（分析化学专业论文）光度法在胺基类药物分析中的研究与应用.pdf

独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得 ( 注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空) 或其他教育机构的学 位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡 献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：许乃闩盹导师签字：a 硝戊k 一 签字日期：2 0 0 4 年月 日 签字日期：2 0 0 4 年q 月x j o 日 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 摘要 药物分析学是整个药学科学领域中一个重要的组成部分。药品质量直接影响 人们的身体健康和生命安全，因此，对药品质量进行全面控制，以确保人们用药 的安全具有十分重要的意义。光谱、色谱以及光谱一色谱联用技术在药物分析学 科领域中是基本的研究手段和方法。近年来，在有机分析和生命科学研究中，光 度法应用日趋广泛，紫外可见分光光度法目前仍是药物分析中采用最多的方法之 一。优化反应条件，简化操作步骤，提高方法的选择性和降低测定的检出限，仍 是光度分析需要解决的问题之一。 本文主要以提高灵敏度和选择性为目的，在建立简捷的药物分析方法方面开 展了一系列的研究工作。 利用分光光度法研究了抗生素类药物氨苄西林钠，抗麻风病药物氨苯砜，局 部麻醉药盐酸普鲁卡因与l ，2 一萘醌一4 一磺酸钠的显色反应，建立了灵敏简便 的分光光度法。该反应将药物的最大吸收波长由紫外区红移至可见区，避免了紫 外区杂质的严重干扰。在此反应的基础上，实验了p h 值、表面活性剂、有机溶 剂、加热时间、放置时间及干扰离子对测定的影响，所建立的方法具有线性范围 宽，稳定性好等特点，可成功地用于相关药品含量的测定，与药典方法对照，结 果吻合。 多巴胺和硝酸汞的氧化产物与乙二胺发生缩合，其缩合产物是强荧光物质， 该产物荧光强度与多巴胺的浓度在o 0 2 o 6 0 9 9 m l 范围内成线性关系，据此建 立了测定多巴胺的荧光光度分析法。该产物最大激发波长为3 9 3 n m ，最大发射波 长为4 4 7 n m ，实验了p h 、氧化剂及干扰离子对多巴胺测定的影响。相对标准偏 差为4 3 8 ，检出限为1 8 n g m l ，回收率为9 5 o 1 0 6 6 。该法不受肾上腺素和 去甲肾上腺素的干扰，选择性好，检出限低，成功用于多巴胺注射液和尿样中多 巴胺含量的测定，结果令人满意。 利用荧光光度法研究了卡维地洛的酸碱性质，建立了灵敏、简便的荧光分析 法。卡维地洛的激发和发射波长分别为2 5 4 n m 和3 5 6 n m ，实验了有机溶剂、p h 、 干扰离子及放置时间等因素对卡维地洛测定的影响，相对标准偏差为2 3 1 ，线 性范围为0 5 0 2 7 0 n g m l ，方法检出限为0 1 9 n g m l ，样品回收率为9 8 7 0 - 1 0 2 1 。 本法可用于药片中卡维地洛含量的测定。 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 关键词分光光度法，荧光光度法，盐酸普鲁卡因，氨苄西林钠，氨苯砜，多巴 胺，卡维地洛。 a b s t r a c t t h ea n a l y s i so fd r u g g e r yi so n eo ft h em o s ti m p o r t a n tc o m p o n e n t si nt h e p h a r m a c o l o g y t h eq u a n t i t yo f t h ed r u g g e r ya f f e c t sp e o p l e sh e a l t ha n ds a f e t yd i r e c t l y t h e r e f o r et h ew h o l ec o n t r o lo fd r u g g e r yp l a y sa l l i m p o r t a n tr o l ei nt h ec l i n i ca n d m e d i c a l t r e a t m e n t s p e c t r o p h o t o m e t r y , c h r o m a t o g r a p h y a n d s p e c l r o p h o t o m e t r y - c h r o m a t o g r a p h y , t h em o s te s s e n t i a lm e t h o d si nt h ed r u g g e r ym e a s u r e m e n t s ，h a v e b e e n w i d e l y u s e di nt h ed e t e r m i n a t i o no fp h a r m i c p r o d u c t s i n r e c e n t y e a r s ， s p e c t r o p h o t o m e t r yi sd e v e l o p i n gi nt h es t u d yo fo r g a n i ca n a l y s i sa n dl i f es c i e n c e s o b v i o u s l y , u v - v i s i b l es p e c t r o p h o t o m e t r yi s o n eo ft h em e t h o d si nt h eq u a l i t a t i v e d e t e r m i n a t i o no f d r u g si nt h em o d e m i n s t r u m e n t a la n a l y s i s i ti ss t i l lt h eq u e s t i o n st o b es o l v e di nt h ea n a l y s i so f d r u g g e r y t oo p t i m i z et h ea m d y t d c a lc o n d i t i o n s ，i m p r o v e t h es e l e c t i v i t y , r e d u c et h ed e t e c t i o nl i m i ta n d s i m p l i f y t h e p r o c e d u e t oi m p r o v et h es e n s i t i v i t ya n d s e l e c t i v i t y , s o m en o v e la n ds i m p l em e t h o d sf o r t h ea s s a yo f d r u g s h a v eb e e ne s t a b l i s h e di nm ym a s t e r p a p e r s p e c t r o p h o t o m e t r i cd e t e r m i n a t i o no fp r o c a i n eh y d r o c h l o r i d e ，a m p i c i l l i ns o d i u m a n dd a p s o n ei sd i s s c u s s e d p r o c a i n eh y d r o c h l o r i d e ，a m p i c i l l i ns o d i u ma n dd a p s o n e c a nr e a c tw i t h1 , 2 一n a p h t h o q u i n o n e - 4 - s u l f o n i ca c i dt of o r ms a l m o np i n kc o m p o u n d ， r e s p e c t i v e l y t h e i rm a x i m u ma b s o r p t i o nw a v e l e n g t h e s w e r es h i f t e df r o mt h er a n g eo f u l t r a v i o l e tt ot h ev i s i b l el i g h tt h e r e f o r ep r o c a i n eh y d r o c h l o f i d e ，a m p i c i l l i ns o d i u m a n dd a p s o n ec a nb ed e t e r m i n e di nt h er a n g eo fv i s i b l el i g h t i nt h i sw a y , m u c h p o t e n t i a li n t e r f e r e n c em a y b ea v o i d e di nt h ed e m r m i n a t i o no f t h e s ed r u g si nb i o l o g i c a l m a t e r i a l sa n dh e m a n a l y s i s t h e s em e t h o d sa r er a p i d ，s i m p l ea n dw i d e rl i n e a rr a n g e ， a n dc a nb eu s e df o rd e t e r m i n i n gp r o c a i n eh y d r o c h l o r i d e ，d a p s o n ea n da m p i c i u i n s o d i u mi ni n j e c t i ns o l u t i o n so ft h e s ed r u g s t h er e s u l t so b t a i n e db yt h e s em e t h o d s a g r e e dw i t ht h o s eb y t h eo f f i c i a lm e t h o d s as e n s i t i v ea n ds e l e c t i v em e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fd o p a r n i n ew a s s t u d i e d 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 d o p a m i n ew a so x i d i z e db ym e r c u r y ( i i ) n i t r a t e a n dt h eo x i d a t i o np r o d u c tw a s c o n d e n s e dw i t he t h y l e n ed i a m i n et of o r maq u i n o x a l i n ed e r i v a t i v ew h i c hw a ss t r o n g l y f l u o r e s c e n t t h em e a s u r e m e n tw a sc a r r i e do u ta t4 4 7n l t lw i t he x c i t a t i o na t3 9 3m e f f e c t so fp h ，o x i d a n t s ，a n df o r e i g ni o n so nt h ed e t e r m i n a t i o no fd o p a m i n ew e r e e x a m i n e d al i n e a rr e l a t i o n s h i pw a so b t a i n e db e t w e e nt h er e l a t i v ef l u o r e s c e n c e i n t e n s i t ya n dt h ec o n c e n t r a t i o no fd o p a m i n e i nt h er a n g eo fo 0 2t oo 6 0l a g m l ，t h e r e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o ni s4 3 8 t h ed e t e c t i o nl i m i ti s18n g m l ，a n dt h er e c o v e r y i sf r o m9 5 0t o1 0 6 6 d o p a m i n ew a ss e p a r a t e df r o ma d r e n a l i n ea n dn o r a d r e n a l i n e i nu r i n eb yt h i nl a y e rc h r o m a t o g r a p h y t h i sm e t h o dh a sl o wd e t e c t i o nl i m i ta n d c a r lb e u s e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no f d o p a r n i n ei ni n j e c t i o na n du r i n es a m p l e s t h e p r o p e r t y o fc a r v e d i l o l i na c i d a l k a l i n em e d i u mw a ss t u d i e d b y s p e c t r o f l u o f i m e t r y as i m p l e ，r a p i da n dh i g hs e n s i t i v ef l u o r i m e t r i cm e t h o df o rt h e d e t e r m i n a t i o no fc a r v e d i l o li nm e d i c i n ei sd e v e l o p e d t h em e a s u r e m e n to fr e l a t i v e f l u o r e s c e n c ei n t e n s i t yw a sc a r r i e do u ta t3 5 6 n mw i t he x c i t a t i o na t2 5 4 n m al i n e a r r e l a t i o n s h i p w a so b t a i n e db e t w e e nt h er e l a t i v e f l u o r e s c e n c e i n t e n s i t y a n d c o n c e n t r a t i o no fc a r v e d i l o li nt h er a n g eo f 0 5 0t o2 7 0n g m 1 t h ed e t e c t i o nl i m i to f t h i sm e t h o di s0 1 9n g m 1 t h i sm e t h o dc a nb eu s e df o rd e t e r m i n a t i o no f c a r v e d i l o li n t a b l e ts a m p l e s t h er e s u l t so b t a i n e db yt h i sm e t h o da g r e e dw i t ht h o s eb yt h eo f f i c i a l m e t h o d 。 k e y w o r d ss p e c t r o p h o t o m e t r y , f l u o r i m e t r y , p r o c a i n e h y d r o c h l o r i d e ，a m p i c i l l i n s o d i u m ，d a p s o n e ，d o p a m i n e ，c a r v e d i l 0 1 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 第一章绪论 以分子吸收光谱为基础的紫外可见分光光度分析法具有设备简单、适用性 广、准确度和精密度较好等特点，已在地质、环境、能源、材料、食品等科学中 发挥着重要作用，尤其是随着多元络合物4 、胶束增敏光度法、有机试剂】等 的发展，它已经成为应用最广泛的分析手段之一。荧光光谱是一种发射光谱，具 有灵敏度高、选择性强、所需试样量少等特点，已被广泛应用于痕量分析，特别 适用于生物体液中药物或代谢产物的分析。近几年来，随着生命科学的发展，有 机物光度分析的研究和应用的热点主要集中在生物、临床、药物等方面。据统计， 在药物分析中，分光光度法占2 9 1 ，色谱法占2 5 5 ，荧光、化学发光法占 2 4 ，与光度法有关的方法共计占分析方法的3 1 5 ，由此可见，光度法是药 物分析最常用的方法之一。研究结果表明，光度法在药物分析中的可靠性可以和 色谱法媲美，但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难 于做到的。 一胺类药物的分光光度分析 分光光度法的灵敏度和精密度较高，一般每毫升溶液中有几微克的物质即可 测定，误差为2 左右，且吸收峰比较简单、平缓，所以在药物分析中主要用于 定量分析。通常，选择在最大吸收波长( m a x ) 处进行测定。荧光分析法比分 光光度法灵敏度高，但精密度稍差。所以分光光度法广泛应用于药物和制剂的分 析；而荧光分析法一般用于需要高灵敏度和允许较大变异性的生物样品中的药物 分析，特别适用于药物在体内降解、代谢和排泄速度方面的研究。荧光分析法还 可以考虑用于少量物质的分析，如药物中的痕量杂质的分析，某些激素类、生物 碱类和其他剂量很小的药物的单剂量测定。 1 9 9 2 年以前芳胺及磺胺类药物的分析方法已有专门论述【6 。光度法适用于胺 类药物的微量测定，一般多用于生物检体( 血、尿、脊髓液、脓液以及其它渗出 液等) 中本类药物的微量分析。 胺类药物的分光光度法测定，是基于以下的显色反应进行的： ( 1 ) 重氮化偶合反应具有芳伯氨基( 或潜在芳伯氨基) 的本类药物，可在酸 性溶液中利用其重氮化偶合反应生成橙红色的偶氮染料，在4 1 0 5 6 0 n m 波长区 间有最大吸收。如盐酸克仑特罗栓含量的测定陋1 ：先加入氯仿将栓剂基质溶解后， 山东师范大学颂一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 用盐酸液提取盐酸克仑特罗，加亚硝酸钠试液重氮化后与酸性偶合剂n ( 1 萘基) 一7 , - - 胺偶合显色，在5 0 0 r i m 波长处分别测定吸光度。研究过的其它类似药物 有盐酸普鲁卡因【”、盐酸溴己新制剂3 等。本法也可用于全血、血清、尿或脑 脊髓液中磺胺类药物的分析。无n 4 取代基的磺胺类药物，或n 4 为酰胺基的磺 胺类药物，经水解，在酸性介质中重氮化后，可在碱性中与酚类( 如1 3 一萘酚、 麝香草酚) 偶合，或在弱酸性中与胺类偶合显色测定。由于血清中的药浓比等容 的红血球中的药浓大，所以测定时必须明确是测定全血药浓还是血清药浓。通常 本类药物治疗指标都以全血浓度表示。本类药物经服用后，在体内部分的被乙酰 化而形成乙酰化物，不再具有治疗效能。本法可用于控制有效血药浓度，也可用 于研究本类药物进入体内后的某些代谢过程1 4 也2 】。本法比较灵敏简单易行。 ( 2 ) 与3 - 甲基苯骈噻唑啉一2 酮腙( m b t h ) 反应口3 】在酸性介质及适宜的氧化 剂存在下，m b t h 试剂的氧化产物与含芳香氨基的药物发生偶合反应，形成稳 定的蓝色产物，可用可见法进行测定。e 1 k o m m o s 2 4 ，l a v a n y a 2 5 1 等用此法测定 了苯佐卡因、盐酸丁卡因、扑热息痛等药物及其制荆的含量。该法优点是快速， 简单。 ( 3 ) 形成离子对或络合物后转溶于有机相中国药典( 1 9 9 0 ) 即采用本法测定 盐酸苯海拉明片的含量。文献 2 6 - 3 4 】报道了利用本法测定盐酸芬氟拉明、扑尔敏、 利多卡因等药物的含量。 ( 4 ) 与9 氯吖啶试剂显色反应 3 5 , 3 6 芳伯氨基和磺胺类药物都可以与9 氯吖啶 反应产生具有高强度色泽的盐酸氨基吖啶化合物，可用分光光度法进行其含量测 定。如磺胺异嗯唑，其最大吸收波长为4 3 5 n m 。在此波长处试剂空白读数很低。 ( 5 ) 利用芳伯氨基与芳醛缩合生成席夫碱反应该反应能生成稳定的有色化合 物，故可用分光光度法测定药物的含量。l i u l 3 7 等报道了用该法测定盐酸普鲁卡 因等药物及其片剂的含量3 8 矧。此法也可用于磺胺类药物的测定【4 3 4 8 】。醛胺缩合 法不如前面的方法灵敏度高，但方法比较简便。 ( 6 ) 基于氧化还原反应的显色反应扑热息痛【4 9 彤1 在硫酸性介质中，被硫酸铈、 高碘酸钾或重铬酸钾氧化，生成棕红色产物，在4 1 0 n m 左右测定。该法已用于 茶苯海明【5 6 】、盐酸苯海拉明及丁卡因等药物的含量测定。 ( 7 ) 还有报道磺胺类药物可以与四氯邻醌1 5 8 - 6 3 】在p h 9 1 0 介质中发生反应，生 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 成稳定的红色络合物，用5 2 5 n m 波长进行测定。也可与过量的对苯醌f 6 3 】反应， 生成的有色产物在4 9 0 5 0 0 n m 波长范围内测定。 上述方法中，普遍公认的经典方法为重氮化一偶合反应。 二胺类药物的荧光分析法 可分为直接荧光测定法和间接荧光测定法二大类。直接荧光测定法是基于药 物本身受特定波长光激发能产生荧光而迸行的测定。因荧光性质易受p h 影响， 故相对荧光强度的测定必须在p h 值适宜的介质中进行。对于成分复杂的生物检 品，应先加以纯化，以免杂质干扰，同时可降低荧光本底值，提高检测的灵敏度。 面间接荧光法包括化学引导荧光测定法、制各荧光衍生物测定法、淬灭荧光测定 法和化学发光免疫分析法等，可利用各种化学反应使原来没有荧光的药物产生荧 光从而进行测定。芳胺及磺胺可以与荧胺、邻苯二甲醛等试剂反应生成荧光物质， 从而可应用荧光分析法进行该类药物及其制剂的研究与测定。 近年来，对这类物质的测定大多数为色谱和电分析方法，用光度分析的比较 少。光度法的分析大体可分为三种，一是用氧化剂将其氧化为有色基团，这类氧 化剂有高碘酸盐、n a ：w o 。等，二是增加其共轭结构，增强物质的吸光度，三是 将该类物质作为其它反应的催化剂，间接测定该物质的含量。 对于荧光光度法的应用，基本没有脱离过去的检测方法，只是从操作技术上 进行了改进，如离子交换柱，流动注射，停流注射的应用等。芳胺及磺胺可以与 荧胺、邻苯二甲醛等试剂反应，用荧光分析法进行该类药物及其制剂的研究与测 定。 参考文献 【1 】杨菇，卢燕，李秀林分析化学，1 9 9 8 ，2 6 ( 1 2 ) ：1 5 1 8 2 】杨光宇，尹家元，刘枚等分析化学，1 9 9 9 ，2 7 ( 1 ) ：6 9 f 3 潘教麦，刘劭钢分析化学，1 9 9 9 ，2 7 ( 2 ) ：1 6 6 【4 4 胡秋娈，李娜，赵风林等分析化学，1 9 9 9 ，2 7 ( 2 ) ：1 6 6 f 5 】周旭光，封丽，周万彬等分析化学，1 9 9 9 ，2 7 ( 2 ) ：2 4 4 6 】安登魁药物分析，1 9 9 2 【7 】中华人民共和国药典二部，1 9 9 0 ，4 8 3 ( 8 】e 1 一t a r r a sm ，f a y e zm ，e t a 1 a n a ll e t t1 9 8 2 ；l5 ( b 6 ) ：5 5 9 5 7 2 山东师范大学硕一i 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 【9 s h i n g b a ld m ，e t a 1 i n d i a nd r u g s19 8 5 ；2 2 ( 5 ) ：2 7 5 - 2 7 6 【1 0 s h i n g b a ld m ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 7 ；2 4 ( 8 ) ：4 1 7 4 1 8 【1 1 s h i n g b a l d m ，e ta 1 i n d i a n d r u g s l 9 8 7 ；2 4 ( 6 ) ：3 1 1 3 1 2 12 】s a n t o r om r m ，e t a 1 ja s s o co f f a n a lc h e m19 8 4 ；6 7 ( 3 ) ：5 3 2 5 3 4 1 3 】z a r a p k a rs s ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 8 ；2 6 ( 1 ) ：3 8 4 1 1 4 】e m m a n u e lj ，c ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 5 ；2 2 ( 7 ) ：3 8 7 - 3 8 8 【1 5 】s a d a n ag s ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 7 ；2 5 ( 1 ) ：2 8 3 0 1 6 s a n er t , c ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 2 ；1 9 ( 5 ) ：2 0 6 2 1 0 1 7 k r i s h n ar r , e t a 1 c h e m a n a l ( w a r s a w ) 1 9 8 0 ；2 5 ( 2 ) ：2 8 1 2 8 6 1 8 】b e l a ls ，e ta 1 jd r u g r e s1 9 8 3 ；1 4 ( 1 2 ) ：1 9 5 - 2 0 1 1 9 1e l l a i t h y m m ，e t a l m i c r o c h e m j1 9 8 6 ；3 3 ( 2 ) ：5 8 - - 6 1 【2 0 m y n k aa f , e ta 1 f a r mz h o d e v ) 1 9 8 7 ；h3 8 叫o 【2 1 】i v a k h i e n k op n ，e ta 1 f a r m a m i y a ( m o s c o w ) 1 9 8 1 ；3 0 ( 2 ) ：5 8 6 1 2 2 】c r e a n g as i l v i a ，e ta 1 f a r m a c i a ( b u c h a r e s t ) 1 9 8 0 ；2 8 ( 2 ) ：8 5 9 2 2 3 】m o r a i tg ，c ta 1 f a r m a c i a ( b u c h a r e s t ) 1 9 8 0 ；2 8 ( 2 ) ：6 5 7 1 【2 4 】m i c h a e le ，e 1 - k o m m o s ，e ta 1 a n a l y s tj1 9 8 8 ；1 1 3 ：1 3 3 1 3 7 2 5 】e 1 - k o m m o sm e ，e ta 1 a n a l y s t1 9 8 7 ；1 1 2 ：1 2 5 3 1 2 5 6 2 6 】l a b a n y ak ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 9 ；2 6 ( 8 ) ：4 4 0 4 4 1 2 7 s h i n g b a ld m ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 8 ；2 5 ( 1 2 ) ：5 2 9 5 3 1 【2 8 】c h o w d a r yk p r ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 6 ；2 3 ( 1 0 ) ：5 7 7 - 5 7 8 【2 9 】d o l i n s k a y an v ，e ta 1 f a r m a t s i y a ( m o s c o w ) 1 9 8 6 ；3 5 ( 4 ) ：6 2 - 6 3 3 0 s h i n g b a ld m ，e t a 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 8 ；2 5 ( 8 ) ：3 4 1 3 4 3 3i 】s a n er t i n d i a nd r u g s1 9 8 9 ；2 6 ( 1 2 ) ：7 1 9 7 2 1 3 2 】i s s aa s ，c ta 1 t a l a n t a1 9 8 5 ；3 2 ( 3 ) ：2 0 9 2 1 1 【3 3 】c a c h op j ，e ta 1 a n a ll e t tl9 8 3 ；16 ( b 3 ) ： 3 4 】s h i n g b a ld m ，e ta 1 i n d i a nd r u g s 19 8 6 ；2 3 ( 8 ) ：4 7 2 4 7 3 3 5 】齐晓飞等药物分析杂志，1 9 8 6 ，6 ( 1 ) ：5 2 5 3 3 6 】s t e w a r tj r , e t a l a n a lc h e m1 9 6 9 ；4 1 ：3 6 0 3 7 】g a i d u k e v i c ha n ，e t a 1 f a r mz h ( k i e v ) 1 9 8 0 ；( 6 ) ：2 3 - 2 6 3 8 】l i a nd o n gl i u ，e ta 1 t a l a n t a2 0 0 0 ；5 2 ：9 9 1 - 9 9 9 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 【3 9 e 1 一k o m m o sm e ，e ta 1 a r c hp h a r m c h e m is c ie d 19 8 2 ；10 ( 2 - 3 ) ：5 7 6 0 4 0 夏桂珠等，药学通报，1 9 8 6 ，2 1 ( 1 ) ：2 5 - 2 6 4 1 】c h a i n a n im l ，e t a 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 6 ；2 4 ( 1 ) ：5 1 - 5 3 4 2 d s as ，e ta 1 i n d i a nd r u g s19 8 6 ：2 3 ( 6 ) ：3 8 2 - 3 8 3 4 3 m a y a d e om s ，c t a 1 i n d i a njc h e ms e c ta 1 9 8 6 ；2 5 a ( 8 ) ：7 8 9 - 7 9 0 【4 4 p a t e lp r ，e ta 1 i n d i a njp h a r m s c i1 9 8 1 ；4 3 ( 4 ) ：1 4 6 1 4 7 4 5 】e l o b e i dh a ，e t a 1 a n a ll e t tp a r tb 1 9 8 1 ；1 4 ( 2 ) ：1 2 9 1 3 6 【4 6 】k n e v e la m ，e ta 1 j e n k i n s ；q u a n t i t a t i v e p h a r mc h e m 7 t he d i 1 9 7 7 ：3 0 8 4 7 】k r i s h n ar ，e t a 1 a c t ac i e n c i n d i e a s e r c h e m1 9 8 0 ；6 ( 3 ) ：1 4 0 1 4 1 【4 8 s a s t r yc s p , e t a 1 ji n d i a nc h e ms o c1 9 8 1 ；5 8 ( 7 ) ：6 5 5 6 5 8 4 9 】r a og r e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 9 ，2 6 ( 8 ) ：4 1 7 - - 4 2 0 5 0 】a 1 一t a m r a hs a o r i e n t jc h e m1 9 8 7 ；3 ( 2 ) ： 5 1 】s u l t a ns m ，e t a 1 t a l a n t a1 9 8 7 ；3 4 ( 7 ) ：6 0 5 6 0 8 5 2 v e r m ak k , e ta 1 a n a l y s t ( l o n t o n ) 1 9 8 4 ；1 0 9 ( 6 ) ：7 3 5 - 7 3 7 5 3 】d a v i sd r a n a l y s t1 9 7 4 ；9 9 ( 1 11 4 ) ：1 2 5 4 】e l l c o c k c t h ，e t a l a n a l y s t1 9 7 5 ；1 0 0 ( 1 1 8 6 ) ：1 6 5 5 】d e o u h a rr d ，e t a 1 i n d i a njp h a r m1 9 7 6 ；3 8 ( 1 ) ：1 8 5 6 m o r e l l ib jp h a r m b i o n e da n a l19 8 9 ；7 ( 5 ) ：5 7 7 - 5 8 4 5 7 】s a n g h a v in m ，e t a 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 0 ；1 8 ( 1 ) ：2 5 - 2 8 5 8 k o v a l c h u kt v , e t a 1 f a r mz h ( k i e v ) 1 9 8 4 ；( 6 ) ：5 - 6 0 5 9 】r a ng r ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 9 ；2 6 ( 8 ) ：4 1 4 4 1 7 【6 0 r a ng r ，e t a 1 i n d i a njp h a r ms c i1 9 8 8 ；5 0 ( 2 ) ：1 3 8 1 4 0 6 1 】e m m a n u e lj ，e ta 1 i n d i a nd r u g s1 9 8 2 ；1 9 ( 1 2 ) ：5 0 2 5 0 4 6 2 】a 1 - a b a c h i ，m q ；a 1 - g h a b s h a , t s ；s h a h b a z ，n a m i c m c h e m j j u n 19 8 5 31 ( 3 ) ，2 7 2 - 2 7 4 6 3 龙云，李东辉，冯建章，童沈阳，分析化学，1 9 9 7 ，2 5 ( 8 ) ：9 1 6 9 1 8 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 第二章胺基类药物与1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠的相互作用 - 第一节1 ，2 - 萘醌一4 一磺酸钠与胺基类药物的反应机理 早在1 8 9 4 年，b 6 n i g e r 1 就发现了1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠与第一胺的反应，反 应方程式如下： o + n o h $ o ， 八 此后，该反应被用于第一芳胺的鉴定 2 】，又成了氨基酸【3 】、磺胺 4 1 及第一和 第二脂族胺1 5 】分光光度法测定的基础。 1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠的磺酸基能被氨基取代，生成橙色的n 一烷胺基萘醌， 允许在可见部分检测。而n 一烷胺基萘醌能与2 ，4 一二硝基苯肼反应，生成深颜 色产物，因此增强第一和第二脂族胺以及第一芳族胺的分光光度法测定的灵敏 度。 染料能被萃取至二氯甲烷中，并用2 ，4 一二硝基苯肼显色，而氨基酸衍生物 保留在水层，因此可提供一个选择性测定的可能性，增强灵敏度。 n 一取代基一4 一氨基一1 ，2 一萘醌也能被还原成相应的氨基二羟基萘，它是强 荧光产物，可用于第一、第二脂族胺和第一芳族的荧光分析法测定。 与肼反应，萘醌磺酸本身迅速还原成荧光产物1 ，2 一二羟基萘一4 一磺酸。 此法可用于肼的荧光分析法测定，特别是在动物器官和尿中的苄肼。 长期以来对胺基类药物的分析，大多在紫外部分进行，受干扰多，操作繁琐， 条件要求较高；而与1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠的反应显色迅速，将检测波长从紫外部 分移到可见部分，选择性好，灵敏度高，受干扰少，可分析测定试剂、全血、血 清、尿、脑脊髓液及体液中磺胺类的药物，很早就用于胺基类药物的测定。本章 根据1 ，2 - 萘醌一4 一磺酸钠与胺类药物的反应机理，建立一种新的分析方法，并成 功用于实际样品中该类药物的测定。 参考文献 1 】m b 6 n i g e r , b e r ，2 7 ，p t 2 ，2 3 ( 1 8 9 4 ) 2 1e h r l i e ha n d c a h e r t e r ，z p h y s i 0 1 c h e m ，4 1 ，3 7 9 ( 1 9 0 4 ) 3 c f o f o l i n ，j b i 0 1 c h e m ，5 1 ，3 7 7 ，3 9 3 ( 1 9 2 2 ) ；n h f u n n a n ，g h m o r r i s o n a n da fw a g n e r , a n a l c h e m ，2 2 ，1 5 6 1 ( 19 5 0 ) 4 1 c f e g ，s c h m i d t ，j b i 0 1 c h e m ，1 2 2 ，7 5 7 ( 1 9 3 8 ) ；e j b a n d e l i n ，s c i e n c e ，1 0 6 、 4 2 6 ( 1 9 4 7 ) ；em e s n a r da n d r c r o c k e t t ，c h i m a n a l ，4 2 ，3 4 6 ，3 8 1 ( 1 9 6 0 ) 5 1 k b l a ua n dw r o b s o n ，c h e m h a d ( l o n d o n ) ，4 2 4 ( 19 5 7 ) ；d h r o s e n b l a t t , p h l i n k a , a n dj e p s t e i n , a n a l c h e m ，2 7 ，1 2 9 0 ( 1 9 5 5 ) 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 第二节1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠体系分光光度法测定盐酸普鲁卡因 摘要本节描述了利用表面活性剂一乙醇一1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠体系分 光光度法测定盐酸普鲁卡因。盐酸普鲁卡因与1 ，2 一萘醌- - 4 - - 磺酸钠在p h = 3 6 0 的缓冲溶液中反应，生成橙红色的产物在4 8 4 n m 处有最大吸收，表 观摩尔吸光系数为84 8 4 = 5 2 2 x1 0 3 。吸光度与盐酸普鲁卡因浓度在o 3 0 1 0 0 p g m l 范围内遵从朗伯比尔定律，线性回归方程为c = 1 9 2 3 a 0 0 3 ，线性 相关系数为0 9 9 9 6 ，检出限为0 2 8 咖l ，回收率为9 8 o 1 0 5 2 。实验了 p h 值、表面活性荆、有机溶剂、加热时间、放置时间及干扰离子对测定的 影响。此法可用于注射液中盐酸普鲁卡因含量的测定。与药典方法对照， 结果吻合。 关键词分光光度法；盐酸普鲁卡因；1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠：盐酸普鲁卡 因注射液。 1 引言 盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药。美国药典、英国药典、中国药典分别用萃 取光度法【1 】、电位滴定法【2 】、死停滴定法口1 测其含量。紫外可见分光光度法【4 。7 1 、 荧光测定洲8 1 、原子吸收分光光度法网、高效液相色谱法 1 0 - 1 2 1 及气相色谱法 1 3 j 4 已被用于测定生物样品、血清和药物制剂中的盐酸普鲁卡因。n e t e s i n a ”1 等和 n o u k l o u z e 1 6 1 等分别报道了以离子选择性电极和聚合物修饰电极测定盐酸普鲁卡 因的浓度。一阶导数高速脉冲极谱测定盐酸普鲁卡因的检出限为o 0 0 8 2 9 9 m l 【r 丌。 姜等报道了以萃取光度法测定盐酸普鲁卡因 1 8 1 ，但此方法不够简捷。紫外可见分 光光度法测定盐酸普鲁卡因已见报道【1 9 1 ，但此方法线性范围较窄( 2 9 u g m 1 ) 。 王等报道了以对二甲氨基苯甲醛作为显色剂分光光度法【2 0 】及荧光光度法【2 1 】测定 盐酸普鲁卡因。然而1 ，2 一萘醌一4 一磺酸钠作为显色剂分光光度法测定盐酸普 鲁卡因的方法未见报道。本文根据i ，2 一萘醌一4 一磺酸钠与盐酸普鲁卡因反应 1 2 2 1 ，生成橙红色的化合物，在4 8 4 n m 处具有最大吸收，建立了快速测定盐酸普 鲁卡因含量的分光光度法。反应方程式如下： 山东师范大学硕一l 二学位论文：光度法种：胺赫类药物分析中的研究与应用 0 堋飞批如。瑚。卜 州h ： 0 9 9 8 ，化学对照品，中国药品 生物制品检定所制造) 被用作标准品。所用试剂均为分析纯，实验用水为二次水。 2 2 1 多巴胺标准储备液( 1 0 0 p g m ) 准确