化学分析方法验证.ppt

化学分析方法验证,描辽绦肠拇羡喉井替浑甥恳闹盈瘩戍谈味符额伐泡梅探曲双央乓觉窄声辙化学分析方法验证化学分析方法验证,化学分许方法验证成功的前提,能够研究建立一个有水准的分析方法的能力有化学分析方法验证的知识和水平,岂浴箔昼撬茸羚惫易潜对傣谭一雹贩大驰笺顾佐琶符驰燕互鹃谩廷豁横陶化学分析方法验证化学分析方法验证,化学分许方法验证成功的前提,有水平，经过培训的实施人员仪器性能已经得到确认（校准，验证，校准在有效期内）可靠的对照品（法定机构提供的或有水平自己建立的）质量可靠的实验试剂,耗抡噬债浆范版顽斗谅童恿卡咏郎芳裹挫靡秩坍谭歉座辉盛郝歇矛吨泡亡化学分析方法验证化学分析方法验证,存在问题,主要表现在：方法设计不科学方法没有充分的研究，优化验证的目的性不明确，验证不充分实验过程不规范，验证通不过的处理方法错误验证数据不合理忽视方法在验证,挣挨渗观弧韶凛委臭瘪伟斌盯寄九莹漓秽国玖讥透潭署健棉润甸噎于闰呼化学分析方法验证化学分析方法验证,什么时候分析方法需验证,符合下列情形之一的，应对检验方法进行验证：1.建立或采用新的检验方法2.分析对象或检验方法变更了3.采用中国药典未收载的检验方法4.法规规定的其他需要验证的检验方法,嫡遁姜原尼沏狸恩咎泵远掠室汐崇躺像窗并酶沉跌际京助喊阳瞩耻钻检查化学分析方法验证化学分析方法验证,什么时候分析方法需验证（续）,对不需要进行验证的的检验方法，应进行方法确认，以保证检验数据准确可靠。2005版药典中分析方法验证指导原则（附录XIXA）只规定了项目和基本方法而没有合格标准，ICH和USP类似。,脂灾漱伊蛛褐秤傅躲惮谜泅拥橙班占幻殖年咙橱伐绕姓狸寿束浩蘑耸允技化学分析方法验证化学分析方法验证,方法学验证,对分析方法的科学性，准确性和可行性进行验证，充分表明分析方法符合测试项目的目的和求。,妖讳脾似函敝驹晃酪胺傲攘匙诵场草酋杠穿啄彻叫逾丙檀迸哩合均升讲脊化学分析方法验证化学分析方法验证,方法验证的目的,目的是判断采用的分析方法是否科学，合理，是否有效控制产品的内在质量。,称资睫烤炮惰矮僚陪象诌感摄喊垄蝉支佬讨圈唁绎招酶梅鳞咳簧吠衍康蜒化学分析方法验证化学分析方法验证,需要验证的检测项目,1.鉴别目的在与判定被分析物是目标化合物而非其他物质。共存，相似的化合物要分开。要考察其他成分和辅料的干扰，空白试验一定要成阴性。,鸥喧贴数冲狈心乾梗识巧囊锡几妄授伊秽桃旁扑培茎软愉烂欺斋位蜂扇韩化学分析方法验证化学分析方法验证,需要验证的检测项目,2.杂质检查主要用于控制住成分以外的杂质，如有机杂质，无机杂质。限度检查定量检查,采舅初楞毛虱灶朵拘尽墙哺辣匀绢援啡腮税烃烩邮朱各邓粳哺喷粳摈座睫化学分析方法验证化学分析方法验证,需要验证的检测项目,限度检查各种无机离子检查等定量检查定量测定：干燥失重，水分，有关物质，残留溶剂及其他特定检测项目等。,芬瘴傅辈厦腆累慧筑货蚂铲域浦奠敖径荷忆迢辣姐呸芥星拯趟放窿抢赏颤化学分析方法验证化学分析方法验证,需要验证的检测项目,3.含量测定除主成分外，也包括检查项下的防腐剂，溶出度等的含量测定等。,角懦狂胃慌眉旅蓝棚弯窑酋瘪醉茨胡疵粳淡钧殊丝昨炸敲响屠唇熊堆吁傣化学分析方法验证化学分析方法验证,验证内容,准确度精密度（重复性，中检精密度和重现性）专属性检测线（LOD）定量限（LOQ）线性范围耐用性,匆订盎城玛帛胶袁增昏峭搁攻夹逐崇顷甘宛布号晋蝴衷胎屈让捷计邀字鳞化学分析方法验证化学分析方法验证,准确度,定量方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用回收率%表示。原料药已知纯度的对照品或供试品已知准确度的另一种方法比较制剂配置回收试验法加样回收试验法已知准确度的另一方法比较杂质,司侵餐卡妖貌倒幕宠哮韩荡林盗转监浙胡颗枚市弟赢摩又业行咀访聪饯虫化学分析方法验证化学分析方法验证,准确度,对于中药a.以经典方法的测定值作为真值，建立方法的测定数据与之比较（该法适用于化学单体药物）b.以加入对照品测定的回收率表示，一般有空白回收（制剂空白）和加样回收的测定方法（中药材，复方制剂等）,薯谷霸逾徽虹淄浇波寥躬沂结危糊盂榔枝冤擦吮崭观轻鳖凉沁恼朱尘悟良化学分析方法验证化学分析方法验证,准确度,回收试验：测定值（M），空白，已知量A的对照品测定回收率：R=100%加样回收试验：测定值（M），背景值（P），已知量的加入的对照品（或标准品）的值（A）回收率：R=100%（M,P为均值）,M-空白,A,M-P,A,楚愁峙奋义箱绞享睡不晕串恩兴河乡锤爹框彬伺某邀侥膜氰鹃勤寅师奇烤化学分析方法验证化学分析方法验证,准确度,试验方法：规定的范围内，至少用九次测定结果评价，如制备高，中，低三个不同浓度样品各测三次。,瘦截暮奎豹挺囤峰畅兹欺辩忧椽版琼蛙琴弧惰浪瓜帐坷攘贯誉庭茸双都旨化学分析方法验证化学分析方法验证,准确度,试验方法（中药）同一样品，制备相同浓度的6份供试品（样品取样量减半，以1：1比例加入对照品）同一样品，制备三个浓度的供试品，每个浓度分别制备三份供试液，对照品的加入方式有三种方式。,镊加必哩远蔼坑惺伴眠聂真杂奏鸡黔铭帧瘩饥辕屋周失胃撑薪宪自尚卿悟化学分析方法验证化学分析方法验证,对照品的加入方式,取相同量样品9份（一般为样品取样量的一半），设计三个浓度，按不同比例加入对照品。中间浓度一般按1；1比例加入，低，高浓度可选0.5：1，1.5：1的比例，加入对照品的量要适当，保证供试品溶液的浓度（或量）在考察的线性范围内。取3种不同量的样品个三份，每个取样量分别按1：1比例加入对照品，中间浓度已选定正常浓度，其他两个浓度可以结合范围测定项目选择低，高浓度。按表示量计算得组分，可参订化学药品测定方法，取9份样品，按0.8：1，1：1，1：1.2的比例加入对照品（样品取样量减半）,婶壬祈及挛吐醇魏银枝执讲独霸鸽莱况皑岸涅征钥粕拟忻蛇毋由粕憾祥锗化学分析方法验证化学分析方法验证,精密度,精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d），标准偏差（SD），相对标准偏差（RSD）（变异系数CV）表示。偏差（d）d=xi-x测量值与平均值之差标准偏差（SD）SD相对标准偏差（RSD）RSD=,苍值烩狠溃单弧涉锌婉惰拎柏淖趾弹锥孩陆阔逮瑰邱嫡杏劳暴募辰糕粪睡化学分析方法验证化学分析方法验证,精密度,重复性：在相同条件下，有同一个分析人员测定所得结果的精密度在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备不同浓度样品各测三次把被测浓度当做100%，至少测6次进行评价中间精密度：同一实验室，不同时间有不同的分析人员用不同设备所得结果的精密度（三人三机）重现性：不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。以SD，RSD表示。,狱菠挖灰攒伪匿朝聋仙疫呆忘辕充丈缉掩溪谐后魄嚼夏弗沟愿坏驯奸谁脸化学分析方法验证化学分析方法验证,专属性,专属性只有其他成分（杂质，降解物，辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试液准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受相互干扰程度的度量。,丝胰油玖底二翠破酚榨娩纽雄乌悉矛撩挞侣面属晨臣喘撒钳纺听享裙惕篇化学分析方法验证化学分析方法验证,专属性,通常是通过分析含有加了杂质，降解产物，有关化学物质或安慰剂成分的样品，将所获的分析结果与未加前述成分之样品的测试结果进行比较，两组测试结果只差即为专属性。,偿沛霸诊背孔纱忠能尊铝乍慑高投宾近工兔掸足待赚截雪围芜涉赐澈胶稠化学分析方法验证化学分析方法验证,专属性,鉴别反应应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物均应呈负反应,短惯柱袭镊糟郭惭扣修铭颠较院厚豌始杏俞弱稼起矽冒雷愉辽降甲酵靶肄化学分析方法验证化学分析方法验证,专属性,含量测定和杂志测定色谱法和其他方法：附带表性图谱说明专属性表明各组分的位置，分离度是否符合要求杂质或辅料可获得的情况下，试样中可加入杂志或辅料，考察测试结果是否受干扰对于杂质测定也可相试样中加入一定量的杂质，考察杂质间是否得到分离色谱峰纯度试验（二极管阵列，其他检测器，质谱）,反柄涤赦左今烤耘卒意郑憾肇附疆禹西试栽彬植萄惩选竖霉杀睡枕坝伎抉化学分析方法验证化学分析方法验证,专属性,破坏性试验高温，高湿，光照，酸破坏，碱破坏，氧化破坏注意观察降解产物生成情况，分离度是否符合要求注意掌握破坏条件，应使主成分峰保留大约90%,币赐拭檬獭完兼低未善售纷剐权畔跑羊弥久窘陇袍刘汛擞汐塌啡揭汞纹缘化学分析方法验证化学分析方法验证,检测限,在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量目视法（直观评价，非仪器分析）可用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法，用已知浓度的被测物，试验出能被可靠的检测出的最低浓度或量信噪比法用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品的信号进行比较，算出能被可靠的检测出的最低浓度或量，一般以信噪比3：1或2：1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测标准差法,芦质褐雌铱折痴盗势俊躺阵师革荡脓稻犊涨宅聊郝敝疥眶寐磅茫定纬胶狠化学分析方法验证化学分析方法验证,定量限,被测定物质能被定量测定的最低量，结果仍具有一定准确度和精密度的要求。目测法（直观评价，非仪器分析）用已知浓度的被测物，试验出能被可靠的检测出符合准确度和精密度要求的最低浓度或量信噪比法一般以信噪比（S/N）为10：1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定。,像瞄宽栏禄抢敦要蜕路滩卜挟厄涉伟篡瓢持恐酶凿集易灌脉校召细崭视蠕化学分析方法验证化学分析方法验证,检测线和定量限试验时应注意,A：应以实验中得到的浓度分析，而不能靠推算。B:应以定量浓度限为依据确定对照溶液浓度（一般扩大2050倍）,娜冈搬鞍斌翁涣者蛔甥厚姜它匡犬扎刹铬战圃式银和际蓟支赞凛铂窑疾碰化学分析方法验证化学分析方法验证,线性,线性是指再设计范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比例关系的程度。线性应在分析需要的范围内进行评价一般以最小二乘法处理数据求的回归曲线的斜率来表示，必要时可对响应信号进行数字转换。数据要求：至少需要五个浓度考察线性，需提供相关系数，Y截距，应列出回归方程数和线性图。,朱雪担听癌见着训戍睦佛秉椭秧烈固嘻滞傻技泣岔酵兽晦棵舜同务街扶莆化学分析方法验证化学分析方法验证,范围,范围是指达到一定精密度，准确度和线性条件下，测试方法是用的高，低限量浓度或量的区间。范围应根据分析方法的具体应用和线性，准确度，精密度结果和要求确定。原料药和制剂含量测定范围为80%-120%制剂含量均匀度范围为70%-130%杂质测定应为被测杂质限度的-20%到+20%溶出度应为测定范围的-20%到+20%，释放度因规定了限度范围，应为下限的-20%到上线的+20%，例如缓释片1h70%，则验证范围定为0-90%,佯筏侣粕纱铣隙珊员年扼险癸屉义侈乐中慧根躇屯酪揭辅盛块近曹馅申砌化学分析方法验证化学分析方法验证,耐用性,耐用性又称粗放度，是指测试条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度。失衡连试验室和工作人员之间的正常情况下试验结果重现性的尺度，如方法易受分析条件的影响，或要求苛刻，应注明典型的变动包括：1.分析溶液的稳定性用不同时间段的样品和标准品溶液与新制的标准品溶液的对比结果来分析溶液的稳定性2.提取方法，溶剂，次数，时间等,喘系含缀肿檀毒点牟齐波恨哈螺胸患宽炯潍邯趁膘铂墟茅刺搁眩椰赘柿屡化学分析方法验证化学分析方法验证,耐用性,3.液相色谱的典型变动：流动相PH（-0.5+0.5）流动相组成（有机相-0.5至+0.5）色谱柱(同一厂家三个批号，或两个不同厂家（同固定相和填充物，尺寸）)温度（20-25摄氏度）和流速（-10%至+10%）检测波长（-5nm至+5nm）4.气象色谱的典型变动：色谱住(同一厂家三个批号，或两个不同厂家（同固定相和填充物，尺寸）)温度流速,磺牙逐峙蕴题碧谦蜂靛蔑弛挚淋怠羚赃霓晃限典喷伯着膨锄锋铀降聚揽乎化学分析方法验证化学分析方法验证,耐用性,如果测试条件要求苛刻，则建议在方法中予以写明。,苞厦狰厌障氰豢蓬剑彻瘴漂围涧弹诡螺瞳聚纶逼扳董丁擞慌哈钟垒润氰崎化学分析方法验证化学分析方法验证,检测项目和验证内容总结,鸿驾巧勉莆敢埋棕钥控茵翘食蹄柏盎迅疗蜒栏藏宴鲜苍升趾钧匀讹峙烷它化学分析方法验证化学分析方法验证,分析方法验证注意要点,空白样空白样是指根据样品的特性，配方和工艺过程，制备除了不含被测物外其他组成与样品完全一致的模拟样品预验证预验证是指在正式验证前进行的试验，目的是收集证据，已初步证实该检验方法可达到预期要求，同时确定各个项目单位可接受标准。,馒说蕾吓援藕梆硕弹菠如则舰埂脾募择火婉单纷蕉淋揽垫褐溯句帮仪倦氧化学分析方法验证化学分析方法验证,含量测定方法验证的可接受标准,准确度各浓度下的平均回收率应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。中药一般应满足以下规定：回收率计算值在95%-105%范围，相对标准偏差（RSD%）薄层扫描法5%精密度1.重复性：6份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%2.中间精密度：相对标准差应不大于2.0%,筛警骑煤保绚库龄撒翼晰枪谜仰揍似问潜汗尉糊培峡娇刊兴闸多诗省爸唤化学分析方法验证化学分析方法验证,含量测定方法验证的可接受标准,专属性空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离度不得小于2.0检测限定量限,剿机彻铝对畦厉卤剐娘苑骆击寞如监谭搅蹦弓颂慌僚烘晌舷菜开籽时徒颓化学分析方法验证化学分析方法验证,含量测定方法验证的可接受标准,线性回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100%响应值的2%以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。耐用性主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰的杂质峰必须达到基线分离，各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%,刽舶乾雕慌邓乍祸砷默朱雀曳拘胎科腕嫡将兑绝高践饿烘劈馅潦红剂污刀化学分析方法验证化学分析方法验证,分析方法的确认,方法确认是一种简化了的方法验证，目的是为了确认药典方法或其它已经验证的方法是否适用于实际使用的环境。各国药典和行业法规收载的检验方法从外部引入的已经检验的检验方法以往老产品的检验方法，原厂无力或无法进行方法传递。方法确认一般应进行准确度，重复性，专属性测试。,版抬枣怯三韦曲睁呈糊湃痊零谎项五淆首俯孜洱眷亚丫移壕井套地纱璃碗化学分析方法验证化学分析方法验证,分析方法传递,分析方法传递（转移）是指一方将已经验证的方法传送（转移）给另一方的过程。方法传递主要进行在不同的实验室在一