动子结合的正确顺序是(E)A. TFA,TFC,TFB,Pol B. Pol,TFD,TFB,TFHC. TFB, Pol,TFH,TFD D. TFD ,TFH,TFB, PolE. TFD ,TFB,Pol,TFH13.如图所示,将二聚的胞苷酸序列(CC)插入到-珠蛋白的第二个内含子之中,这对-珠蛋白合成的影响是(E)CTATCAAGGTTACA(正常)CTATCAAGCCGTTACA(正常)外显子内含子插入序列:CCA.错义突变 B.无义突变 C.移码突变 D.加长突变 E.氨基酸序列无变化14.以下序列不出现在成熟的mRNA序列中的是(C)。A.加尾信号 B.多聚腺苷酸 C.5非翻译序列 D.TATA框 E.外显子15.不属于真核细胞第2类核心启动子的序列是(B)。A.TATA框 B.CAAT框 C.起始子(Inr) D.下游启动子元件(DPE)E. TFB识别元件(BRE)16.细菌启动子-10和-35区理想的距离是(A)A.17bp B.17nt C.距离不重要 D.19nt E.19bp17.利福霉素是一种非常有效的抗生素,其抗菌作用机理是作为RNA聚合酶的抑制剂。然而,某些菌株似乎对它的作用产生了抗性。经研究发现这些细菌体内的RNA聚合酶发生了突变。你认为细菌对利福霉素产生抗性的突变最有可能发生在聚合酶的(B)。A.亚基 B. 亚基 C. 亚基 D. 亚基 E. 因子18.真核细胞内在功能上相当于原核细胞RNA聚合酶的因子的转录因子是(A)。A. TFD B.TFB C. TFH D. TFE E. TFS19.DNA复制过程合成的RNA引物与细胞的其他RNA的差别是(C)。A. T代替U B.由DNA聚合酶催化 C. 只能以DNA-RNA杂交双链形式存在D. 刚合成时5为三磷酸基团 E. 合成的方向是3到520.与RNA聚合酶结合,随后将酶携带到启动子上去的转录因子是(B)。A. TFA B. TFB C. TFD D. TFE E. TFF21.不属于真核细胞第二类核心启动子的序列是(B)A. TATA框 B.CAAT框 C.下游启动子元件(DPE) D. 起始子(Inr)E. TFB识别元件22.一个基因模板链的序列与(B)链序列相同。A.编码链 B.无义链 C.前导链 D.滞后链 E.有义链23.mRNA的序列与(B)链序列互补。A.编码链 B.无义链 C.前导链 D.滞后链 E.有义链24.抑制真核、不抑制原核细胞蛋白质合成的抑制剂是(放线菌酮)。A.氯霉素 B.红霉素 C.嘌呤霉素 D.白喉毒素 E. 放线菌酮25.一种新发现的抗生素能够抑制细菌的蛋白质合成。如果将这种抗生素加到以AUGUUUUUUUAG为模板的体外翻译系统中,结果只形成一种二肽产物fMet-Pho。根据以上信息,你认为该抗生素抑制(D)。A.翻译的起始 B.氨酰-tRNA进入A位 C.肽键的形成D.核糖体移位 E.翻译的终止26.大肠杆菌16SrRNA的3序列是5-CACCUCCUUA-OH-3,那么mRNA上的SD序列是(D)。A. UCCU B.UCCUCC C. GGAAU D.AGGAGG E.GGAGGA27.在翻译的延伸阶段,核糖体每次移位的距离是(D)nt。A.0 B.1 C.2 D.3 E.428.一种抑制剂能够与核糖体的E位结合,如果将这种抑制剂加到无细胞翻译系统中,那么导致(D)。A.翻译不能起始 B.氨酰-tRNA不能进入A位 C.肽键不能形成D.只能合成二肽 E.翻译不受影响29.与密码子GUA对应的反密码子是(UAC IAC)A. UAC B.CIG C.IUC D.CUI E. IAC30.如果一种原核翻译系统中的ET-Ts发生了突变,它总是以与GTP结合的形式存在,那么,对翻译的影响是(D)。A.翻译起始受到抑制 B.氨酰-tRNA不能进入A位C.错误的氨酰-tRNA不能进入A位的几率增加D.ET-Ts在催化氨酰-tRNA不能进入A位以后,无法离开核糖体E.ET-Ts与核糖体结合不受影响。31.对氨基酰-tRNA合成酶描述不正确的是(D)。A.对氨基酸和tRNA都有高度特异性 B.具有校正活性C.每种酶分子既能识别氨基酸,又能识别与此氨基酸相对应的一个或多个tRNA分子。D.每种酶分子既能识别氨基酸,又能识别一个或多个tRNA分子。E.每个酶分子都有一个识别氨基酸结构域和一个识别tRNA的结构域。32.对真核生物翻译起始描述不正确的是(E)。A.核糖体是80S; B.起始因子种类多 C.起始tRNA的Met不需甲酰化D.mRNA的5帽子和3poly A尾结构与mRNA在核糖体就位有关E. mRNA在核糖体上定位,然后起始tRNA核糖体小亚基结合33.克隆的基因在异源生物体中表达时,经常出现表达产量降低的现象,这是因为密码子具有(B)。A.摆动性 B.偏倚性 C.通用性 D.简并性 E.连续性34.tRNA上反密码子上的第一位上的碱基G,可以与mRNA上的第三位上碱基进行配对是(B)。A. A,G B. U,C C. U,C,A D. C E. C,A四、解释专业术语复制叉:复制时DNA分子中的“Y”形区域,是由解开的两条链和尚未松解开的双螺旋形成的。冈崎片段: DNA复制不连续合成链中形成的短DNA片段。DNA的半保留复制:复制过程中各以双螺旋DNA的其中一条链为模板合成其互补链,新生的互补链与母链构成子代DNA分子 。引物:寡核苷酸片段,提供3-OH末端,使 dNTP聚合。 端粒也称端区,是真核生物线性染色体的天然两末端,呈膨大粒状,由染色体末端DNA重复片断(富含G、C)与蛋白质组成(端粒结合蛋白和端粒相关蛋白)。 端粒酶:是由端粒酶RNA 组分和蛋白质组分共同构成的核糖核蛋白复合物,这个酶复合物中的RNA是模板,其上含有引物特异识别位点,而蛋白质成分则具有催化活性。 转录:生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。转录的不对称性 :在RNA的合成中,DNA的二条链中仅有一条链可 作为转录的模板,称为转录的不对称性。编码链:与mRNA序列相同的那条DNA链,也称有义链或正义链。模板链:将另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链。也称无义链或反义链。RNA聚合酶:以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5-三磷酸合成RNA的酶。全酶 :全酶=核心酶+ 因子因子:原核生物RNA聚合酶的一个亚基,是转录起始必须因子,影响RNA聚合酶对转录起始位点的正确选择。启动子:指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 终止子:提供转录终止信号的序列。终止子的同源性很差,许多终止子转录的RNA可形成发卡结构。Goldberg-hogness盒:也称TATA盒 多数真核基因转录起始位点上游-25-32bp处的一段富含AT的同源区域,其顺序TATA(A/T)A(A/T)A(A/T), 各碱基出现的频率为:5-T85A97T93A85A63A83A50-3。转录因子(transcription factor, TF):是一群能与基因5端上特定序列专一性结合,从而保证目的基因以特定的强度在特定的时间与空间表达的蛋白质分子。 起始子:转录起始位点周围,类型启动子具有的基因最适表达所需的保守序列。特异性转录因子 :这些TF是在特异的组织细胞或是受到一些类固醇激素、生长因子或其它刺激后,开始表达某些特异蛋白质分子时,才需要的一类转录因子。GU-AG法则(Chambon法则): 内含子总是由GU开始,以AG结束,其规律称为GU-AG法则 TFD : (TBP + TAFIIs) TBP (TATA binding protein) TAFIIs (TBP-associated factors)TBP:转录因子TFD上结合启动子的T ATA的亚基 snRNA :核内小分子RNA SnRNA一般300碱基,包括U1-U6等;可变剪接:mRNA前体通过不同方式的剪接,可由一个基因的转录产物产生出不同的成熟mRNA,从而翻译出不同的蛋白质的过程. 核酶 :是具有催化功能的RNA分子,核酶又称核酸类酶、酶RNA、 核酶类酶RNA。 RNA编辑:指mRNA在转录后因插入、缺失或核苷酸的替换,改变了DNA模板来源的遗传信息,从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质。转酯反应 :剪接过程中的反应为转酯(transesterification)反应,即酯键由一个位置转移到另一个位置。 翻译 :蛋白质的生物合成过程就是将mRNA分子中由碱基序列组成的遗传信息,通过遗传密码破译的方式转变成为蛋白质中的氨基酸排列顺序,因而称为翻译 遗传密码:mRNA分子上从5至3方向,由AUG开始,每3个核苷酸为一组,决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号,称为三联体密码 密码子的摆动性:tRNA上反密码子的第1位碱基与mRNA密码子的第3位碱基配对时,可以在一定范围内变动,即并不严格遵循碱基配对规律,这一现象称为摆动性。密码子偏好性: 在几个同义密码子中往往只有一个或两个被频繁使用。 氨基酸活化 SD序列: 起始AUG一般位于距5端25个核苷酸以后,并在其上游(5端)约10个核苷酸处有一段富含嘌呤的序列 多聚核糖体 tRNA个性: 同一氨基酸的同工tRNA含有一些相同的元件,这些相同的元件保证它们可以被同一的aaRS (氨酰tRNA合成酶,aminoacyl-tRNA synthetase,aaRS)识别。 进位:指根据mRNA下一组遗传密码指导,使相应氨基酰-tRNA进入核糖体A位。 成肽:是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。 转位:延长因子EF-G有转位酶(translocase )活性,可结合并水解1分子GTP,促进核糖体向mRNA的3侧移动。 起始因子:是指翻译起始阶段端结合到核糖体小亚基上的一些蛋白质,如 IF-1、 IF-2、 IF-3 延长因子:是在mRNA翻译时促进多肽链延伸的蛋白质因子。 EF-Tu、 EF-Ts、 EF-G等。 终止因子 :识别终止密码子引起完整的肽链和核糖体从mRNA上释放的蛋白质。如RF -1、 RF -2 、 RF -3 核糖体循环因子:促进核糖体循环的蛋白质(在合成时:大小亚基结合,不合成:大小亚基分开)五、简答题1.简述DNA双螺旋结构要点(1).两条链反向平行,围绕同一中心轴构成右手螺旋,直径2nm,表面有大沟和小沟(2).磷酸-脱氧核糖位于外侧,碱基垂直于螺旋而深入内侧,每圈螺旋含10个碱基对,螺距3.4nm.(3).两条链间的碱基通过氢键直接相连,A与T间2个,C与G间3个。(4).维持双螺旋稳定的因素,横向为氢键,纵向为碱基堆积力。2.什么是DNA复制的半不连续性?DNA聚合酶只能以53方向合成DNA,因此复制时,其中一条链的合成是连续合成,另一条链的互补链是不连续的,这种复制方式称为DNA复制的半不连续性。3. 简要说明DNA复制的物质体系及作用。底物: dNTP(dATP dGTP dCTP dTTP)。聚合酶(polymerase): DNA-pol,依赖DNA的DNA聚合酶(DDDP)。催化dNTP聚合到核酸链上,使DNA链延伸,是DNA复制的主要酶。模板(template): 解开成单链的DNA母链。引物(primer):寡核苷酸片段,提供3-OH末端,使dNTP聚合。其它酶和蛋白质因子: 解旋酶,解链酶:解开DNA双链,单链结合蛋白:维持已解开单链DNA的稳定,连接酶:催化双链DNA中单链缺口的连接等。4.端粒及端粒酶与衰老的关系 目前认为,细胞的衰老是由于端粒的丢失引起的,而端粒的丢失又与端粒酶的活性有关。人类细胞内端粒酶活性的缺失导致了端粒缩短,每次丢失50200个碱基,这种缩短使得端粒最终不能被细胞识别。端粒一旦短于“关键长度”,就很有可能导致染色体双链的断裂,并激活细胞自身的检验系统,从而使细胞进入 M1 期死亡状态。当几千个碱基的端粒DNA丢失后,细胞就会停止分裂而进入衰老状态。 5. 端粒及端粒酶癌症的关系 如果细胞被病毒感染,或者某些抑癌基因如p53等的突变,细胞可越过M1期而继续分裂,端粒继续缩短,最终达到一个关键阈值,细胞进入第二致死期M2,这时染色体可能出现形态异常,大多数细胞由于端粒太短而失去功能,从而导致细胞死亡。但极少数细胞能在此阶段进一步激活端粒酶,使端粒功能得以恢复,并维持染色体的稳定性,从而避免死亡,导致细胞永生化甚至癌变。 6. 生物细胞可通过哪些途径修复DNA复制错误或损伤?光复活修复机制切除修复错配修复复制后的修复重组修复SOS修复7. 简要说明真核生物成熟m RNA的帽子结构成熟真核生物的m RNA并没有游离的5端,而是一种被称为帽子的结构。它由甲基化鸟苷酸经焦磷酸与m RNA的5末端核苷酸相连,形成5,5-三磷酸连接。不同真核生物的m RNA可有不同的帽子结构,同一种真核生物的m RNA也常有不同的帽子结构。真核生物的帽子结构可归纳为三种:m7GpppX为帽子0;m7GpppXm为帽子1;m7GpppXmYm为帽子2 (“m ”为 methyl的缩写)。 8. 简要说明真核生物成熟m RNA帽子的生物学功能。1.为核糖体识别RNA提供信号2.增加m RNA的稳定性3.为m RNA向胞质的运输提供信号4 与某些RNA病毒的正链RNA的合成有关。9. 简要说明真核生物成熟m RNA 的poly(A)尾的生物学功能。 提高m RNA在细胞质中的稳定性。 协助m RNA从细胞核向细胞质转运。作为核糖体的识别信号,使m RNA分子有效翻译。 对基因的表达调控有重要作用。10. 码子摆动性的生物学意义。当第三位碱基发生突变时,仍能翻译出正确的氨基酸来,从而使合成的多肽仍具有生物学活性,减少有害突变。11、氨基酰-tRNA合成酶对氨基酸的选择的“双选”机制。(1)在酶的活性中心优先结合正确的同源氨基酸,体积比同源氨基酸大被完全排除在活性中心外;(2)通过酶的校对中心选择性编辑错误的非同源氨酸,能进入活性中心的小氨基酸形成错误的氨酰-AMP或氨酰-tRNA以后,被送入校对中心,误载被水解,离开酶分子。这两种机制结合起来被称为“双选”机制(double sieve mechanism)12. 密码子的偏倚性已经成为克隆的基因在异源生物体中有效表达的重大障碍,请简要说明理由。因为同一种氨基酸的不同密码子使用频率在不同生物不一样,所以有偏移性,因为不同密码子在不同生物的喜好性不同,没有相应酶。六、论述题与分析应用题1.DNA复制忠实性的机制。(1)、一个细胞周期内只复制一次(2)、35 外切核酸酶把错误碱基切除,换成正确的(3)、5 3外切核酸酶切除RNA引物,把U切掉换成T(4)、从特定起点开始,特定位点终止四种dNTP水平的平衡 DNA聚合酶的高度选择性 DNA聚合酶和自我校对机制 错配修复 2.原核与真核结构基因的主要区别。原核生物的编码区是连续的,全部都可以转录出m RNA,编码出蛋白质。而真核基因的编码区是不连续的,又分为外显子和内含子,外显子能够转录出m RNA,编码出蛋白质,而内含子在m RNA后加工过程中被剪掉,不可以编码蛋白质。3. 大肠杆菌的DNA聚合酶具有三种不同的酶活性,这些酶活性对DNA复制的忠实性是不是都有贡献?为什么?有,因为三种酶活性,复制时负责的功能不同35 外切核酸酶,有校对功能,切除错配碱基5 3外切核酸酶切除RNA引物,把U切掉换成T4. 论述DNA复制的忠实性。(1)都有5 3聚合酶的功能 (2)没有直接合成DNA的能力,只有在引物存在时进行链延伸 (3)都有核酶外切酶活性,对合成中发生的错误校正。5.细菌启动子-10区的一致序列是TATAAT。如果有两个基因即基因A、基因B,它们在-35区的序列完全一致,但在-10区的序列不同,分别是TATAAAA和ACTGCT,你认为基因A与基因B的转录物之比大于1.0还是小于1.0?为什么?6.下图显示的是哺乳动物的一种蛋白质基因的结构,它由10个片段组成,分别以A-J表示。A、B为启动子上游元件,C为启动子D、F、H分别为外显子1、2、4,E、G为内含子1、2,I为AATAA,J为非编码序列。(1)哪些片段会出现在初级转录产物中?(2)哪些片段会出现在成熟的mRNA分子上?(3)成熟的mRNA分子含有哪些不是由基因编码的序列?7.论述原核、真核转录的区别。一)RNA pol的区别原核生物只有一种RNA pol,不同的因子识别不同的启动子,以调节基因的转录。 真核生物有三种RNA pol:RNA pol负责转录18SrRNA和5.8SrRNA,RNA pol负责转录mRNA和snRNA,RNA pol负责转录tRNA、rRNA。线粒体、叶绿体RNA pol与原核生物类似。(二)转录起始的区别原核生物RNA的全酶与启动子相互作用装配成起始复合物。真核生物转录起始阶段,多种转录因子、RNA聚合酶与启动子及其调控元件相互作用,才能装配成起始复合物。(三)转录与翻译偶联关系的差别 原核生物转录与翻译在时间、空间上存在偶联关系真核生物转录在细胞核,翻译在细胞质,不存在偶联关系。四)转录产物的差别 原核生物转录产物为多顺反子,真核生物转录产物为单顺反子。顺反子(cistron):即结构基因,为决定一条多肽链合成的功能单位。顺反子是一个遗传功能单位,一个顺反子决定一条多肽链。(5) mRNA的差别原核生物mRNA:半衰期短,多以多顺反子的形式存在 ,5 端无“帽子”结构, 3 端没有或只
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