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文档简介
y 6 1 0 1 8 4 干燥方法对红枣总黄酮含量的影响及其生物功能初探 盛文军 攘要筑枣( z i z y p h u sj u j u b a 艇j 1 ) 又拣牮枣、大枣,是缀产于中国的鼠攀 科枣属多年生落叶小乔木枣树的子实。红枣是“药食同源”果品。中国古代 医学论述:红枣“朴少气少津液”、“安中养脾”、“解心脾邪气”、“和解药性”、“澜 心瓣,止嚷,补五脏,治璇损,滁肠鬻癖气”等。现代辱埠学分桥表明,上述功效 均系诸多功能保健成分所数,这些功能保健成分感红枣深加工利用的物质基础。 翻蔫袋代分析手段,诞实红枣仓有多霉牵功挠缣健耪菝,其中燕要豹一释系芦丁 ( r u t i n ) 成分,它能增进人体内v c 的作用,防止血管硬化,降低血管通透性 增强其弹矮,降低照耀,瓣鞭茨秘澹疗惑藏盘管痰薅,其骞重蘩终嗣。 干燥魑红枣深加工的煎要工序之一。各种传统的与现代的干燥技术,其机瑚 不阉,辩暇料成份的影嚷瞧不相网。硬究器零中干燥方法对红枣总荧酮食爨的影酾, 对艏续的加工利用意义重大。 刹用璃效液柱色谱搜术。将试验得到的红枣黄酮褪品进行_ 奶步分析,了解其 主簧成份,进一步研究红枣黄酮粮品对小鼠的盘脂东平及抗氧纯作用的影锏。为 开发红枣保健食品进行了有益的探索。 本论文通过各项试验,获得以下结果: l 所设定的红枣总黄酮提取、纯化工艺平均加样回收率9 9 4 ,r s d = 1 3 4 ,符合 试验精度要求。 2l s a 一2 0 大孔树脂用于黄酮纯化效果最好,吸附率9 8 6 ,洗脱率9 7 6 , 相对得率9 6 2 3 。 3 鲜枣总黄酮含量( 以芦丁为标准品) 为2 9 6 6 m g l o o g 。 4 微波干燥在微波功率0 2 4 5 w 、干燥时间l o m i n 、单位面积载样量5 0 9 d m 2 时, 所得红枣总黄酮含量最高:因素影响顺序:微波功率 干燥时间 单位面积 载样量。微波功率和微波干燥时间对红枣总黄酮含量的影响极显著,单位面 积载样量对红枣总黄酮含量影响显著。 5 热风干燥以热风温度4 0 、干燥时间8 h 、单位面积载样量1 5 0 9 d m 2 时所得 红枣总黄酮含量最高;因素影响顺序:干燥时间 热风温度 单位面积载样 量。干燥时间对指标影响极显著,热风温度和单位面积载样量对指标影响不 显著。 6 冷冻干燥试验表明,红枣总黄酮含量随干燥时间呈现幂函数下降关系,回归 方程为y = 3 0 0 2 8 r ”,相关系数r = o 9 8 3 7 。 7 螽熬予蠛试验袭螟,甄枣慧黄戮鑫嚣瓣薅滔娶蠼奁线下辩关系s 萁毯爆方器 为:y 一0 7 1 1 1 x + 2 9 4 + 5 4 ,相凝系数r = o 9 9 6 7 。 8 四秘干燥试验比较,微波干燥蹶褥缒枣总黄熬含量2 1 8 ;6 m g t o o g ,水分食爨 2 4 3 ;热风干澡所褥红枣总黄酮含豢1 8 9 3 m g t o o g ,水分禽量2 7 9 :真 空冷冻干燥所得红枣总黄酮禽攮2 7 5 。2 m g 1 0 0 9 ,水转含量6 9 ;囱然干燥 掰褥魏枣慈黄粥含塞2 6 1 。5 m g l o o g ,水分含灏2 9 。7 蓠。 9 应用黼效液棚色谱技术初步撩定得出:红枣黄酮粗品中含量最糍为芦丁 ( 1 9 3 ,6 弘g ) ,黄黧粪满努在黄蕊粳熬孛占4 8 ,酚簸豢耪矮占3 2 ,英它黔 类物质占2 0 。红枣鼹酮粗晶的主体为黄酮畿成分。 1 0 红枣黄醮褪燕辩枣鼠_ 淑骚数试验指澎:中、鬣粼量秘红枣黄骥粳晶,黯枣戳 血清中甘油三黼和总服固醇的升高具鼹著抑制作用,且有效促进商密度脂鬣 瞧的转化。巅裁量红枣菠酮糕晶比单一芦了的终鬟鹾显。 ll 红枣荧酮疆品对小鼠体内抗氧化作嗣的试验指出:释荆萱缀的红枣鬻硐粗懿 显著抑制小鼠体内氧岛由基的嶷成,辨显罄降低小撼体内弼= 醛的生成。篓 枣黄耐辍鑫霹静铽,j 、鬣盎液鞠翳麓豹过氧纯裁生戒。 荚缝蠲:薮枣总黄黧于爨凌麓浮徐 1 1 t h ei n f l u e n c eo f d r y i n gw a y s o nt o t a lf l a v o n o i d so fc h i n e s e j u j u b am i l l a n d p r e l i m i n a r ye x p l o r a t i o n f o ri t sf u n c t i o ne v a l u a t i o n s h e n gw e n j 秘 a b s t r a c t :j u j u b am i l li s as p e c i a ll c i n do fc h i n e s ef r u i t s i th a sm a n yk i n d so f n u t r i t i o n a li n g r e d i e n t s t h er u t i ni nj 哂u b ac a l li m p r o v et h ee f f e c to fv ci no r g a n i s m o 氇e rf l a v o n o i d sw i l lt a k ed i f f e r e n te f f e c t s 。 i nt h i st h e s i s ,t h ei n f l u e n c e so ff o l l rd r y i n gw a y so nt o t a lf l a v o n o i d so fc h i n e s e j u j u b am i l lh a v eb e e ns t u d i e d b yt h eh p l c t h ec o m p o s i t i o n so fc h i n e s ej u j u b am i l l h a v eb e e na n a l y z e d f u r t h e r , t h ef i m e t i o no ft o t a lf l a v o n o i d si nc h i n e s ej u j u b am i l lh a s b e e ne v a l u a t e d t e n t a t i v e l y t h em a l nr e s u l t sa r el i s t e da sf o l l o w s : 1 t a v e r a g er e t r i e v a lp r o p o r t i o no f t h er u t i na d d e di nt h ej u j u b am i l li s9 9 4 r s d = i 3 4 t h et e c h n o l o g i c a l p r o c e s s c h o s ei nt h i st h e s i si sf i tf o rt h e r e q u i r e m e n t 2 i nt h r e et y p e so fm a c r o r e t i e u l a ra d s o r b e n t ( l s a 5 ,l s a - 8 ,l s a - 2 0 ) ,l s a 一2 0 s h o w e dt h eb e s tc o m p r e h e n s i v ea b s o r p t i o na b i l l t y t h ea d s o r p t i o nr a t ei s9 8 6 , t h ee l u v i a t i o n sr a t ei s9 7 。6 ,羊h op r o d u c t i v i 瓣i s9 6 。2 3 3 ,t h ec o n t e n to f f l a v o n o i d si nf r e s hc h i n e s ej 塌u b am i l li s2 9 6 6 m g 1 0 0 9 4 f o rm i c r o w a v ed r y i n ge x p e r i m e n t t h eo p t i m a lp a r a m e t e r sa r cf o l l o wc o n d i t i o n s : p o w e r 0 2 4 5 w jt i m e 10 m i n ,t h ew e i g h to fj u j u b a m i l lp e rd e c i m e t e rs q u a r e 5 0 9 。 t h ef l a v o n o i dp r o d u c t i v i t yu n d e rt h e s ep a r a m e t e r si s2 1 8 。6 r a g l o o g + t h ee f f e c t f a c t o r sa 托s e q u e n c e d ;p o w e r t i m e w e i g h t + 5 f o rh o ta i r d r y i n g ,t h eo p t i m a lp a r a m e t e r s s h o w e da sf o l l o w s :h o ta i r t e m p e r a t u r e 4 0 ( 2 ,d r y i n gt i m e 8 h o u r , t h ew e i t g h t o fj u j u b ap e rd e c i m e t e r s q u a r e 1 5 0 9 。t h ef l a v o n o i d sp r o d u c t i o nu n d e r t h e s ec o n d i t i o n si s1 8 9 3 m g 1 0 0 9 t h o p a r a m e t e r s a r es e q u e n c e da st h i s :t i m e t e m p e r a t u r e w e i g h t 6 i nv a c u u mc o l dd r y i n ge x p e r i m e n t ,t h ef l a v o n o i d so fj u j u b am i l li sr e d u c e d c o m p a n i e dw i t ht h ed r y i n gt i m e t h er e g r e s se q u a t i o n i sy = 3 0 0 2 8 x 。蛇”。 r = 0 。9 8 3 7 7 i nn a t u r a ld r y i n ge x p e r i m e n t ,t h ef l a v o n o i d so fj u j u b am i l li sr e d u c e da sl i n e c o m p a n i e d w i t ht h ed r y i n gt i m e t h er e g r e s se q u a t i o ni sy 。- o 7 1 1 1 x + 2 9 4 5 4 r = 0 9 9 6 7 。 l l 8 c o m p a r e d f o u r d r y i n gw a y s ,t h e f l a v o n o i d si nm i c r o w a v e d r y i n g i s 2 1 8 6 r a g l o o g ,t h el a s tm o i s t u r ec o n t e n ti s2 4 3 ;1 8 9 3 r e i g l o o g ,2 7 9 i nh o t a i rd r y i n g ;2 7 5 2 r a g 1 0 0 9 ,6 9 i nv a c u u l nc o l dd r y i n g ;2 6 1 5 m g 1 0 0 9 。2 9 + 7 i nn a t u r a ld r y i n g 9 t h r o u g hh p l ct e s t ,t h em o s tc o m p o s i t i o ni nj u j u b am i l lf l a v o n o i d si s r u t i n t h ep r o p o r t i o no ff l a v o n o i d si s4 8 ;t h ep r o p o r t i o no f p h e n o la i di s3 2 :t h e p r o p o r t i o n o f o t h e r p h e n o l s i s2 0 1 0 f l a v o n o i d so fj u j u b am i l lw i l lr e d u c e dt h et ga n dt ci nr a t ss e r u ma n d i m p r o v et h eh d l cc o n t e n t t h eh i g hd o s a g ej u j u b am i l l f l a v o n o i d se f f e c t m o es i g n i f i c a n t l yt h a ns i n g l er u t i n 11 f l a v o n o i d so fj u j u b aw i l ls i g n i f i c a n t l yr e d u c et h ef r e er a d i c a la n dp r o d u c t i o no f m d a a d d i t i o n a l ,t h ef l a v o n o i d so fj u j u b am i l lc a nr e s t r a i nt h ep r o d u c t i o no f h 2 0 2 i nr a t sb l e e da n dl i v e r k e y w o r d s :j 匈u b a f l a v o n o i d s d r y i n g f u n c t i o ne v a l u a t i o n i v 刖吾 红枣是中国特色果品,是闻名中外的传统滋补佳品。古中医学和古农书中的 大量论述以及近、现代科学研究均表明,红枣具有极高的营养和经济价值。而枣 树抗旱、耐涝、耐盐碱,具有很强的抗逆性,又具有很重要的生态意义。 红枣加工方式主要为传统的糖渍、干制,近年对红枣提汁、制粉、酿酒加工 技术的研究较多。鲜枣采收季节多遇连绵秋雨,烂果率较高,正常年份生产中亦 存在大量残果、次果,对其进行干燥保藏,用作二级加工原料,进一步提取红枣 色素、分离功能成分等,变废为宝,提高了增值效益。 干燥是红枣加工特别是残、次枣加工的重要工序之一。各种干燥技术的机理 不同,对原料成分的影响也不相同。研究不同干燥方法对红枣特定成分的影响, 对后续加工利用具有重要意义。本试验研究了四种不同的干燥方法对红枣总黄酮 含量的影响。 本试验制得了红枣黄酮粗品,对获得的红枣黄酮粗品利用高效液相色谱技术 进行了初步分析,了解其主要组成成分。 试验研究了红枣黄酮粗品对小鼠的血脂水平及抗氧化作用的影响,为丌发红 枣保健食品进行了有益的探索。 文献综述 1 红枣营养成分及深加工应用前景 1 1 红枣的营养成分 红枣( z i z y p h u s j u j u b a m i l l ) 又称华枣、大枣。是原产于中国的鼠李科枣属多 年生落叶小乔木枣树的子实,在日本、韩国也有少量种植。其种植地主要分 布在北纬2 3 - 4 2 5 。、东经7 6 1 2 4 。之间的广大区域。在中国,主要分布于北部的 陕西、山西、河北、山东、河南等省;南部少量分布于四川、湖北、安徽、浙江 等省【l 】。枣树在我国的栽培历史悠久,齐民要术、打枣谱等古书中对枣树的 选种、栽培、管理、采收等等都有详细的记载和描述。各地地方志中也有对当地 红枣栽培、种植、销售及消费等情况的记载。河南省府志曰“枣以去核去皮之白 枣为佳,永城县岁出1 0 余万担”。河南省永城县县志记述了枣脯的制作:“刮皮去 核,橙黄铮亮,质软稍韧”。而近代考古学的诸多发现如1 9 7 3 年山东省临朐县 发掘出土的至今1 2 0 0 - - 1 4 0 0 年的酸枣叶化石、1 9 7 8 年河南省新郑县出土的新石器 时代的碳化枣核、以及湖南省长沙市马王堆遗址出土的红枣陪葬品等,更是将红 枣的食用历史追溯到7 8 0 0 多年以前【2 】。 在如此长的历史中,红枣的医疗、保健功能在中国传统医学论述中得以阐明。 红枣作为“药食同源”的果品,历来被人们看作是“滋补上品”。神农本草经 中就有大枣主“补少气少津液”和“安中养脾”的记载,又有主治“心脾邪气”、 可“和解药性”之功效。汉代张仲景伤寒论中也提到“大枣味甘、性平、无 毒、入脾、胃二经”。该药书中还记述,孕妇产后食用红枣,能补中益气、养血安 神,加快身体复原;年老体弱者食用能延缓衰老、增强体质。脑力劳动者及神经 衰弱者用红枣汤代茶常饮。能宁心安神、增进食欲。又据张仲景药法研究中 记载:“仲景用枣者,分布于桂汁汤当归四逆汤等六十六个方剂中,用枣方剂 数量之多,约占伤寒、金匮两书之方剂总数的四分之左右【3 】”。而在齐 民要术所讨论的4 2 种果品中,红枣位居榜首。本草纲目中记载红枣:“熟则 可食,干则可补,丰俭可以济时,疾苦可以备药,辅助粮食以养民生”:“干枣润 心肺,止咳,补五脏,治虚损,除肠胃癣气”;“大枣味甘无毒,安中养脾、平胃 气,通九窍”,红枣可谓是中国药食同源理论的典型代表r 】。 据近代科学研究表明,红枣营养丰富。经中国农科院分析中心测定,干红枣 中糖含量达5 5 8 0 ,磷0 o 弦1 2 7 ,钾0 6 l 1 0 5 ,钙o 0 3 , - , 0 0 6 镁0 0 3 0 0 5 , 粗蛋白约2 9 2 ,粗纤维约2 4 1 ,粗脂肪约0 9 6 ,维生素c 约8 7 m g l o o g ,维 生素b i 约0 1 7 m g l o o g ,同时含v a ,v b 2 ,v p l 5 j 。红枣还含有丰富的有机酸和人 体所需的八种必需氨基酸。每1 0 0 克枣可产生3 0 9 大卡的热量,可与豆类相媲美。 以陕西著名红枣产地佳县为例,其三个主要红枣品种营养成分如下( 陕西省林 业科学研究所测定) : 表1 佳县红枣营养成分表 项目油枣木枣方墩墩枣 鲜果重( g ) 1 5 41 2 79 5 干果重( g ) 5 66 14 3 出肉率( ) 9 1 19 2 69 0 2 v c ( 鲜) ( m g 1 0 0 9 ) 4 3 93 7 2 53 1 0 3 总酸( )1 51 6 81 1 9 可溶性糖( )8 6 47 6 36 8 2 n ( )o 8 70 7 4o 8 6 p ( )0 0 9 00 0 3 4o 0 7 1 k ( )1 2 l1 0 0o 6 6 m n ( m g k g ) 4 1 62 8 35 1 9 z n ( m g k g ) 9 4 99 1 01 0 5 4 f e ( m g k g ) 2 0 4 32 2 8 02 0 4 9 游离氨基酸( m g 1 0 0 9 ) 4 6 64 2 57 9 7 粗纤维( ) 4 6 22 6 35 3 0 而利用现代科学手段进一步分析,发现红枣还含有多种生理活性物质:比如, 同人参一样,红枣含有环磷酸腺苷( c a m p ) ,环磷酸腺苷是人体内能量代谢的必 需物质,它能够增强人体肌力,帮助人体抵抗疲劳扩张血管,增强心肌收缩力, 改善心肌营养【6 l ;另外,红枣还含有丰富的芦丁( r u t i n ) 成分,芦丁能加强体内 v c 的作用,促进v c 在体内的积蓄,使人体血脂胆固醇降低,防止血管硬化。芦 丁还可以减小血管通透性,降低其脆性,是预防和治疗高血压的有效成分【_ ”。 1 2 枣树栽培及红枣深加工应用前景 1 2 1 枣树栽培前景 据中国农业年鉴统计资料,从1 9 8 0 1 9 9 5 年1 6 年间,我国红枣产量由3 7 0 0 万公斤上升到7 8 0 0 万公斤,而目前,全国枣树栽培面积己近6 7 万公顷( 约1 0 0 0 万亩) ,年产量近1 0 亿公斤,其中陕西、山东、河北、山西、河南五省约占全国 总产量的9 0 左右哺】。近年来,全国枣树不仅种植面积和产量增加很快,而且品种 结构进一步优化。贮藏、加工能力有所增强,出口不断增加,市场前景看好。与 其他树种相比该树种有其特有的优势。我国人e l 多,人地矛盾十分尖锐,在中 央提出“退耕还林,改善生态”的政策之后,必须解决好生态保护和广大农民群 众生产生活之间的矛盾。红枣具有独特的生态经济效益和广阔的应用前景:枣树 适应性强,抗旱,耐涝,耐瘠薄盐碱,栽培管理容易,早熟丰产,用途广泛1 9 。在 贫困的山、沙、碱地区,枣树还是水土保持的优良树种,枣粮间作,可以防风固 沙,改变小气候,建设生态屏障,改善生态环境。 1 2 2 红枣深加工前景 目前,采收后的红枣少量用于鲜食,一部份被制成蜜枣、醉枣、枣茶、枣汁、 枣饴糖等制品,总产量的9 5 以上被制成干枣销往国内外,干制是目前红枣的主 要加工方式i l 。 另一方面,每年采后鲜枣烂损率较高,加之种植、采收时产生的残、次果, 有相当比例的枣实不能直接进入流通环节,这部分红枣经干燥后,可以作为二级 加工的原料,如用来酿制枣酒;也可用以制造生产辅料如生产红枣色素;还可 以用以提取功能成分,如提取黄酮物质。其深加工应用前景十分广阔,目前对红 枣深加工的研究也正在深入展开。 2 研究干燥技术对红枣深加工的意义 2 1 意义 如前所述,无论是鲜枣的干制,还是对残、次、伤果的处理,都要用到干燥 工艺。干燥技术可以脱除果实中大部份水分,降低酶活性,改变果实组织结构及 加工特性,使其适宜于贮藏和后序加工】。 更为重要的是,干燥过程中红枣的营养成分发生了变化【孙。如何在干燥过程中 尽量保存我们所需要的营养成分,对红枣深加工具有现实意义。 2 2 干燥技术 2 2 1 微波干燥 微波干燥技术应用于食品工业始于上世纪4 0 年代末,1 9 4 7 年由美国人马文贝 克根据微波的加热效应制成了世界上第一台用于食品加热的微波炉。经过十多年 的探索后,1 9 6 5 年由美国c r y o d e y 公司成功地研制出世界上第一台隧道式微波 干燥设备,并在s e y f e r t 食品公司首次投入应用,它为微波干燥技术的广泛应 用奠定了坚实的基础。我国将微波技术应用于食品工业是从2 0 世纪7 0 年初开始 的1 12 1 。 2 2 1 1 微波干燥原理 微波是指波长在l m m l m 。频率在3 0 0 m h z 3 0 0 g h z 之间的电磁波,它具有 电磁波的共性既具有粒子运动携带的机械能,同时也具有场能,包括电场能 和磁场能。而且电磁场均以正弦曲线特征发生周期性极性改变。 物料中的各种分子在场诱导效应下,会产生偶极矩,即分子产生正负两极, 称为偶极子,并且偶极子的正负极与它所在场的极性方向始终保持相反。当电磁 场的极性方向发生改变时,偶极子发生相应的反转。这样,当电磁场的极性方向 发生高频率的交替变化,电磁场中的偶极子也发生极高速的反转、振荡和迁移, 比如在2 4 5 0 m h z 的微波频率下,偶极子的振荡可达到每秒6 8 万次,偶极子之间 相互碰撞、磨擦。产生机械损伤力和大量的热。 水分子作为物料中最易极化的分子,在微波产生的电磁场中运动也最剧烈, 产生的热量使水分子急速逸出物料表面,从而达到干燥的目的。 2 2 1 2 微波干燥的特点 干燥速度快,干燥时间短。由于微波能够深入到物料内部而不是依靠物料本 身的热传导进行加热,加热速度大大高于常规干燥方法只需一般方法的十分之 - n 百分之一的时间就能完成整个干燥过程。 热惯性小,易于控制,加热均匀。常规加热是物料表面先受热,然后通过热 传导把热量传递到内部,而微波加热是使物料表面和内部水分子同时受到场作用, 因此加热均匀,既可避免传统加热干燥过程中由外向内形成的温度梯度导致表面 硬化,也可防止局部过热产生焦化。另外,微波加热具有自平衡性,就是说,当 物料中某个部位的水分子因蒸发而减少时,微波在该部位的作用也相应减弱,不 会发生过热现象。 热效率高,设备占地少。由于微波加热是“物料内部加热”,所以加热设备本 身基本不辐射热显,热损失小,热效率高,可达到8 0 ,与常规方法相比,可节 能3 0 5 0 。另外,微波加热设备体积小,占地也少。 2 2 1 3 微波干燥对物料的影响 微波产生的电磁场对物料可极化分子都有作用,虽然对水分子作用最强,其 他成分的分子极化形成偶极子后也产生高频的翻转振荡,碰撞磨擦,而且微波的 频率越高,这种作用也越剧烈,微波作用时间越长,分子问碰撞磨擦受损程度越 大,因此微波频率与作用时间是物料中成分保存的主要影响因素。 2 2 2 真空冷冻干燥 2 2 2 1 真空冷冻干燥原理 真空冷冻干燥,又称为冷冻干燥,是真空与冷冻相结合的新技术。根据熟力 学中相平衡原理,水的三柑点温度为0 0 0 9 8 ,三相点压力为6 0 9 3 p a 。在水的相 变过程中,当环境压力低于水的三相点压力时,固态冰可以直接转化为汽态,称 为升华,真空冷冻干燥就是利用了这一原理。将物料首先进行深冻,物料中的水 在低濑下冻结成冰晶体,然后猩高真空度条件下,由于物料内的水分压力处于正 常三相点压力之下,所以冰晶体舆接升华为水蒸汽逸出,使得物料得以干燥i l 孙。 2 。2 + 2 ,2 寞空冷冻予燥瓣特焘 利用真空冷冻干燥,物料的失水过程怒在低温( - 4 0 ( 2 5 5 ) ,离真空状态下 进行的。因此对热敏性、易氧化成分的保存率较高。物料猩深冻时,其内部的水 形成球晶,使得溶予承的成分析如面滞蟹在物料内部,当冰晶嚣华时,不会影响 英状态,避受了殷干澡方法因貉辩内部承分囱表嚣移动褥游元撬薤稳蒸继毒溶 性物质携带到物料表面造成的营养损失。另外,真空冷冻干燥后的物料凝多孔、 疏松络构,具更好的复水性,便于后序加工处理。 2 。2 。2 。3 囊空冷猿予澡黠耪糕粒彩媲 冀空冷冻干燥嚣其有以上所述特点,对物料中大都份成分都有缀好的保存, 而真窳度高会使少摄易挥发物质损失,主要袭现在干燥对象的香味损失。 嶷空冷冻干燥过程中,。冻结深度和速度,以及基华的嶷空度都影晌到物料的 于澡速度。冻结抉,冻结完全,澎藏瑟晶夸,容荔舞华;褥在羁撵漫瘦下,囊空 度越离,升华速度越快。 2 2 3 热风干燥 2 。2 。3 。1 热贰手澡簌瑷 热风干燥是传统的干燥方法,是依据热佟导效应,将热量扶干燥奔质传递给 物料物料吸收热挺后,产生两个扩散,即水分由物料表颟到干燥介质中的外扩 散,以及物料内都水分到物料表颟的内扩散,魏个扩散持续进行,壹到物料中水 分下洚到一定程度器速到于藻懿嚣豹。 2 2 3 2 热风干燥特点及对物料的影响 热风干燥是在高温( 5 5 c 以上) 和有氧条件下进行的,干燥过程中,发生许 多纯学交毽,翔黔粪凌震会在畿豫嚣豹催毒艺下发生氧佳,绻生素类在麓滋下荔被 破环,氨基酸和糖高温下发生美挝德反应等。热风干燥豹派度和时闻,楚影晌耪 料中髂养成分变化的主要因素。 2 2 4 囊然干燥 爨然于绦是翻麓太阳辐瓣秽空气滚动避抒麓菲撬壤手爨过程,干燥瓤理与熬 风干燥相同,但干燥时间长,一般在4 0 天左右,物料中酶的活性不能很快被抑制, 呼吸作用持续时间较长,有机物质消耗高,识由于干燥过糨温度一般比热风干燥 要低,黠予郝携热敏搀耱质保努较妊。 6 3 黄黼类纯食物及箕生物功能 羹醒类纯舍鐾怒撞物体痰经竞会终爱嚣形成懿一丈类健会耪,楚鞋a 一苯基 类为最大的两类,约各占总数的三分之一和四分之一。 3 1 黄酮类化合物的提取、分离和纯化 黄酮类化合物的提取主要用有机溶剂、热水辅助酶解、超声波提取及超临界 c 0 2 提取。分离多用双向纸层析、薄层层析及柱层析,还可运用高效液相色谱技术 直接分离、分析黄酮类化台物。国内外对黄酮化合物的提取分离研究很多,据文 献报道:邢秀芳研究了纤维素酶在葛根总黄酮提取中的应用,结果显示在纤维素 酶的作用下,葛根总黄酮的收率提高了1 3 1 1 6 1 。廖亮研究了银杏叶中总黄酮的提 取方法。银杏叶经不同的预处理、不同溶剂、不同条件提取总黄酮的实验表明, 烘干后用乙醇提取较好f 1 1 ”。方桂珍正交试验研究了仙鹤革总黄酮的最优提取工艺, 考察了浸提液浓度、浸提温度、浸提时间、浸提次数、料液比等5 个因素对仙鹤 草总黄酮含量的影响。确立了仙鹤草总黄酮最佳提取条件为:浸提液体积分数 4 0 ;料液比l :1 0 ;浸提温度7 0 ;回流次数3 次,每次0 5 小时u 8 l 。 高红宁采用紫外分光光度法测定苦参中总黄酮的含量研究大孔树脂a b 一8 对苦参总黄酮的吸附性挠及魇波浓度、p 董 、波速、洗脱剂的种类对挝黢啜孵性的 影响。确定a b g 辩i 旨时苦参总黄酮的遥宣瑷辩条侔为;原液浓度0 2 8 5 m g m l , 聃h 值为4 。流速为3 b v h 。洗脱荆用5 0 乙醇0 9 。康纯研究了擞乳薄鼷色谱用予 赞酮类势离釜定豹请琵,疆6 种s d s 。藏t 辞蔗庚烷承静镞巍滚作为震汗裁,通 过聚酰赋薄层层析。分离和检测了1 4 种中药材、饮片及成药的黄酮类成结,考裳 了羧嚣液类鍪、酸度等灏素对羚离效暴魏影臻黝。囱丈雅,李靛德,吴夫勇等采 用d 1 0 1 ,d 3 0 1 ,a b - - 8 型大孔吸附树脂吸附、浆酰胺吸附及水饱和正丁蹲萃取5 耱方法鼹蔫辗慧黄蘩遵簿缝纯,虢总黄麓羲率、缝疫及慧黄蘩孛各痰势瓣澡鐾憾 瓿为考察指标综合评价。结果裁明在以上5 种纯化方法巾,a b - 一8 型树脂的综台 蕊麓羲搿,逶岔莓辗憨莛蕊嚣分离笺簧驻n 。 3 2 黄酮荚化苗叨册硼疋 黄酮体的测定目前仍多采用可见及紫外分光光度法,也有采用荧光分光光度 法测定,目前越来越多的研究采用高效液相色谱技术直接进行定性和定量测定。 据文献:方冶以黄芩素进行试验,提出多羟基黄酮化合物的化学发光检测法,测 定样品抗自由基氧化的能力,测定结果在本质上反映样品的生物活性和药理作用 的强弱【2 2 1 。张传部以芦丁为对照品,用分光光度计测定了以桑叶及桑叶保健饮料 为代表的保健食品中总黄酮的含量,方法精密准确。其标准曲线得到线性回归方 程为y = 0 1 0 6 6 x + 0 0 0 0 1 ,相关系数r = 0 9 9 9 7 ,t 检验结果p o 0 5 黄酮爨取物+ o 0 5 v c o 2 黄酮提取物 o 1 黄酮提取物 o 0 5 黄酮提取物 o 0 2 黄酮提取物 对 嘏f 4 9 1 。岛鑫娜研究了广枣总黄酮澍阿霉索丐| 起豹丈鬣心瓶过氧纯攒伤的保护作嗣。 研究表明,广枣总黄酮能抑制a d r 所引起的大鼠心肌过氧化损伤【5 0 l 。郑高利研究 了葛穰鼯黄聚对去彝鬃夫鬣骨矿密度帮嚣强瘦静影响。试验结柒显示,蔫糇异黄 酮对去卵巢引起的大鼠骨质疏松症具有明显的防治作用,这种作用可能和它的弱 鹱毪激豢样活愁骞关瑟”。k e n n e t h 磷究表臻大委菇黄藜麓簿低巍撩瘗、莆秘豫癌, 缓解更年期因雌性激素分泌减少而引起的更年期障碍和骨质疏松症【5 2 】,是大豆食 菇镬盘滚疆霆酵下降豹关键褥震,瓣太驻食品串吴荑鬃购难确定经定叁势辑是疆 究异黄酮生理作用的基础。 4 垂圭基理论窝人体生瑗现象 自由基作为一类化学研究实体,在2 0 世纪初就被人们所认识首先是1 9 5 6 攀h a r m a n 在分子生物学基站上提出来瓣;夔羞分接方法秘手段瓣发曩摹赣,诲多 缴命现象的自由基机制逐渐被揭示出来了。 自由基( f r e er a d i c a l ,f r ) 是指含鸯未成瓣电子也簸是来偶电子戆嚣予、簇 予团或分子。生物体内存在的自由基主黉是半醌炭自由基、氧自幽基和其他以碳、 懿、硫为中心的皇由基。其中影响机体的自蠢基活力大部分寒塞于氧叁由基 ( o x y g e n f r e er a d i c a l ,o f r ) ,羹要的有超氧阴离子自由基、羟自由基、质子化越 飘阴离子自由基、脂氧巍由基和艟质过氧化自由基等。这些自由基由予来偶电予 的存在,其性质活泼,稳定性差,极易攻击其它细脆成分,发生自由基蔓延反应, 导致蔡蹙丈分子交愁,逢蔽缀蕤、缀级绥药秘功襞黪援锈。大蒸蓊究袭装,蠡瘗 基参岛了许多人体生理过程,如衰老例,心m 傺疾病生成,肿瘤细胞增殖等镩。 塞勃在邂像过糕孛,黪逶鑫鞣凌变稼,建立了系弼镑砖叁瓤纂戆茨瓣掺爱累统, 主要是些酶生成系统 ( o o t l 2 9 = m r a o l g ( 2 ) 肌清总胆圈醇的测定 榉蔟孛游逡获鼹傀魏疆爱醇生成籁藿转臻,箨霞棼醚奄i 1 2 0 在鹣藤醇聚臻 的作爆下,生藏骚阖簿和艚肪酸,覆疆阐酵岛娩及h 2 0 淼疆露簿氧纯辩豹作耀 下,生成4 蓬鼷爆3 - 瓣露氆魄,珏2 锡与辱攥萋安替魄鞲豁及酸类耪袋,在道 氧化物酶的作用下,生贼醌亚胺和水。 经上述爱应产玺戆繇耍羧,碍舞努毙毙度法在5 0 0 n m 处测定其霰建凄矗穰, 根据吸光度的变化,推算出胆围醇含鬣,比色光径l c m ,反应时间1 0 r a i n ,反廒 渥度3 7 。 懈胆固醇( m g d l ) 。鬻2 0 0 革位换算:膳固簿m m o l l = m g d l x 0 0 2 5 8 ( 3 ) 瓶清高密度脂蛋囱的测定( 沉淀法) 人血清中低密度精蛋岛( l d l ) 、极低密度疆蛋期( v l d l ) 与试剂中的聚 l - - - 酵一6 0 0 0 作用产生沉淀,经离心盾,上清液中含有的高密度脂蛋白胆固醇 ( h d o c h o l ) 可鞠酶法测定。 其实验参数,高密度脂蛋白分离离心力1 5 0 0 r r a i n ,离心时间1 0 m i n ,测定 懑度3 7 ,波长5 0 0 n m 。祥繇与试;l | 鬻于室漱下平餐1 5 努锋,取样晶2 0 0 # l 与沉淀荆2 0 0 ul 混匀1 5 分钟后,以离心力为1 5 0 0r m i n 离心l o 分钟,取上滴 液弱# l ,黧入工作试裁1 5 0 0 u l 混匀,3 7 零浴l o m l n 螽瓣定其霰巍度( a 。 博h 。h ( m m o l l ) = 燃标准液浓嬲 单位换算;高密度脂蛋白胆固醇r e t o o l l - - r a g a l l x 0 ,0 2 5 8 i 8 。3 小鼠体内抗氧化攥据测定方法 血浆制备:取血试管预先加入肝索抗凝剂,并低温烘干。取血后,摇匀,即 刻再放麟冰浴中冷却,予3 0 0 0 r r a i n 离心5 m i n ,分离血浆,两质将盘浆倾入另一 洁净试臀低温保存备用。 组织匀浆的制各:取适量湿缀织加生理盐水按w :v = i :5 在冰浴条件下用缎 织匀浆机制成匀浆,并予3 0 0 0 r m i n 离,昏1 0 m i n ,将上清液倾入漓净试管低温保存 备用。 ( i ) 麓氧纯物技亿酶( s o d ) 活性测定 魈氧化物歧化酶( s o d ) 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反成系统产生超氧阴 离子自由基( ) ,螽嚣氧证羟胺形残疆硝酸赫,在显像帮酶佟糯下呈现紫红色, 当被测样品中食有s o d 时,则对超氧阴离子自由基有专性的抑制作用,使形 成静鬟硝酸盐减少。 计算;血浆中s 0 d 活力n u 札一o d i - o l d _ _ _ _ 丝2 - 5 0 稀释倍数 缎织匀浆中s 0 d 活力n u m g p r o t - - 警5 勰稀释倍数组织中骚 巍含量 o d l = 对照管吸光廒 o d 2 = 测定警吸竞痉 ( 2 ) 过氧化氢酶( c a t a l a s e ,c a t ) 的测定( 紫外法) 鬣氧皇痰基( o f f ) 是诧学性质蓑溪泼豹溪性氧,宅足乎与鲴戆内豹每一类 有机物如糖、甄基酸、磷脂、核苷酸和有机酸都发生威应,它的破坏性极强,假 它可以妓过氧纯夔酶分艇,红细胞或缀织中过戴化氢薅( c a t ) 在一定条终下能 直接分解其底物过氧化氢( h 2 0 5 ) ,使h 2 0 2 在反应液中的浓度逐渐降低,相应的 吸光度也下降。 取经过前处理的样本0 0 2 m l 加入比色越底部,将已预温鬣2 5 ,o d 值在 o 。5 棚5 5 之间的底物溶液3 m l 直接用5 m l 或1 0 m l 移液管快速冲入比色弧, 2 4 0 r i m 处立即测定吸光度,记下o d l 镳,鲍色砸不取出,1 分钟后立即再铡一次 吸光度,记下o d 2 值。单位定义及计算公式如下: 肇位定义;每克敷红蛋自或每克缀织蛋自中过氧纯氢酶( c a t ) 每秒钟分解 吸光度为o 5 0 - 4 ) 5 5 的底物中的过氧化氢相对璺为一个过氧化氢酶的活力单位。 计算公式:c a t e 2 = l o g 器x 面2 3 0 3 * * x a + b ” 浓度与吸宠瘦或羹矮关,o d l 荛2 4 0 r i m 娥零秒戆啜光度,o i h 为2 4 0 n m 处 6 0 秒时吸光度。 一2 3 0 3 扶是然对数换算或豢瘸黠数l o g 孵矮乘良2 3 0 3 a 为血缎蛋白或组织蛋白的稀释倍数( 包括样品测试前稀释倍数及取样避 农反应渡中舔释傣数) 。 ”b 为样龋中每毫升血红蹑白克数或者每瘫升组织蛋白克数 ( 3 ) 聪二醛( m d a ) 食量的测定 过氧化脂质降解产物中的m d a 可与硫代巴比妥酸( t b a ) 缩台形成红色产 物,程5 3 2 n m 处有最大吸收峰,比色测定可计簿出m d a 的含量。 血滴中m d a 计算方法( 单位n m o l m e ) : 删食量= 黼燃篇器燃x 标准暴黻x 样品稳释徽 组织匀浆中m d a 计算方法( 单位n m o l m g p o r t ) ; 删德= 黼黼焉黼器标准品浓度谁囱能 + n m o l m g p o r t 为纳摩尔,毫克蛋白 2 结粜与分析 2 1 标准曲线与回归方程 投据试验测簿筹下糠准螽溶浚各熹暖必震薅翔下 袭6 芦丁标准溶液对应黄酮含量及暇光度 标准
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