（海洋生物学专业论文）条纹斑竹鲨养殖生物学、核型和线粒体dna序列的研究.pdf

摘要 摘要 条纹斑竹鲨 曲j d s 州j 姗留f 船册( b e n n e t t ，1 8 3 0 ) 是我国常见的小 型软骨鱼类，广泛分布于南海、台湾海峡和东海。为了充实条纹斑竹鲨的基础生物 学资料，并为条纹斑竹鲨的人工养殖提供理论依据，论文对条纹斑竹鲨的养殖生物 学、消化系统的形态结构、胚胎发育、染色体核型以及厦门和湛江条纹斑竹鲨群体 的线粒体c y t6 基因和控制区进行了深入、细致的研究，获得的主要研究结果和结 论如下： 1 条纹斑竹鲨经过4 5 8 9d 的驯化，在室内水池中可摄食小型鱼虾、软体动 物等天然饵料及人工配合饲料，存活率达9 1 7 以上，体重相对增长为1 5 4 3 1 8 6 4 。 2 条纹斑竹鲨能适应的温度范围为1 0 3 0 ；在温度变化速度和幅度较小 的条件下，条纹斑竹鲨对温度的适应范围可达到4 3 8 。在我国福建以南的沿 海地区，均适于开展条纹斑竹鲨的人工养殖。 3 条纹斑竹鲨能适应的盐度范围为2 0 3 5 ；以3 d 、6 d 和9 d 的速度逐 渐降低盐度，其可耐受的最低盐度分别为6 、1 2 和1 2 。 4 条纹斑竹鲨的耗氧量和耗氧率随着温度的升高呈上升态势；耗氧量随体重 的增大而增大，耗氧率则相反，随体重增加而减小；在水温2 2 5 2 4 时，条纹 斑竹鲨的窒息点范围为o 1 7 6 o 6 0 8m g l 。 5 对条纹斑竹鲨的消化器官进行解剖和组织学观察，结果表明：条纹斑竹鲨 消化系统的组织学特征与其它鱼类基本相似，但大肠上皮为复层扁平上皮，其中含 有大量大型粘液细胞。 6 对室内培育的条纹斑竹鲨自然产出的受精卵和胚胎发育的观察研究表明， 条纹斑竹鲨的受精卵较大，卵黄略呈椭圆形，长径为2 5 9 l 3 6 1 6 姗，短径为 1 3 5 6 1 9 4 4 响。卵鞘棕褐色，坚韧而有一定的弹性。卵鞘的一边附有卵膜丝。 在水温2 8 o ，盐度2 6 2 2 8 8 条件下，受精卵经过6 5 8 0d 完成胚胎发育。 初孵幼体已具有成鱼的外形特征，全长1 2 1 8 2 1 6 6 8 0 舳，重5 3 0 1 8 2 2g ， 体外卵黄囊剩余少许( 直径约l 衄) 或完全消失，但体内尚存卵黄。 条纹斑竹鲨养殖生物学、核型和线粒体d n a 序列的研究 7 条纹斑竹鲨的二倍体染色体数为2 n = 1 0 4 ，在已知染色体核型的软骨鱼类中 为二倍体数最多的种类之一，核型公式为2 n = 4 0 m + 2 6 s m + 8 s t + 3 0 t ，染色体总臂数 n f = 1 7 0 ，其中第3 l 对染色体带有随体。 8 对采自厦门和湛江海域的条纹斑竹鲨的线粒体d n a 控制区和c y t6 基因进 行p c r 扩增和测序，分析了线粒体d n a 控制区、c y t6 基因和t r n a 基因全序列 ( g e n b a n k 序列号：e u 3 6 3 7 4 0 e u 3 6 3 7 5 2 ) 。结果表明，t r n 矿。基因长度为6 9b p ， 控制区长度为1 0 9 4 1 0 9 6b p ，c y t6 基因全序列长度为1 1 4 6b p 。t r n a 基因非常 保守，未发现碱基变异。所测3 0 个个体中，控制区只有4 个多态位点，5 种不同 的单倍型；c y t6 基因全序列共有1 0 个多态性位点，7 种单倍型。c y t6 基因的 1 1 4 6 个碱基编码3 8 1 个氨基酸，氨基酸链共有3 个变异位点，4 种单倍型，厦门 群体具有4 种单倍型，湛江群体只有1 种单倍型。综合c y t6 基因和控制区序列， 2 个条纹斑竹鲨群体共有l o 种单倍型，其中厦门群体有9 种单倍型，湛江群体仅 4 种单倍型。研究结果表明条纹斑竹鲨在控制区和c y t6 基因序列上的遗传多样性 均较低，厦门群体的遗传多样性水平高于湛江群体。 关键词：条纹斑竹鲨；养殖生物学；胚胎发育；核型；线粒体d n a a b s t r a c t s t u d i e so nc u l t u r eb i o i o g y ， k a r y o t y p ea n d m i t o c h o n d r i a ld n a s e q u e n c e o fw h i t e s p o t t e db a m b o o s h a r kc 讫啦y 刀觑j 咒p 尻z 灿以， x i ey a n g - j i e s u p e r v is e rb yp r o f s uy o n g q u a n d e p a r t m e n td fo c e a n o g r a p h y ，x i a m e nu n i v e r s i t y ，x i a m e n3 6 1 0 0 5 ，c h i n a a b s t r a c t t h ew h i t e s p o t t e d b 锄b o o s h a r k 国j j 州，删p j 第f d s 衄( b e n n e t t ，1 8 3 0 ) i saf a m i l i a rs m a l ls h a r kd i s t r i b u t i n gi nt h es o u t h c h i n as e a ，t a i w a ns t r a i t a n de a s tc h i n as e a i no r d e rt oe n r i c ht h eb i o l o g i c a ld a t aa n dp r o v i d et h e n e c e s s a r yi n f o r m a t i o nf o ri t sc u l t u r e ，t h eb i 0 1 0 9 yo fcp z 芒i g j d s “刀f o r c u l t u r e ，t h em o r p h o l o g i c a la n dh i s t o l o g i c a ls t u d i e so nt h ed i g e s t i v es y s t e m o ft h i ss h a r kw e r ec o n d u c t e di nt h i ss t u d y f u r t h e r m o r e ，t h ee i 刊b r y o n i c d e v e l o p m e n t ，t h ek a r y o t y p ea n dt h ec o n t r 0 1r e g i o na n dc y t6g e n es e q u e n c e i nm i t o c h o n d r i a ld n aw e r ea l s oi n v e s t i g a t e d m a i nr e s u l t sw e r ea sf o l l o w s ： 1 a f t e rb e i n gd o m e s t i c a t e df o r4 5 8 9d ，t h i ss h a r kc o u l df o r a g et h e d i e t ss u c ha ss m a l l 一s i z ef i s h e s ，s h r i m d s ，m o l l u s k sa n dt h ef o r m u l a t e df o o d i t ss u r v i v a lr a t e sc o u l db eo v e r9 1 7 ，w h i l et h er e l a t i v ei n c r e a s er a t e s f o rt h eb o d yw e i g h t r a n g e df r o m1 5 4 3 t o1 8 6 4 2 t h es u i t a b l et e m p e r a t u r ef o rc 县似切r a n g e df r o m1 0 t o3 0 ，a n dt h e yc o u l db e a ri nt h er a n g ef r o m4 t o3 8 i fw a t e rt e p e r a t u r e c h a n g eg r a d u a l1y 3 a tt e 叩e r a t u r eo f2 5 2 5 5 c ，cp j 毛“d s “田c o u l db ew e llr e a r e d i nw a t e rw i t hs a l i n i t yf r o m2 0t o3 5 w h e ns a l i n i t yd e c r e a s e df r o m3 0w i t h 3 d ，6 do r9 d ，t h e1 0 w e s ts a l i n i t yf o rcp j 。l 占i d s “刃t os u r v i v em i g h t b e6 ，1 2a n d1 2r e s p e c t i v e l y v l l 条纹斑竹鲨养殖生物学、核型和线粒体d n a 序列的研究 4 t h eo x y g e nc o n s u m p t i o nr a t e so fep a 占j d s “刀w i t h i n2 4h o u r sw e r e c o n t i n u o u s l ys t u d i e d ，t h eo x y g e nc o n s u m p t i o nr a t e sa n ds u f f o c a t i o np o i n t s u n d e rd i f f e r e n tw a t e rt e f i l p e r a t u r e sw e r em e a s u r e d t h er e s u l t ss h o w e d ： ( 1 ) t h e r ew a sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c ei no x y g e nc o n s u m p t i o nr a t e sf o rt h i s s h a r kd a ya n dn i g h t b u tt h e r ee x i s t e dh i g ha n d1 0 wp o i n t s t h ea v e r a g e v a l u ew i t h i n2 4h o u r sw a s0 2 1 3m g ( g h ) ( 2 ) w i t ha v e r a g eb o d yw e i g h t o f9 9 2 9g ， t h eo x y g e nc o n s u m p t i o na n di t sr a t eo f z 0 z 置g ，d s “田i n c r e a s e d w i t hw a t e rt e m p e r a t u r e ( 3 ) w i t hw a t e rt e m p e r a t u r eo f2 2 5 _ 2 4 ，t h e o x y g e n c o n s u m p t i o no fcp - a g f d s “册i n c r e a s e dw i t hb o d yw e i g h t ，w h i l et h eo x y g e n c o n s u m p t i o nr a t ev a r i e di n v e r s e l y ( 4 ) t h es u f f o c a t i o np o i n t sw e r e0 1 7 6 0 6 0 8m g lw i t hb o d yw e i g h to f5 0 0 0gt o4 6 6 5 0ga n dw a t e rt e m p e r a t u r e o f2 2 5 2 4 ( 5 ) s u f f o c a t i o np o i n t sr a i s e dw h i l ew a t e rt e m p e r a t u r e i n c r e a s e do rd e c r e a s e df r o m2 5 5 m o r p h o l o g i c a la n dh i s t o l o g i c a ls t u d i e so nt h ed i g e s t i v es y s t e mo f cp z z g ，d s “刃s h o w e dt h a ti t sd i g e s t i v et r a c tw a sr e l a t i v e l ys h o r t ， i t o c c u p i e d4 9 3 1 2 6 0 9 6o ft h et o t a lb o d yl e n g t h l i v e rw a sb i g ，i t sw e i g h t w a s4 9 2 1 2 2 o fb o d ym a s s ，a n dt h ep a n c r e a sw a s0 1 6 0 0 4 o fb o d ym a s s h i s t o l o g i c a ls t r u c t u r eo ft h ed i g e s t i v es y s t e mo f p j l g f d s “刃w a ss i m i l a r t ot h o s eo fo t h e rf i s h e s ， e x c e p tt h a tt h e1 a r g ei n t e s t i n ew a sc o v e r e dw i t h s t r a t i f i e ds q u a m o u se p i t h e l i u ma n da m o n gw h i c h t h e r ew e r em a n yl a r g em u c o u s c e l l s 6 m o r p h o l o g i c a ls t u d i e so nt h ee m b r y o n i cd e v e l o p m e n to fcp - z 毛多f d s “刀 s h o w e dt h a tt h ee g gw a so v a lw i t ht h eo p a q u ee x t e r n a lf i b r o u s1 a y e r t h e 1 0 n g e rd i a m e t e r so ft h ee g g sw e r e2 5 9 1 3 6 1 6m ma n dt h es h o r tw e r e1 3 5 6 1 9 4 4m m i tt o o k6 5 8 0df o re m b r y ot od e v e l o pt oy o u n gf i s hu n d e rw a t e r t e m p e r a t u r eo f2 8 0 ca n ds a li n it yo f2 6 2 2 8 8 t h et o t a ll e n g t ho ft h e n e w l yh a t c h i n gy o u n gf i s hw e r e1 2 1 8 2 1 6 6 8 0 唧，w h i l et h eb o d ym a s sw e r e 5 3 0 1 8 2 2g t h ey o l kr e m a i n e dj u s tal i t t l e ( d ia i i l e t e r1 衄) o r n o t h i n g o u to ft h eb o d yb u tt h e r ew e r ey o l ki n s i d et h eb o d y t h e yh a dt h ef i g u r e v 1 l l a b s t r a c t l i k et h e i rp a r e n t s 7 t h ek a r y o t y p eo fcp 伽f d s “刃w a ss t u d i e db ym e a n so fc o l c h i c i n e s ， h y p o t o n i ct r e a t m e n ta n da i r d r yt e c h n i q u e t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h e n u m b e ro fc h r o m o s o m e so fd i p l o i dc e l lw a s1 0 4 ，i t sk a r y o t y p ew a s2 n = 4 0 m + 2 6 s m + 8 s t + 3 0 t ，n f = 1 7 0 ，a n dt h e3 1 t hp a i ro fc h r o m o s o m e sh a ds a t e l l i t e s t h e k a r y o t y p ec h a r a c t e r sb e t w e e ncp z i g f d s “i 刀a n do t h e rs e l a c h o m o r p h aw e r ea l s o d is c u s s e d 8 g e n e t i cd i v e r s i t i e so fc a g ，d s “刃f r o mx i a m e na n dz h a n g j i a n gw e r e i n v e s t i g a t e dw i t hm i t o c h o n d r i a lc o n t r o lr e g i o na n dc y t6g e n es e q u e n c e a n a l y s i s c o n t r o lr e g i o na n dc y t6g e n ef r a g m e n t sf r o m3 0i n d i v i d u a l sw e r e c l o n e dw i t hp c rm e t h o da n ds e q u e n c e d t h es e q u e n c e so ft h em i t o c h o n d r i a l c o n t r 0 1r e g i o n ， c y t6g e n ea n dt r n a p r og e n ew e r eo b t a i n e da n dh a db e e n s u b m i t t e dt og e n b a n k ( g e n b a n ka c c e s s i o nn u m b e r ： e u 3 6 3 7 4 0 e u 3 6 3 7 5 2 ) t h e c o m p l e t es e q u e n c e so ft h em i t o c h o n d r i a lc o n t r 0 1r e g i o n ，c y t6g e n ea n dt r n a p r o g e n ew e r e6 9b p ， 1 0 9 4 1 0 9 6b pa n d11 4 6b pr e s p e c t i v e l y t r n a p r og e n es e e m e d c o n s e r v a t i v e ， w i t h o u ta n yp 0 1 y m o r p h i s m a i o n g3 0s 锄p l e s ， t h e r ew e r e4 p 0 1 y m o r p h y i s ms i t e sw i t h5h a p l o t y p e sf o rc o n t r o lr e g i o ns e q u e n c ea n d1 0 p o l y m o r p h y i s ms i t e sw i t h7h a p l o t y p e sf o rc y t6g e n es e q u e n c e 1 1 4 6b pn u c l e o t i d eo fc y t69 6 n ee n c o d e d3 8 la m i n oa c i d s ，a n dt h ea m i n o a c i dc h a i nh a d3p 0 1 y m o r p h y i s ms i t e sw i t h4h a p l o t y p e s s a m p l e so fx i a m e n s t o c kh a d4h a p l o t y p e sw h il ez h a n g ji a n gs t o c ko n l y1h a p l o t y p e i ts e e m e dt h a tt h eg e n e t i cd i v e r s i t i e si nc y t6a n dc o n t r o lr e g i o nf r o m p z g ，d s “册i nx i a m e nw e r ec o m p a r a t i v e l yh i g h e rt h a nt h o s ei nz h a n g j i a n g ， t h o u g hb o t ha p p e a r e dr e l a t i v e l yl o w k e yw o r d s ：l 劢j d s c ：y - j “田p 上昌g f d s “田； c u l t u r eb i 0 1 0 9 y ； e m b r y o n i c d e v e l o p m e n t ； k a r y o t y p e ； m i t o c h o n d r i a ld n a 厦门大学学位论文原创性声明 本人呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立完成的研究成果。 本人在论文写作中参考其他个人或集体已经发表的研究成果，均在文 中以适当方式明确标明，并符合法律规范和厦门大学研究生学术活 动规范( 试行) 。 另外，该学位论文为( 。 ) 课题( 组) 的研究成果，获得( ) 课题( 组) 经费或实验室的资 助，在() 实验室完成。( 请在以上括号内填写课题 或课题组负责人或实验室名称，未有此项声明内容的，可以不作特别 声明。) 声明人( 签名) ：潍仰焘 0 0 8 年r 月矽日 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人同意厦门大学根据中华人民共和国学位条例暂行实施办法 等规定保留和使用此学位论文，并向主管部门或其指定机构送交学位 论文( 包括纸质版和电子版) ，允许学位论文进入厦门大学图书馆及其 数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、 硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇 编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。 本学位论文属于： () 1 经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文，于 年月日解密，解密后适用上述授权。 ( ) 2 不保密，适用上述授权。 ( 请在以上相应括号内打“ 或填上相应内容。保密学位论文 应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文，未经厦门大学保密 委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认 为公开学位论文，均适用上述授权。) 声明人( 签名) ：多和仰焘 斌年p 月加日 第一章绪论 第一章绪论 第一节条纹斑竹鲨的分类地位及研究概况 1 分类地位 条纹斑竹鲨 凸j - o s 叫- f 坳p ，嗣耵删( b e n n e t t ，1 8 3 0 ) ，俗称狗鲨、犬鲨， 英文名为w h i t e s p o t t e db a m b o os h a r k 。在比较早期的文献，如中国软骨鱼类志 u 、南海鱼类志幻和东海鱼类志嘲中，条纹斑竹鲨归属于鼠鲨目( l a i i l n i f o 珊e s ) ， 鼠鲨亚目( l 锄o i d e a ) ，须鲨科( 0 r e c t o l o b i d a e ) ，斑竹鲨属( 饧f d s 训j 砌) ，在 我国现行的主要分类著作，如中国鱼类系统检索伽、福建鱼类志蜘、鱼类分 类学嘲等文献中，条纹斑竹鲨归属于须鲨目( 0 r e c t o l o b i f o n i l e s ) ，须鲨亚目( 0 r e c t o l o b o i d e i ) ，须鲨科，斑竹鲨属。随着斑竹鲨亚科( h e m i s c y l i i n a e ) 被升格为斑竹 鲨科( h e m i s c y l i i d a e ) ，国际上新近的分类文献，如s h a r k so ft h ew o r l d 吲、f i s h e s o ft h ew o r l d ( 4 t he d ) 嘲、“f i s h b a s e 网站嘲、“中国鱼类系统分类i 盲鳗纲、 头甲鱼纲、软骨鱼纲川加1 及中国动物志m 1 等将条纹斑竹鲨归属于须鲨目( o r e c t o l o b i f o r m e s ) ，斑竹鲨科( h e m i s c ) r l i i d a e ) ，斑竹鲨属( 劬j - d s 喇j j 伽) 。 条纹斑竹鲨的同物异名主要有m ： 翻j - 叫j 姗勘以c 衄p 如豇骶衄( a n o n y m o u s b e n n e t t ，1 8 3 0 ) 伪脚s 川_ j 姗四日d 蚴( a n o n y m o u s b e n n e t t ，1 8 3 0 ) 5 踟j 删盆“脚加d 何晒 b e n n e t t ，1 8 3 0 & 们删册芒啪g r a y ，1 8 3 0 5 t 一j 删别衄眦如抬r 兀猡芒姗( b l e e k e r ，1 8 5 2 ) i i o s c y n iu b l 出a g i o s 嘞y a r i n t e r r 印t 锄趴e e k e r 。、8 观 2 形态特征 条纹斑竹鲨体修长。尾细长，长于头与躯干部合长。头长，稍平扁，上部微圆凸， 下部平坦。背面正中具一纵行皮嵴。吻颇长，向前狭小，前端钝尖。眼长椭圆形，上 侧位，无瞬膜，距吻端与距第一鳃孑l 约相等。鼻孔下侧位。具鼻口沟。前鼻瓣前部具 l 条纹斑竹鲨养殖生物学、核型和线粒体d n a 序列的研究 一尖长鼻须，后部宽圆，伸达口前，后缘分裂如细须，后鼻瓣前部半环形，后部薄褶 沿着鼻口沟外侧伸达口角，后缘也具细裂。口平横，下唇宽扁，连续成一横褶，后缘 游离波曲；上下唇褶均短，下唇褶被横褶掩盖。牙细小，三齿头型，侧齿头细小，多 行使用，每侧每行有1 2 1 3 齿。喷水孔椭圆形，比眼小，位于眼的后下方，后缘内 侧具突起。鳃孔5 个，狭小，第5 个最宽，后面3 个位于胸鳍基底上方，最后2 个 相互靠近( 原句中连续3 个最后，不太好。) 。背鳍2 个，大小相同或第一背鳍略大， 后缘几平直，下角不突出；第一背鳍起点与腹鳍基底后端相对或稍前；第二背鳍起点 距第一背鳍起点与距臀鳍基底中部上方约相等。尾鳍狭长，尾椎轴平直；上叶较狭： 下叶前部不突出，与中部连续，呈广圆形，中部与后部间具一缺刻，后部三角形突出， 与上叶相连，尾端圆形。臀鳍低平，接近尾鳍下叶，基底长等于尾鳍基底长的3 5 3 4 。腹鳍长方形，鳍端达第一背鳍基底后部下方。胸鳍宽，后缘和里缘广圆，外角 圆钝，基底几伸达第三鳃孔下方。体灰褐色，背侧面具1 2 1 3 条暗色横纹，横纹及 其边缘具许多白色斑点；在正中线上及横纹边缘有时具较大的黑色斑点，头上、体侧 和鳍上有时也不规则地分布许多细小的黑色斑点瓯1 1 1 。 3 分布及生活习性 条纹斑竹鲨栖息于浅海或内湾多贝、藻类生长的环境中，显示保护色。行动不甚 活泼，食软体动物、多毛类、虾蟹及底栖小型鱼类。体重一般1 1 5k g ，最大3 3 5k g ，体长可达1m 左右。卵生，福建沿海每年3 6 月生殖，为捕捞盛期，9 1 1 月产量也多，用鲨鱼延绳钓和流刺网等捕捞暇n 1 。 条纹斑竹鲨分布于中国、日本、菲律宾、泰国、马来半岛、印度及非洲东部和南 部海域，在我国分布于南海、台湾海峡和东海瞄，是南海最常见的软骨鱼类之一。 在闽南近海，条纹斑竹鲨资源丰富，全年均可捕到，是捕捞产量较高的鲨类之一 n 2 “羽，近几年的市场价格达每公斤1 2 0 元以上。条纹斑竹鲨离水后仍能存活近2 0 小 时，捕捞后易存活，易运输，是各水产市场、餐馆中最常见的鲜活食用软骨鱼类。各 个水族馆也经常可见n 劓。 4 机体组织成分的研究 杨萍等( 2 0 0 2 ) 对条纹斑竹鲨肌肉营养成分的分析结果表明，条纹斑竹鲨的粗蛋 2 第一章绪论 白含量为2 1 7 ，纯蛋白含量约为1 4 8 ，粗脂肪含量为1 2 3 ，具有高蛋白、低脂肪 的特点。其蛋白质的营养价值高，氨基酸价为8 8 ，肌肉与软骨蛋白质的氨基酸组成均 含有1 8 种氨基酸，是优质的蛋白质源；无机质含量丰富，特别是m g 、f e 、z n 、s e 等 微量元素，尤其是s e 含量达1 4 4 1 0 呻，是含硒量很高的水产品n 5 1 。 陈丽华等测定了闽南近海条纹斑竹鲨肌肉中的水分、灰分及能值，其水分含量为 7 8 8 6 ，灰分含量为4 1 2 ，能值为2 1 9 1k j g ，水分、灰分及能值与体长、体重无 明显关系，但随季节的变化而变化。此外，条纹斑竹鲨肌肉的水分、灰分与能值之间 存在明显的相关关系，随着水分的升高，灰分略有下降，而热值显著下降n 叼。 刘丽华等研究了闽南近海条纹斑竹鲨的肝体指数和肝脏含油率的周年变化及其 与年龄的关系，结果表明条纹斑竹鲨的肝体指数( l s i ) 的变化主要由肝脏含油率的 波动引起，而肝脏含油率的变化与生殖活动有关，并根据研究结果推断条纹斑竹鲨的 初次性成熟年龄应为3 龄，推测其生殖季节在3 月至6 月之间n 钉。 此外，刘丽华还详细研究了闽南近海条纹斑竹鲨体内水分、粗脂肪和脂肪酸含量 的变化n 町。 c o r n i s h 等测量了采自香港南部海域条纹斑竹鲨体内的金属( a g 、c d 、c r 、c u 、 、n i 、p b 和z n ) 、多氯化联( 二) 苯( p c b s ) 和有机氯杀虫剂的浓度，结果表明不 同金属在不同机体组织的浓度不同，c r 、c u 、和z n 的浓度随着鱼体增大而减少。 肌肉的总p c b s 含量为1 0 5 6 4 7 7 ln g g ( 湿重) ，总d d t s 含量为0 6 0 2 2 3 5 5 n g g n 明。可以认为，条纹斑竹鲨不会在体内积累大量的污染物，是人类安全的食物。 刘晓春等运用薄层层析和硅酸柱层析法，分析了闽南近海条纹斑竹鲨肝脏的脂质 组成特点，结果表明，条纹斑竹鲨的肝脂组成与其它鲨鳐类非常相似，以甘油三酯为 主要成分。此外，还包括少量的烃类、胆甾醇酯、游离脂肪酸、甾醇和磷脂等。对脂 肪酸组成的测定结果表明，条纹斑竹鲨肝油的脂肪酸组成与其它几种鲨鳐类相似，主 要的脂肪酸包括1 6 ：o ( 1 8 6 2 1 5 ) ，1 8 ：o ( 6 8 7 8 9 6 ) ，1 8 ：1 ( i ) 7 ( 6 9 7 6 ) ， 1 8 ：1 9 ( 9 9 1 1 3 ) ，1 6 ：1 ( 5 1 6 4 ) ，2 0 ：4 ( i ) 6 ( 4 6 5 5 ) ，2 2 ：4 ( 1 ) 6 ( 6 3 8 2 9 6 ) 和2 2 ：6 ( 1 ) 3 ( 1 0 8 1 1 6 ) 舯u 。同其它大多数鲨鳐类一样，2 2 ：6 ( i ) 3 是条纹 斑竹鲨肝脏含量最高的脂肪酸成分口。此外，刘晓春等还分析测定了条纹斑竹鲨肝油 的理化常数( 比重、皂化价、酸价、碘值) 和肝脏及肝油中的角鲨烯含量蚴。 3 条纹斑竹鲨养殖生物学、核型和线粒体d n a 序列的研究 5 生殖生物学方面的研究 胡灯进初步研究了闽南近海条纹斑竹鲨的生殖生物学，结果表明闽南近海条纹斑 竹鲨雌鱼和雄鱼的性成熟年龄均为3 龄，交配高峰期是1 2 月至翌年3 月，生殖高峰 期是5 6 月，生殖周期为1 年嘲。 陈明茹等对条纹斑竹鲨雌性生殖系统的研究表明，条纹斑竹鲨为卵生种类，其雌 鱼仅具右侧卵巢，呈葡萄状裸露型，怀卵量约二三百个，卵细胞不同步发育，成熟卵 径为2 0 3 0 珊，卵中含大量卵黄。条纹斑竹鲨卵壳腺的大小随鱼体的生长而增大， 达到性成熟时约8 0m 5 0m 。卵经过卵壳腺时受精，受精卵外被一厚而坚韧的卵鞘， 为黄褐色、椭圆四角形。 c h e nw _ k 等对采自台湾北部的4 9 l 尾条纹斑竹鲨的繁殖生物学也进行了研究，结 果表明条纹斑竹鲨的雌雄性比为0 6 5 ，雌鱼和雄鱼的初次性成熟平均全长分别为6 4 9 c m 和6 5 6c m 。根据性成熟系数( g s i ) 和解剖观察，推测其产卵季节为3 月5 月， 而交配季节为1 2 月1 月。交配季节与产卵季节的差异表明雌鱼体内可以储存精子用 于受精。平均6 7d 产卵1 3 粒，产卵持续2 个月，平均产卵量为8 3 8 个卵。 孵化率为o 2 7 ，孵化时间为1 0 7 9 3d ，孵化积温为2 3 7 2 2 8 3 5 d 嘲。 此外，m i k i 等描述了水族馆中的条纹斑竹鲨的交配、产卵、孵化、胚胎发育和生 长帅】。 6 活性物质的研究 叶波平等开展了条纹斑竹鲨肝脏再生相关活性成分的研究。通过肝脏部分切除模 型( 创伤诱导) 比较并分析了条纹斑竹鲨肝脏再生过程中的差异表达基因，鉴定了3 1 7 种与鲨鱼肝脏再生相关的功能基因，并进一步利用基因重组的方法分别获得了1 种在 再生过程中上调表达基因和1 种在再生过程中下调表达基因的重组产物，体内外活性 研究显示前者的表达产物对小鼠脾淋巴细胞具有显著的刺激增生能力，并具有促进肝 细胞增生的活性，而后者的重组产物则对多种肿瘤细胞( 如：人白血病细胞株乩一6 0 、 肺癌细胞株a 5 4 9 以及肝癌细胞株s m m c 一7 7 2 1 等) 具有强烈的抑制作用嘲。 叶波平等还比较了鲨鱼肝脏在不同再生阶段的蛋白质组变化，从中鉴定了2 0 3 种 在肝再生过程中表达差异在3 倍以上的蛋白质，通过质谱技术鉴定了其中的3 5 种蛋 白质，这些蛋白质分别在蛋白质的折叠、解聚、组装、转运、离子通道的激活、d n a 4 第一章绪论 复制、细胞分裂、r n a 的转录调控以及细胞的程序化凋亡过程中发挥着重要的作用嗍。 此外，在鲨鱼肝脏蛋白质组学的研究过程中，发现其中的s 一腺苷甲硫氨酸合成酶在肝 脏再生的早期阶段表达都明显上调，再生0 5h 时的表达量达到峰值，该酶类的高表 达导致肝组织中s 一腺苷甲硫氨酸的蓄积，暗示了该代谢产物对肝脏的再生有一定的促 进作用口。 黄凤杰等研究了取自条纹斑竹鲨幼鱼肝脏的鲨肝活性肽s 一8 3 0 0 对四氯化碳小鼠 肝损伤的保护作用。结果表明，s 一8 3 0 0 能明显减轻四氯化碳所致小鼠急性肝损伤，降 低血清g p t 、g c r r 、l d h 活性及降低肝组织m d a 含量，增加肝组织g s h 含量和提高s o d 活性，对急性肝损伤有明显的保护作用嘲。 宋丽娜等采用粗提、超滤、柱层析法从天然健康的条纹斑竹鲨肝脏中分离纯化得 到了1 种鲨鱼肝刺激多肽( s h s p ) ，通过姒l d i - t o f m s 检测，s h s p 的分子量为4 8 9 9 7 1 5 u ，其紫外特征吸收波长为2 7 3 1 咖。采用m 1 v r 法，利用人肝癌s m m c 一7 7 2 1 细胞和s t z 损伤的小鼠胰岛b 细胞瘤细胞检测了s h s p 的刺激肝细胞再生的生物活性，结果显示， s h s p 能够显著刺激人肝癌细胞s m m c 一7 7 2 1 再生；对s t z 损伤的n i t 一1b 细胞，s h s p 具有保护细胞完整性和修复细胞形态的作用嘲。 7 形态结构及摄食方面的研究 在形态结构方面，r a m s a y 等研究了条纹斑竹鲨摄食器官的解剖学和功能形态学阻 强】 o l o w r y 等研究了条纹斑竹鲨的摄食行为和头骨形态的个体发生嘲，通过测量摄食 时的吸力和口前的水流量化了条纹斑竹鲨早期发育阶段的捕食能力口订。 m o t t a 等比较了鲨鱼的摄食行为和摄食机制，认为条纹斑竹鲨的摄食行为与普通 鲨鱼的摄食行为不同汹1 。 张雅芝等研究了东山湾条纹斑竹鲨的食性，结果表明条纹斑竹鲨以底栖生物为主 食( 出现频率百分组成为6 6 7 ) ，包括多毛类、短尾类和长尾类( 细螯虾) ，还摄食 少量游泳动物( 出现频率百分组成为3 3 3 ) ，包括头足类和鱼类，其营养级为3 o ， 属于中级肉食性鱼类嘲。 此外，w i l g a 等研究了条纹斑竹鲨胸鳍的形态和功能。 条纹斑竹鲨养殖生物学、核型和线粒体d n a 序列的研究 8 病害方面的研究 伍献文( 1 9 2 7 ) 首先在厦门条纹斑竹鲨胃、鳃腔和咽处发现一线虫新种：鲨鱼副 细线虫胁a j 印芒嬲妙口j j j jw u 。尹文真、张乃新( 1 9 8 3 ) 报道了条纹斑竹鲨胃中的 斑竹鲨副细线虫尸a 髓印芒船饧j d s c j j jy i ne tz h a n g h 罗大民对斑竹鲨副细线虫也进行了研究，认为将其归入螺线虫属较为合理，重新 将斑竹鲨副细线虫定名为斑竹螺线虫伪- ，j 7 e 5 徽动力d 卯刀j j ，( y i ne tz h a n g ) 。 l u o ( 罗大民) 等在闽南一台湾渔场的条纹斑竹鲨体内发现螺线虫一新种舱j 一 n e 阻am in n a n e n s i 孝嘲。 l i 等描述了采自厦门海域条纹斑竹鲨回肠螺旋瓣的绦虫新种场心p r 招x ，a 册疗一 鲫酊$ 这是场出r 妇属在中国的首次发现。 此外，c l a r k 报道在孵出的3 尾条纹斑竹鲨幼鱼发现了白化病嘲。 9 遗传学与分子生物学相关研究 吴冰等用6 种限制性内切酶分析了4 尾条纹斑竹鲨的线粒体d n a ( m t d n a ) 。6 种 内切酶在条纹斑竹鲨m t d n a 分子上分别具有0 至2 个切点，m t d n a 分子大小为1 6 6k b 。 根据单酶和双酶完全酶解片段的大小，构建了条纹斑竹鲨m t d n a 的限制性酶切图谱。 此外，采用1 1 种随机引物对4 尾条纹斑竹鲨的基因组进行了r a p d 检测，1 1 种引物 在每个个体上扩增的d n a 片段总数在7 7 8 4 之间，个体之间的相似率在9 0 9 6 以上n 7 1 。 目前尚未见其他有关条纹斑竹鲨遗传多样性研究的报道。 赵艳景等建立了条纹斑竹鲨肝脏的部分切除模型，获得了再生2 4h 的条纹斑竹 鲨肝组织，分离了再生肝组织的总r n a ，纯化了m r n a ，利用含b a i i l h i 酶切位点的0 l i g o ( d t ) 惦为引物合成c d n a 第一链，通过末端转移酶在c d n a 第一链3 末端加入o l i g o ( d c ) 尾，进而以o l i g o ( d t ) 。和含h i n d i i i 酶切位点的o l i g o ( d g ) 。为引物，通 过l d p c r ( 1 0 n g d i s t a n c e p c r ) 方法合成双链c d n a ，将双链c d n a 经b a f l l h i 和h i n d i i i 双酶切，通过t 4 d n a 连接酶连接到经相同酶切的p u c l 9 载体后构建成c d n a 文库。对 文库质量的分析结果表明，该c d n a 文库容量至少为4 9 2 1 0 5 个ugd sc d n a ，重 组率达9 6 7 。鲨鱼再生肝组织c d n a 文库的成功构建为进一步通过差异显示技术筛 选、克隆肝再生过程中差异表达的相关功能基因奠定了良好的基础嘲。 m e h t a 等对条纹斑竹鲨的1 个低密度脂蛋白( l d l ) 受体c d n a 进行克隆和测序， 6 第一章绪论 结果表明l d l 受体的所有5 个功能区与4 亿5 千万年前的形式类似，具有与哺乳类 和两栖类相同的对应结构。 1 0 代谢方面的研究 t u l l i s 等研究了条纹斑竹鲨胚胎的生长和代谢的变化，并与鸟类和爬行类的胚胎 进行了比较。结果表明，条纹斑竹鲨的代谢在胚胎发育过程中出现一个峰值，体质量 呈s 形增长，类似于平胸类鸟、鳄鱼和一些龟类。发育的总耗氧率高于爬行类和许多 鸟类，这主要因为其孵化时间长呻小。t u l l i 等还研究了条纹斑竹鲨对环境温度改变 所引起的新陈代谢变化和生化反应嘲。 1 1养殖和人工繁殖方面的研究 条纹斑竹鲨的养殖和人工繁殖的报道很少。m o t o y a s u 等于1 9 9 8 年进行了条纹斑 竹鲨的人工授精试验，共获得4 3 个卵，受精率为2 3 3 嘟1 。广东省湛江市水产技术推 广中心站与湛江市异达养殖有限公司合作，收购天然条纹斑竹鲨作为亲鱼，开展人工 繁殖和养殖试验，共获得受精卵7