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文档简介

实验:培养液中酵母菌种群数量的变化,实验原理:探究问题:提出假设:,酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液成分、空间、pH、温度等因素会影响酵母菌种群的增长,培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?,在资源和空间有限的环境中,酵母菌的种群呈“S”型增长,需要准备的材料及用具,探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等,都是由老师提供,目的要求1、学习使用血细胞计数板进行微生物计数2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、体会影响种群数量变化的因素,血细胞计数板,血细胞计数板的结构,血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。,大方格,中方格,小方格,方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm1mm0.1mm,其容积为0.1mm3;大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,即2mm2mm0.1mm,其容积为0.4mm3,计数室通常也有两种规格,1625型:即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格,2516型:即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。,不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,2、计数,1625型:一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数,2516型:一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。,盖玻片下的培养液厚度为0.1mm,请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数,换算成10ml培养液中酵母菌总数的公式。(大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm1mm0.1mm,其容积为0.1mm3;)(1ml=1cm3=1000mm3)每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式,(1)16格25格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数4106(稀释倍数),(2)25格x16格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数4106(稀释倍数),大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3。则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(2mm2mm):,(1)16格25格的血细胞计数板计算公式酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数106(稀释倍数),(2)25格x16格的血细胞计数板计算公式:酵母细胞数/ml=一小方格内酵母菌个数106(稀释倍数),1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm1mm0.1mm方格,由400个小方格组成,若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。,540010000102108,2019/12/13,12,可编辑,2、检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。,现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻多少个。,n/8040010000105n105,怎样进行酵母菌的计数?提示:对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。,注意事项,从试管中吸出培养液进行计数之前,建议将试管震荡几次,目的是什么?本实验需要设置对照吗?本实验需要做重复实验吗?,目的:使培养液中酵母菌分布均匀,以保证估算准确,减少误差,不需要,因为本实验在时间上形成自身前后对照,需要,提高实验数据的准确性,注意事项,如果计数时,一个小方格中酵母菌过多,难以计数,应该采取什么措施?对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?,可将培养液稀释一定倍数后再计数。目的是方便计数,计相邻两边及其夹角上的酵母菌,计数方法:方格内部及相邻两边及其夹角上的酵母菌,血细胞计数板的如何清洁?,血细胞计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗的方法清洗。,怎样记录结果?怎样表怎样设计?,首先通过显微镜观察,估算出10ml培养液中酵母菌的初始数量(N0),在此之后,每天同一时间,取出各组试管,用血细胞计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。,(4)计数计数:首先取样,每天取样时间大体一致,并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀,正确地使用1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里,然后用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘,待培养液自行渗入并充满网格后,再放在显微镜下进行细胞计数,后立即将数据填到记录表格中。如记数时发现,细胞数较多,不易分辨,吸取的样液应当稀释。参考1:一次实验数据记录表参考2:出A、B、C各个处理的曲线图,酵母菌的种群数量在资源和空间有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。,1、探究酵母菌的种群数量实验中,某学生的部分操作过程如下:(1)把酵母菌培养液放置于冰箱中培养,(2)从静置试管中吸取酵母菌培养液计数,(3)到第七天取样计数,请纠正其错误:(1)_(2)_(3)_.该同学用25格x16格,其中长

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