（外科学专业论文）mmp6及vegfc在肝细胞肝癌中的表达及相关性研究.pdf

目录 1 i i l l l1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 t l lttlllll ll i t i i i i i i i l 。1 , y 19 017 2 0 中文摘要1 英文摘要3 研究论文m m p 一9 及v e g f c 在肝细胞肝癌中的表达及相关性研究 。前言5 日l j 舌。) 材料与方法6 结果9 附图1 1 附表1 7 讨 仑2 0 结论2 4 参考文献一一2 5 综述m m p 9 及v e g f c 在肝细胞肝癌中的表达及相关性研究2 8 致谢4 0 个人简历4 1 中文摘要 m m p 。9 及v e g f c 在肝细胞肝癌中的表达及相关性研究 摘要 目的：据w h o 统计，原发性肝癌是中国最常见的恶性肿瘤之一，年 发病率超过3 7 1 0 万，为全球之首，最为严重的是，肝癌的发生率仍在持 续上升。尽管现代诊断及治疗技术有了飞速发展，但是肝癌的预后仍就不 容乐观。其中，最主要的原因就是肝内的侵袭性播散、肝外的转移，造成 肝癌切除困难以及术后复发，所以寻找准确评估肝癌原发灶转移能力和预 后的肿瘤标记物，对肝癌的诊断、治疗具有重大意义。有研究表明m m p 9 及v e g f c 在肝细胞肝癌的发生发展过程中扮演重要角色，可能和肝癌 的进程迅速有关。但二者在肝癌中的联合表达情况，以及它们与临床相关 指标的联系尚无报道。本课题通过对m m p 一9 和v e g f c 在肝癌中的表达 情况的研究，近而探讨m m p 9 和v e g f c 在肝癌发生、发展中的作用及 其意义。 方法：收集在哈励逊国际和平医院肝胆外科2 0 0 9 年1 月2 0 1 0 年1 2 月4 0 例肝癌患者的手术切除癌组织、对应的癌旁组织以及相应的临床资 料，l o 例肝外伤肝组织作为对照组，所有患者术前均未进行任何抗癌治 疗。采用免疫组化( s p ) 法检测4 0 例h c c 组织及相应癌旁组织中m m p 9 、 v e g f c 的表达情况。应用s p s s17 0 统计软件进行统计学分析，m m p 9 及v e g f c 的表达，以及其与肝癌的临床病理因素之间的关系应用x2 检 验，m m p 9 和v e g f c 的相互关系应用s p e a r m a n s 相关性分析，p 0 0 5 认为差别有统计学意义。 结果： 1 免疫组化检测m m p 9 蛋白在肝癌中的阳性率为6 5 o ( 2 6 4 0 ) ，明 显高于癌旁( 2 0 o ，8 4 0 ) 及对照组( 2 0 ，2 1 0 ) ，癌组织与癌旁组织、癌 组织与对照组比较均有显著性差异( ( p o 0 1 ，p 0 0 5 ) 。并且m m p 9 的表达 与静脉癌栓形成、t n m 分期、肝内外转移明显有关( p o 0 5 ) 。 2 免疫组化检测v e g f c 蛋白在肝癌中的阳性率为6 0 o ( 2 4 4 0 ) ， 中文摘要 明显高于癌旁( 1 7 5 ，7 4 0 ) 及对照组( 1 0 ，1 l o ) ，癌组织与癌旁组织、 癌组织与对照组比较均有显著性差异( p o 0 1 ，p 0 0 1 ) 。肝癌中v e g f c 蛋 白阳性表达与静脉癌栓形成、肝内外转移、t n m 分期、肿瘤大小明显有 关( p 0 0 5 ) 。而在组织学分级、瘤结节多少、是否合并肝硬化、a f p 表 达、有无h b v 感染间未见明显差异。 3m m p 9 和v e g f c 在肝癌组织中的表达水平具有统计学意义 ( p 0 0 1 ) ，并经s p e a r m a n s 相关性分析( p o 0 1 ) ，证明两者表达存在正相 关性。 结论：m m p 9 和v e g f c 的表达与肿瘤侵袭转移的发生有关，可作 为估计预后的指标，对判断肝癌的恶性程度，预测生物学行为具有一定的 临床意义。 关键词：肝细胞肝癌；m m p 9 ；v e g f c ；免疫组化 英文摘要 c l i n i c a ls t u d yo ft h er e l a t i o n s h i pa n de x p r e s s i o no f m m p 一9a n dv e g f ci nh e p a t o c e u u i a rc a r c i n o m a a b s t r a c t o b j e c t i v e ：h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a ( h c c ) i so n eo ft h em o s tc o m m o n m a l i g n a n tt u m o r sw i t ht h ei n c r e a s i n gi n c i d e n c er a t ei no u rc o u n t r y ，a n dt h e a n n u a li n c i d e n c ei sm o r et h a n37 10 0 ，0 0 0 a l t h o u g hm o d e mt r e a t m e n t t e c h n o l o g yh a sb e e ni n c r e a s e dg r e a t l y , l i v e rc a n c e rp r o g n o s i si ss t i l ln o tv e r y o p t i m i s t i c o n eo ft h em a i nr e a s o n si si n t r a h e p a t i ci n v a s i v ed i s s e m i n a t e da n d d i s t a n tm e t a s t a s e s ，w h i c hm a k si td i f f i c u l tt or e s e c tl i v e rc a n c e ra n de a s yt o r e c u r r e n c e s ol o o k i n gf o ra c c u r a t et u m o rm a r k e r st oe v a l u a t et h et r a n s f e r e n c e a b i l i t yo fp r i m a r yl i v e rc a n c e ra n dp r o g n o s i si so fg r e a ti m p o r t a n c ef o rl i v e r c a n c e rd i a g n o s i sa n dt r e a t m e n t m m p 一9a n dv e g f - ch a v eb e e nr e p o r t e dt o p l a y a ni m p o r t a n tr o l e i nt h eo c c u r r e n c ea n d d e v e l o p m e n tp r o c e s s o f h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a t h i sm a yb er e l a t e dw i t ht h er a p i d l yp r o c e s so fl i v e r c a n c e r b u tt h ec o e x p r e s s i o n ，a sw e l la st h e i rc l i n i c a la n dp a t h o l o g i c a la n d r e l e v a n ti n d i c a t o r so fc o n t a c to ft h et w oi n d i c a t o r sh a v en ob e e nr e p o r t e d i n t h isw o r k ，t h ee x p r e s s i o no fm i v i p 一9a n dv e g f ci nl i v e rc a n c e rw e r e s t u d i e d ，a n dt h e i rf u n c t i o na n ds i g n i f i c a n c ea n a l y s i so fm m p 一9a n dv e g f ci nt h eo c c u r a n c ea n dd e v e l o p m e n to fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m aw e r e e x p l o r e d m e t h o d s ：4 0c a s e so fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a p a t i e n t ss u r g i c a le x c i s i o n o fs p e c i m e n sa n dt h ec o r r e s p o n d i n gc a n c e ra d j a c e n tt i s s u ea n dt h ep a t i e n t s c l i n i c a li n f o r m a t i o n ，10c a s e so fl i v e rt r a u m ap a t i e n t s t i s s u ea sc o n t r o lg r o u p w e r ec o l l e c t e di nt h e d e p a r t m e n t o fl i v e ra n dg a l l s u r g e r yo fh a r r i s o n i n t e r n a t i o n a lp e a c eh o s p i t a lo fh e n g s h u ic i t yf r o mj a n 2 0 0 9t od e c2 010 a l l p a t i e n t s w e r en o tc o n d u c t a n yp r e o p e r a t i v e a n t i - c a n c e r t h e r a p y ； i m m u n o h i s t o c h e m i s t r ys pm e t h o dw a su s e dt oe x a m i n et h ee x p r e s s i o no f m m p 9a n dv e g f ci n4 0c a s e so fh c ct i s s u ea n dn o n c a n c e r o u s a d j a c e n tl i v e rt i s s u e t h ed a t aw e r ea n a l y z e db ys p s s 17 0 ，s i g n i f i c a n c ew a s 3 英文摘要 s e ta tp 0 0 5 t h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nt h ed e g r e eu s es p e a r m a n sc o r r e l a t i o n a n a l y s i s r e s u l t s ： 1 i m m u n o h i s t o c h e m i s t r yr e v e a l e dt h a t ，t h ep o s i t i v e e x p r e s s i o n o f m m p - 9i nh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a ( 6 5 o ，2 6 4 0 ) w e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h o s eo f a d j a c e n tl i v e rt i s s u e s ( 2 0 o ，8 4 0 ) a n dt h ec o n t r o lg r o u p ( 2 0 o ， 2 1 0 ) ( p o 0 1 ，p 0 0 5 ，r e p e c t i v e l y ) t h e r e w e r es i g n i f i c a n t r e l a t i o n s h i p s b e t w e e nm m p 一9w i t hv e n o u st u m o re m b o l if o r m a t i o na n dl i v e ri n s i d ea n d o u t s i d et r a n s f e r ( p o 0 5 ) 2 t h ep o s i t i v e e x p r e s s i o no fv e g f ci nh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a ( 6 0 o ，2 4 4 0 ) w e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h o s eo fa d ja c e n tl i v e rt i s s u e s ( 1 7 5 ，7 4 0 ) a n d t h ec o n t r o l g r o u p ( 1 0 o ，1 1 0 ) ( p o 0 1 ，p 0 0 1 ， r e s p e c t i v e l y ) t h e r ew e r es i g n i f i c a n tr e l a t i o n s h i p sb e t w e e nv e g f cw i t h v e n o u st u m o re m b o l if o r m a t i o n ，t u m o rs i z ea n dl i v e ri n s i d ea n do u t s i d e t r a n s f e r ( p o 0 5 ) 3 t h e r ew a sas i g n i f i c a n td i f f e r e n c ei nt h ee x p r e s s i o nl e v e li nh c c b e t w e e nl v i m p - 9a n dv e g f c ( p 6 6 为4 。将和两项评分相加， 4 分为阳性( + ) 。 6 统计学处理：应用s p s s l 7 0 统计软件进行统计分析，计数资料采用x 2 检验，以p 0 0 5 表示差异具有统计学意义。变量间关系的密切程度用 s p e a r m a n s 相关分析，以p 0 01 表示差异有统计学意义。 结果 1 肝癌中m m p 9 蛋白的表达情况 m m p 9 蛋白阳性细胞定位于肿瘤细胞胞浆内和( 或) 胞膜内，呈棕 黄色或棕褐色颗粒状改变。本组肝癌高倾向转移组1 9 例标本中，1 6 例有 m m p 9 蛋白阳性表达，占8 4 2 ( 1 6 1 9 ) ，肝癌低转移倾向组2 1 例标本中， 7 例有m m p 9 蛋白阳性表达，占3 3 3 ( 7 2 1 ) 。两组比较差异有统计学 意义( x2 = 1 0 5 6 6 ，p 0 0 1 ) 。本组肝癌t n m 分期i i i 期组2 1 例标本 中，1 3 例有m m p 9 蛋白阳性表达，占6 1 9 ( 1 3 2 1 ) ，肝癌t n m 分期i i i 期组1 9 例标本中，1 8 例有m m p 9 蛋白阳性表达，占9 4 7 ( 1 8 1 9 ) 。两 组比较差异有统计学意义( x2 = 4 4 2 7 ，p o 0 5 ) ( t a b l e 1 ) 。 2 肝癌中v e g f c 的表达情况 v e g f c 阳性信号位于癌细胞胞浆和( 或) 胞膜内，小条索状或散在 分布，在癌间质中也有少量表达，某些血管和淋巴管内皮细胞偶见阳性表 达，为棕黄色云雾状或粗细不一颗粒。本组肝癌高转移倾向组1 9 例标本 中，1 8 例标本m m p 9 蛋白阳性表达，占9 4 7 ( 1 8 1 9 ) ，肝细胞癌低转移 倾向组2 1 例标本中，1 3 例标本中v e g f c 蛋白阳性表达，占6 1 9 ( 1 3 2 1 ) ， 两组比较差异有统计学意义( x2 = 4 4 2 7 ，p 0 0 5 ) 。本组肝癌t n m 分期 i i i 期组2 1 例标本中，7 例有v e g f c 蛋白阳性表达，占3 3 3 ( 7 2 1 ) ， 肝癌t n m 分期i i i 期组1 9 例标本中，18 例有v e g f c 蛋白阳性表达，占 研究论文 9 4 7 ( 1 8 1 9 ) 。两组比较差异有统计学意义( x2 = 1 0 5 6 6 ，p _ 5 c m2 3 例标本中，2 1 例标本中有蛋白呈阳性表达，占 9 1 3 ( 2 1 2 3 ) ，直径 5 c m17 例标本中，1 0 例标本中有v e g f c 蛋白呈 阳性表达，占5 8 5 ( 1 0 2 7 ) ，两组比较差异有统计学意义( x2 = 4 1 9 8 ，p o 0 5 ) ( t a b l e 2 ) 。 3 癌组织、癌旁组织、正常的肝脏组织中m m p 9 和v e f c 表达分析 免疫组化显示m m p 9 在肝癌组织中表达为5 7 5 ( 2 3 4 0 ) ，而在其癌 旁组织中的表达为2 0 0 ( 8 4 0 ) ，在统计学上有明显差异性( x ：= 1 1 8 4 ， p 0 0 1 ) 。正常的肝脏组织中m m p 9 表达为2 0 0 ( 2 1 0 ) ，在统计学上有 明显差异性( x 2 = 4 5 0 ，p 0 0 5 ) ( t a b l e 3 ) 。v e g f c 在肝癌组织的表达率为 7 7 5 ( 3 1 4 0 ) ，而在癌旁组织中的表达为1 7 5 ( 7 4 0 ) ，在统计学上有明显 差异性( x z = 2 8 8 7 ，p 0 0 1 ) 。正常的肝脏组织中v e g f c 表达为1 0 0 ( 1 1 0 ) ， 在统计学上有明显差异性( x ：= 1 3 0 3 ，p o0577 多结节 9 728 肿瘤大小 +一 _ 5 5 c m c m2 】3 71 9 4 9 6 0 ；琵 o 2 5 1 o058 5 2 o05963 6 6 无 7 a f p + - 器薏 3 42 1 1 3 6 1 鬟 o 7 2 4 o05624 3 3 阴性 3 h b s a g + 器藿 3 52 2 1 3 6 2 盏 1 7 6 8 o055 142 0 阴性 0 t n m 分期 + - i i i 期 2 11 38 6 1 9 誓4 4 2 7 o 0 5 i i i 期 1 9 1 819 4 7 侵袭转移 +一 寰墓碧 2 1 9 1 1 7 81 1 49 4 3 3 考笺1 0 5 6 6 o 0 5 4 1 9 8 0 0 5 1 4 9 0 0 5 2 4 7 8 0 0 5 1 0 5 6 6 0 0 1 4 4 2 7 0 0 5 1 8 - 8 1 6 3 - 2 7 - 5 4 6 3 - 6 3+加+筋6+扒加+拍5+勰3+凹2 勰坦 孔9 ” ”9 6 弘5 扒侈 侈扒 研究论文 t a b l e2t h ee x p r e s i o no fm m 一9i nn o r m a ll i v e rt i s s u e ，a d j a c e n tl i v e rt i s s u e s o f h c ca n dh c c 分组 1 1 m m p - 9 阳性率( ) x 2p 值 分组 i s l = l 性翠( )值 癌组织 4 02 3 1 75 7 5 癌旁组织 4 0 83 22 0 o 1 1 8 4 0 9 1 对照组 1 0 282 0 0 4 5 0 o 0 5 t a b l e4t h ee x p r e s i o no fv e g f ci nn o r m a ll i v e rt i s s u e ，a d ja c e n tl i v e rt i s s u e s o f h c ca n dh c c 分组 n v g 阡5 号譬亍x 2 p 值 癌组织 4 0 3 19 7 7 5 癌旁组织 4 0 73 3 1 7 5 2 8 8 7 o 0 1 对照组! q1 21 q ：q 墅 ! ! ：q i三q ：q ! - _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ - _ _ _ - - _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ - - 一一 r = 0 5 0 6 p 0 o1 1 9 研究论文 讨论 肝细胞肝癌( h c c ) 是世界常见恶性肿瘤之一，位居恶性肿瘤死亡率的 第7 位( 男性) 第8 位( 女性) 。我国是世界上肝癌的高发区之一，其死亡 率仅次于胃癌居第2 位。不容忽视的是近年来，肝细胞肝癌发病率和死亡 率呈逐年上升趋势。尽管近3 0 年来我国肝癌的防治工作已取得很大进展， 治疗效果得到明显提高，但肝癌治疗后复发仍是一个急需解决的问题，肝 癌切除术后5 年内复发率仍高达6 0 以上，即使是预后较好的小肝癌其5 年复发率也高居4 0 5 0 ，所以术后复发已成为影响肝癌患者长期生存 的关键。肝癌侵袭外周肝组织，在远处器官的转移是多步骤、多因素参与 的复杂的癌细胞与宿主之间，以及细胞外基质相互作用的过程。因此，寻 找准确评估肝癌原发灶转移能力和预后的肿瘤标记物，对肝癌的诊断、制 定合理有效地治疗方案、提高患者生存率具有重大意义。但是肝癌的发生、 发展和转移的机制至今尚未完全阐明，有待于进一步研究。 在肝癌组织内，肿瘤细胞、成纤维细胞、炎性细胞、内皮细胞、巨噬 细胞、基质细胞等均可以自分泌或旁分泌的形式产生血管生成因子，作用 于内皮细胞调节血管形成，包括诱导血管新生的因子v e g f 、b f g f 、h g f 诱导淋巴生成的因子v e g f c ，v e g f d ，参与粘附的分子v c a m 1 、 i c a m 1 、c d 4 4 l a m i n 受体，溶基质和基底膜的金属蛋白酶( m m p s ) 等 4 1 。 肝癌的生长、浸润和转移途径中最主要的是通过血道转移和淋巴道转移。 肝癌的转移与肿瘤血管发生有密切关系，肝癌转移过程中的血管生成是一 个多因素、多因子参与的连锁反应过程，其中包括血管生长因子的调控、 细胞外基的降解与在塑、内皮细胞的激活、增殖、迁移、以及微血管腔的 形成等复杂过程。肝癌细胞周围血窦丰富，生长活跃，侵袭性强，极易侵 袭血管和包膜，导致肝内转移和肝外转移。肝癌侵入门静脉系统自血道进 入肝内导致肝内转移，常常形成多个“卫星结节。肿瘤细胞通过趋化、溶 解基质和基底膜等一系列步骤侵入门静脉系统在肝内播散，到达一定部位 后通过诱导血管形成新的病灶。对于血管生成的机理，h a n a h a n n 巧6 1 等 人提出血管生长因子分泌增加，或抑制因子减少的理论。肝细胞癌除了经 过血道转移，还通过淋巴道转移。肝癌组织有大量淋巴管的增生及扩张， 为肝癌淋巴道转移提供了有力条件。另外大多数瘤细胞首先转移到肝门处 淋巴结，沿肝门淋巴结转移至他出。淋巴管因其结构和功能的特征，不仅 研究论文 参与维持肿瘤的生长，而且是肝癌瘤细胞扩散的主要途径。目前发现 m m p 9 及v e g f c 的表达与h c c 门静脉癌栓、肝门淋巴结转移和复发有 关。提示m m p 9 及v e g f c 的表达与血管浸润、淋巴管浸润和淋巴结转 移有关，但目前关于m m p 9 及v e g f c 致血管及淋巴管增生及浸润的机 制，以及其相互作用还不十分清楚。本文通过免疫组化方法检测m m p 9 及v e g f c 在肝癌中的表达情况，分析其在肝癌发展、浸润和转移中的 作用，为肝癌的诊断、治疗及预后判断提供理论指导依据。 1m l v l p 9 在肝癌中的表达特点和意义 m m p s 是一组重要的具有许多共同生化性质的可降解细胞外基质的 蛋白水解酶酶，因含有金属离子( 锌、钙) 而得名。目前发现至少有1 9 种， 它们的细胞来源不同，所降解的底物亦不相同。在正常稳定状态组织中， m m p s 表达量极少，而在炎性细胞因子、激素、生长因子刺激下表达量上 升，与人体的多种生理及病理过程有关，如炎症、胚胎发育、血管生成、肿 瘤的浸润转移等 1 ，其中m m p 9 属于明胶酶类( 明胶酶b ) ，因能降解基底膜 和多种细胞外基质成分而倍受关注。 m m p 9 是i v i v p s 中分子量最大的成员，也是被研究较多的胶原酶， 是由w i l h e l m 首次在s v 4 0 转化的人胚肺纤维细胞和正常人巨噬细胞证实 其分泌并鉴定出完整的基因序列。m m p 9 以酶原形式分泌，被激活后主要 降解和破坏明胶、基底膜胶原( i v 型胶原) 、v 、i x 型胶原，然后肿 瘤细胞沿着缺失的基膜向周围浸润，最终导致肿瘤的侵袭和转移8 1 。结构 和功能上具有以下特点9 1 ：含有氨基末端的前肤序列，可被裂解为不可 逆的活性酶；催化机制主要在活性中心的锌；蛋白酶以酶原形式分泌， 酶原能被蛋白酶或有机汞活化激活；属于钙依赖性中性蛋白酶家族； 其活性能被m m p 的抑制物t i m p ( 组织型基质金属蛋白酶抑n 齐i j ) 抑制。 日本学者a r i l 等仉1 2 1 用免疫组化检测肝癌细胞中和肿瘤组织的边缘 部分中的m i 、佃9 蛋白表达，结果发现其免疫活性较强，尤其是在后者中， 提示脚9 参与肝癌的浸润和扩散过程。国内研究表明t 1 3 1 在伴肝内转 移的病例中，l v i m p 一9 的阳性率高达7 5 o ，与不伴肝内转移的病例相比 差异有统计学意义。并且发现肝癌术后五年生存率m m p 一9 阴性组明显高 于阳性组，差异据有显著性。m a a t t am 等4 1 研究发现，在肝癌患者血 浆中m l v i p 9 的表达水平也有明显增高，尤其在伴有门脉侵犯的患者中明 研究论文 显，但其表达水平与肿瘤大小、a f p 、组织分级程度水平均无明显相关性， 通过有效治疗后血浆中m m p 9 的表达水平也无显著改变。s h i r a b e 等们 的研究发现m m p 9 表达阳性的患者淋巴结的转移更为常见，说明m m p 一9 的表达和淋巴结转移及不良预后存在着明显的正相关。h a y a s a k a 等1 以 酶免疫分析法测定了1 0 0 例肝癌，结果说明浸润性肝癌的m m p 9 浓度明显 高于无浸润性的肝癌，其浓度的高低与癌细胞的浸润程度呈正比。 本实验运用免疫组织化学方法进一步研究了m m p 9 蛋白在肝癌中的 阳性率为6 5 o ( 2 6 4 0 ) ，明显高于癌旁( 2 0 o ，8 4 0 ) 及对照组( 2 0 ， 2 1 0 ) ，三组比较有显著性差异( ( p o 0 1 ，p o 0 5 ) 。本组肝癌t n m 分期i i i 期组m m p 9 蛋白阳性表达率为 6 1 9 ( 1 3 2 1 ) ，肝癌t n m 分期i i i 期组m m p 9 蛋白阳性表达率为 9 4 7 ( 1 8 1 9 ) 。两组比较差异有统计学意义( p o 0 5 ) 。m m p 9 蛋白表 达在高转移倾向组的阳性率为8 4 2 ( 1 6 1 9 ) ，而在低转移倾向组的阳性率 为3 3 3 ( 7 2 1 ) ，两组比较差异有统计学意义p 0 0 1 ) ，结果表明m m p 一9 蛋白表达与肝癌转移倾向呈正相关，进一步说明了m m p 9 蛋白在肝癌的 浸润、转移过程中发挥着重要作用。 2v e g f c 在肝癌中的表达特点和意义 v e g f ( 血管内皮生长因子) 是恶性肿瘤细胞分泌的一种细胞因子， v e g f 最明显的生物学效应是可以促进肿瘤血管内皮细胞增殖及组织中 新生血管的形成，从而有利于肿瘤的生长及进展。作为血管内皮细胞的特 异性有丝分裂原，v e g f 能促进内皮细胞有丝分裂，诱导血管内皮细胞增 殖和迁移，促进新生血管形成。v e g f 另一生物学功能是增加血管通透性。 这种作用可导致血浆蛋白包括纤维蛋白原外渗，形成纤维素网络，为毛细 血管芽延伸生长提供良好基质。v e g f 的这种渗透活性在血管炎症发生、 肿瘤转移及其他病理发展过程中作用十分重要。 v e g f c 是v e g f 家族中一类特殊的成员，属v e g f 和血小板源性生 长因子( p d g f ) 家族，其受体有v e g f r - 2 和v e g f r 3 两类，被公认为是 针对淋巴管内皮细胞特异性最高、促淋巴管生成和淋巴管内皮增殖作用最 强的有丝分裂原之一1 1 8 1 ，主要通过与受体v e g f r - 2 及v e g f r 3 结合发 挥作用1 1 9 1 。v e g f c 作用机理与v e g f 相似，但较v e g f 作用持久。 研究论文 v e g f c 不仅通过v e g f r 2 诱导肿瘤血管生成，还通过v e g f r 3 诱导肿 瘤外周形成新的淋巴血管，进而促进癌细胞通过淋巴血管转移到淋巴结。 崔晓楠等2 用组织微阵列前瞻性研究v e g f c 在3 7 例肝癌病例中 的表达，发现v e g f c 在伴有肝内侵袭转移的肝癌组织内与不伴肝内侵 袭转移的肝癌组织内的表达二者差异具有统计学意义，提示在肝癌血管转 移过程中v e g f c 起着重要作用。李晓东等眨n 研究发现，在4 3 例肝癌 组织中v e g f c 与c o x 2 的表达研究发现两者的表达具有统计学意义， 呈显著正相关，说明在肝癌的发生、发展过程中两者关系密切，可能c o x 2 促进了v e g f c 的产生，研究其作用机制和作用途径，对了解肝癌的侵 袭、转移和预后具有重要指导意义。此外，v e g f c 还可以通过对淋巴内 皮细胞的激活，促进趋化因子的释放，从而促进肿瘤细胞向淋巴管内运动。 本实验运用免疫组织化学方法进一步研究了v e g f c 蛋白在肝癌中 的阳性率为6 0 o ( 2 4 1 4 0 ) ，明显高于癌旁( 1 7 5 ，7 4 0 ) 及对照组( 1 0 ， 1 1 0 ，三组比较有显著性差异( ( p o 0 1 ，p o 0 5 ) 。肝癌中v e g f c 蛋白阳 性表达在组织学分级、是否合并肝硬化、a f p 表达、有无h b v 感染间未 见明显差异。而肝癌中v e g f c 蛋白阳性表达与肿瘤大小有关( p 0 0 5 ) ， 与静脉癌栓形成、肝内外转移明显有关( p 0 0 5 ) 。本组肝癌t n m 分期中 在i i i 期组v e g f c 蛋白表达阳性率为3 3 3 ( 7 2 1 ) ，肝癌t n m 分期i i i 期组中v e g f c 蛋白表达阳性率为9 4 7 ( 1 8 1 9 ) 。两组比较差异有统计 学意义( p 0 0 1 ) 。v e g f c 蛋白在高转移倾向组的表达阳性率为 8 4 2 ( 1 6 1 9 ) ，而在低转移倾向组的阳性率为3 3 3 ( 7 1 2 1 ) ，两组比较据有 统计学意义p 0 0 1 ) ，表明m m p 9 蛋白表达与肝癌转移倾向呈明显正相 关，进一步说明了m m p 9 蛋白在肝癌的浸润、转移过程中发挥着重要作 用。 3 肝癌组织中m m p 9 、v e g f c 表达相互间的关系 v i v i p s 在基质重塑、迁移及新生毛细血管床的建立方面起重要作用， 它们作为复杂调节子而不仅仅是促进子或抑制子，m m p s 调节细胞外基质 相关v e g f 的生物利用度，从而导致血管密度、直径、分布的改变，使 血管扩张，直径增大，其具体作用机制还不清楚1 2 2 1 。且有研究表明v e g f 能刺激内皮细胞产生 v i v i p s 或通过调控m m p s 及其抑制物即基质金属蛋 白酶组织抑制剂( t i s ) 的平衡，从而激活了基质降解的瀑布式反应， 研究论文 使肿瘤细胞易于穿透，影响肿瘤的浸润、转移。眨3 2 4 1 另一方面，对肿瘤 血管形成机制的研究则表明，m m p 9 是动员被扣押的v e g f 及肿瘤新生 血管的形成所必需的1 2 5 1 。用人重组v e g f 孵育体外培养的小鼠系膜细胞， 证实v e g f 可提高小鼠系膜细胞m m p 2 和m m p 9 蛋白表达并增加其活 性1 2 6 1 。v e g f c 是v e g f 家族的新成员，其与m m p 9 的联合表达研究较 少，本研究发现4 0 例h c c 中，v e g f c 、m m p 9 均表达上调，经连续切 片，免疫组化检测对比分析，2 3 例m m p 9 表达阳性者中，v e g f c 表达阳 性有2 2 例，1 7 例m m p 9 表达阴性者中，v e g f c 表达阴性有8 例，经 过s p e a r m a n 分析表明m m p 9 和v e g