苦参碱对大鼠急性心肌缺血性损伤的保护作用.doc

苦参碱对大鼠急性心肌缺血性损伤的保护作用 作者：聂黎虹, 赵瑞宁, 丁娟, 彭涛, 周永忠, 周旭【摘要】 目的 研究苦参碱对大鼠急性心肌缺血性损伤的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为7组：正常对照组、假手术组、模型组、硝酸甘油组、苦参碱2.5、5、10mg/kg剂量组。应用左冠状动脉前降支（LAD）结扎法制备大鼠急性心肌缺血模型。记录结扎前、结扎后1、5、15、30、60min大鼠心率（HR）、平均动脉血压（MAP）；应用分光光度计法检测血清中肌酸激酶（CK）活性和一氧化氮（NO）含量。结果 静脉注射苦参碱5、10mg/kg均可使大鼠HR、MAP明显升高(P0.05或P0.01),此作用在左冠状动脉前降支结扎后15min最明显。静脉注射苦参碱5、10mg/kg，可降低急性心肌缺血大鼠血清CK活性（P0.05或P0.01）；静脉注射苦参碱2.5、5、10mg/kg，可增加急性心肌缺血大鼠血清NO含量（P0.05或P0.01）。结论 静脉注射苦参碱对大鼠急性心肌缺血性损伤有保护作用。 【关键词】 苦参碱; 急性心肌缺血; 肌酸激酶; 一氧化氮Abstract: Objective To explore myocardial protective effects of matrine (MT) on acute myocardial ischemic injury (AMI) in rats. Methods SpragueDawley rats were divided into seven groups, i.e., control, sham operation, AMI, nitroglycerin+AMI, AMI+MT 2.5mg/kg, 5mg/kg, or 10mg/kg. Rat models of AMI were established by ligation left anterior descending coronary artery. At pre occlusion and 1, 5, 15, 30, 60 min after left anterior descending artery (LAD) occlusion , heart rate(HR) and mean arterial pressure (MAP) were recorded . The activity of creatine kinase (CK) and content of nitric oxide (NO) in blood were measured with spectrometer. Results After LAD occlusion , HR, MAP were significantly increased (P0.05 orP0.01) in AMI rats after MT administration at the dosage of 5 mg/kg, 10 mg/kg. At 15 min after LAD occlusion. The CK activity was significantly reduced in AMI rats after MT administration at the dosage of 5 mg/kg, 10 mg/kg (P0.01). the NO content was significantly increased in AMI rats after MT administration at the dosage of 2.5 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg (P0.05 or P0.01). Conclusion Intravenous matrine can protect acute myocardial ischemic injury in rats.Key words：matrine; acute myocardial ischemia; creatine kinase; nitric oxide实验研究证明，苦参碱在抗心率失常方面有很好的作用1。本实验采用结扎左冠状动脉前降支的方法，制备大鼠急性心肌缺血模型，探讨苦参碱对大鼠急性心肌缺血性损伤的保护作用。1 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 药品:苦参碱由宁夏紫荆花药业股份有限公司提供,批号:80041122；乌拉坦(氨基甲酸乙脂)购于中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号:2004102；NO试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号：20060213；肌酸激酶试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号：20060118。1.1.2 动物: 健康成年雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠，清洁级，体重250300g,由宁夏医学院实验动物中心提供。1.1.3 仪器:BL-420四道生物机能实验系统，成都泰盟科技有限公司产品。1.2 实验方法 将SD大鼠随机分为7组，每组8只，分别为正常对照组、假手术组、模型组、硝酸甘油组、苦参碱2.5、5、10mg/kg剂量组。按分组处理大鼠后，应用左冠状动脉前降支（LAD）结扎法制备大鼠急性心肌缺血模型2。应用BL-420生物机能实验系统记录结扎前、结扎后1、5、15、30、60min大鼠心率（HR）、平均动脉血压（MAP）。结扎大鼠左冠状动脉前降支3h后，经股静脉抽血，室温静置30min,3000r/min离心15min,取上清70冻存备用，应用分光光度计法检测血清中CK（肌酸激酶）活性和NO含量。1.3 统计学方法：结果以（s）表示,采用SPSS 11.5统计软件对各组参数进行单因素方差分析。以P0.05为有统计学意义。2 结果 与对照组和假手术组比较，左冠状动脉前降支结扎后1、5、15、30、60min，模型组大鼠HR、MAP明显降低(P0.05或P0.01)；与模型组比较，左冠状动脉前降支结扎后5min，苦参碱10mg/kg剂量组大鼠 HR、MAP明显升高(P0.05)；与模型组比较，左冠状动脉前降支结扎后15min，苦参碱5、10mg/kg剂量组大鼠 HR、MAP明显升高(P0.05或P0.01)；与模型组比较，左冠状动脉前降支结扎后30、60min，苦参碱10mg/kg剂量组大鼠 MAP明显升高(P0.05)；与模型组比较，静脉注射苦参碱5、10mg/kg，可降低急性心肌缺血大鼠血清CK活性（P0.05或P0.01）；与模型组比较，静脉注射苦参碱2.5、5、10mg/kg，可增加急性心肌缺血大鼠血清NO含量（P0.05或P0.01）,见表1、2、3。表1 苦参碱对急性心肌缺血大鼠HR的影响(略)表2 苦参碱对急性心肌缺血大鼠MAP的影响(略)表3 苦参碱对急性心肌缺血大鼠血清CK活性和NO含量的影响(略)3 讨论 冠状动脉结扎后可引起不可逆的心肌细胞损伤和组织坏死，导致心脏泵血功能减弱并诱发致命性心率失常3。在以往的研究中已证实苦参碱在对抗心律失常方面有显著作用1。本实验主要从苦参碱对急性心肌缺血大鼠HR和MAP，血清CK活性和NO含量等方面的影响，探讨其对缺血心肌损伤的保护作用。 血流动力学的变化在冠心病心绞痛的发病机制中起重要作用4，冠状动脉结扎后35s内心室的舒张和收缩速度减慢，数秒钟后心电图ST段抬高，心室舒张末压增加，动脉收缩压降低。本研究提示静脉注射苦参碱5、10mg/kg均可改善急性心肌缺血大鼠HR和MAP，此作用在左冠状动脉前降支结扎后15min最明显。本室研究还表明静脉注射苦参碱可改善急性心肌缺血大鼠的心功能5，提示静脉注射苦参碱可通过改善急性心肌缺血大鼠血流动力学的变化，达到保护缺血心肌的作用。 NO是通过组织细胞中存在的一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸(L-arg)产生。NO在心肌缺血损伤中有着十分重要的作用，它不仅参与对冠脉血管舒缩的调控，维持有效的冠脉循环血流，而且可通过抗氧自由基、减轻钙超载等作用参与对缺血心肌的保护作用6。Soos P等7研究显示，心肌缺血早期血浆NO含量明显下降。本实验结果表明静脉注射苦参碱可增加急性心肌缺血大鼠血清NO含量。尹永英等8通过检测心肌组织匀浆中NO含量,分析氧化苦参碱对心肌缺血损伤后生化指标的影响，得到类似结果。 急性心肌梗死后，心肌细胞中特有的某些小分子和大分子蛋白质可从心肌细胞逸出进入血液循环，从而成为血液中心肌坏死的标志物。心肌缺血后酶的释放反映了细胞不可逆损伤的开始，进而可发展到细胞破裂，线粒体断裂，肌原纤维不完整，细胞溶解，最终导致细胞死亡和组织坏死。因此，酶的漏出可认为是细胞完全坏死前的改变，心肌酶学标志物是诊断急性心肌梗死，监测其进程与评价预后