土壤速效氮的测定.doc

土壤铵态氮的测定(KCl浸提靛酚蓝比色法)方法原理：用2mol/L KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+浸提出来。土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05-0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量称正比，可用比色法测定。主要仪器：往复震荡机 分光光度计试剂配制：1. 2mol/L KCl 溶液:称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1000ml。2. 苯酚溶液：称10g苯酚和亚硝基铁氰化钠100mg稀释至1000ml。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，4冰箱保存。3.次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠10g、Na2HPO4.7H2O 7.06g、Na3PO4.12H2O 31.8g和52.5g/L次氯酸钠（即含5%有效氯的漂白粉溶剂）10ml 溶于水中，稀释至1000ml，贮于棕色瓶中，在4冰箱保存。4.掩蔽剂：将400g/L的酒石酸钾钠与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100ml混合液中加入10mol/L氢氧化钠溶液0.5ml。5.铵态氮标准液配制：称取干燥的硫酸铵 0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1000ml，制备成含铵态氮 100ug/mL 的贮存溶液；使用前加水稀释40倍，得2.5 ug/mL标准溶液。操作步骤：称取过20目筛的风干土样5g，加入氯化钾溶液50ml，振荡1小时，取出静置，吸取上清液10ml进行分析（如果不能在24h内进行分析，用滤纸过滤悬浊液储存在冰箱中备用）。将10ml上清液吸入50ml试管内，加5ml苯酚溶液，5ml次氯酸钠碱性溶液，摇匀。在20室温下放置1小时，加掩蔽剂1ml以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度，在625纳米处比色，读取吸光值。标准曲线绘制：分别吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml铵态氮标准液于50ml试管中，各加10ml氯化钾溶液，加5ml苯酚溶液，5ml次氯酸钠碱性溶液，摇匀。在20室温下放置1小时，加掩蔽剂1ml然后用水定容至刻度，在625纳米处比色，读取吸光值。注：显色后在20左右放置1小时，再加入掩蔽剂。过早加入会使显色反应很慢，蓝色偏弱；加入过晚，则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解。土壤硝态氮的测定试剂配制：1. 2mol/L KCl 溶液:称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1000ml。2. KNO3 标液配制: 100ug/mL KNO3贮存液，称0.7221g KNO3溶于1000ml水中；稀释此溶液10倍即得10ug/mL KNO3标准液。3.10% H2SO4操作步骤：1.与铵态氮一块浸提，共用浸提液。2.吸取土壤浸提液5ml（用KCl溶液补至10ml）或10ml于50ml试管中，加10% H2SO4 1ml，然后定容至刻度，分别在210和275纳米下比色，读取吸光值。标准曲线绘制：分别吸取KNO3标准液0、1、2、4、6、8、10ml