圣湘HPV16.18临床检测意义及竞品简析-20160411.doc

圣湘HPV16/18产品临床检测意义及竞品简析一、人乳头瘤病毒与宫颈癌在妇女的肿瘤病中，宫颈癌的发生率仅次于乳腺癌，位居第二位。全世界每年都有大约20万妇女死于这种疾病。据世界卫生组织估计，我国每年新发病例13.1万，约占世界宫颈癌新发病例的28.8%，发生率是发达国家的6倍， 80%的患者在确诊时已经发展为浸润癌，而这些都归因于我国妇女人群中宫颈癌的早期筛查尚未普及。HPV感染是子宫颈癌的主要致病因素，99.7%宫颈癌患者存在HPV感染。目前，宫颈癌是人类所有癌症中唯一原因明确、唯一可以早期预防和治疗、唯一可以彻底根除的癌症。其早期治疗的5年生存率接近100%，晚期治疗5年生存率为20-50%。筛查是目前预防和早期诊断宫颈癌的主要手段。世界各国的妇产科学会均推荐将HPV检测用于宫颈癌的早期筛查，以浓缩高风险人群，便于进行有效的监控、评估宫颈癌的发生风险，早期发现宫颈癌，降低宫颈癌的发病率。二、HPV16/18核酸检测意义1、细胞学与HPV联合筛查中，对细胞学阴性高危HPV阳性的人群进行宫颈癌风险分层，及时发现细胞学正常结果中存在CIN的高危人群一项美国最大型的宫颈癌筛查临床研究发现：细胞学漏诊的高度宫颈上皮内瘤病变中，有1/3为HPV16和/或HPV18阳性。细胞学阴性但HPV16阳性的女性，发生CIN2以上病变的风险为13.6%。细胞学阴性但HPV18为阳性的女性，发生CIN2以上病变的风险为7%。细胞学ASC-US、高风险HPV群组阳性者发生CIN2及更高级别病变的风险，与HPV16和/或18阳性但细胞学阴性者的风险相当，应该立即进行阴道镜检查。所以，在筛查中结合HPV16/18基因检测，可以更好的对风险进行分层管理。2013年ASCCP新版指南特别提出要对细胞学阴性、HPV阳性的30岁以上女性进行HPV16/18基因检测（见下图）2、对ASCUS和LSIL的人群进行分流管理，减少过度诊疗ASCUS是临床医生和细胞学技术人员及受检者遇到的最大困惑。其数量大且去向不明，较难确认是正常，抑或已经出现CIN。在美国，ASCUS和LSIL的发生率达1.67.7 %，其中15%30%是CIN 2/CIN 3。可见ASCUS和LSIL也是一个不容忽视的问题，对于ASCUS和LSIL进行分流非常必要。针对ASCUS和LSIL的分流检测，目前有三种常用方法：1、直接阴道镜检联合活检。这种方法不仅加重费用，还会对身体产生创伤，不适合大范围推广；2、重复细胞学追踪，受检者需要在第12、18、24个月时进行多次活检，但对于大多数可能正常的患者，复查细胞学会耗费很多时间，加重经济和精神负担；3、HPV DNA检测是被公认为最有效的检测方法。较之阴性患者，HPV阳性患者发生CIN1的机会高3.8倍，发生CIN2和CIN3的机会高12.7倍。HPV阳性能预测不同级别CIN的发生，早期发现重度鳞状上皮内病变（HSIL），减轻病人焦虑，降低重复检查的花费。3、HPV 16、18检测可评估HPV感染的近期和远期风险，医生可以据此判断是否需立即予以临床处理 CIN2期以上人群中：老年妇女是年轻妇女近4 倍，主要与HPV16/18相关; 30岁HPV16/18（+）的人群中，1/10为宫颈癌前病变，但细胞学正常; 感染HPV16和/或18(+)发展为宫颈癌前病变的风险比HPV阴性女性高35倍。Wright TC Jr, Stoler MH, Behrens CM,et al.Am J Obstet Gynecol. 2012 Jan;206(1):46.e1-46.4、指导HPV疫苗的研究和使用目前国内市场HPV疫苗即将上市，主要将是二价疫苗即16,18型和四价疫苗即6,11,16,18型，不同国家、不同人群引起宫颈病变的HPV基因型及感染率存在差异，HPV16/18型的检测，能够有效指导HPV疫苗的使用。三、为什么不做16，18的分型1. HPV16，18型是宫颈癌中最常见的高危感染型，且这两种型别的致癌风险均高于其他HPV高危型；2. 目前各个筛查方案及临床指南在16/18阳性的临床处置管理均相同；3. 无临床基础研究表明HPV16和HPV18型在宫颈癌及癌前病变发展中存在明显统计学上差异，没有相关指南提示需要这两种型别进行区分。最新2015年ASCCP指南指出，HPV16/18阳性，可直接接受阴道镜检四、国内同类HPV16/18核酸检测产品比较HPV 16/18的检测对于宫颈癌早期筛查诊断、细胞学ASCUS分流等应用方向意义重大。目前国内同类试剂较多，如达安、科华、之江、泰普等厂家均有同类产品，均未对16与18型进行分型检测，其主要性能情况比较如下：性能参数圣湘生物达安科华之江检测基因型16/1816/1816/1816/18提取方法一步法煮沸法煮沸法煮沸法检测灵敏度400copies/ml10000 copies/ml-1000 copies/ml定量结果定量定性定性定性相比较而言，上述国产试剂主要采用煮沸法来裂解病毒提取核酸，由于煮沸法本身的弊端，容易造成核酸模板丢失、PCR抑制物去除不彻底以及气溶胶污染等问题，从而使得试剂的灵敏度不高、线性范围窄、抗干扰能力弱，满足不了临床诊疗的本质需求。圣湘HPV16/18试剂采用创新的一步法技术，独创的核酸释放剂能够在常温下快速裂解病毒，同时在核酸释放的过程中能够将蛋白等杂质包裹起来，实现准确、快速的诊断。因此，与同类竞品相比，圣湘生物HPV16/18核酸检测试剂具有如下优势： 操作简便，污染少采用领先的一步法核酸快速提取、纯化及扩增操作，无需煮沸、离心和换管，简单的操作融汇高效的扩增体系，提高了工作效率，减少了污染风险，轻松实现PCR检测。国内主流的煮沸法技术 圣湘一步法技术煮沸法流程加入处理液A+样本 离心10min 去上清，加入处理液B 煮沸10min 离心10min取上清+反应液，上机检测 圣湘一步法流程核酸释放剂+样本 静置10min加入反应液，上机检测 定量结果可供参考圣湘生物试剂盒内设置了定量参考品，能够对样本中HPV16/18型病毒进行定量，定量结果可供参考，指导治疗及临床随访。 全程常温化学裂解常温化学裂解样本中的病毒以制备核酸模板，较之落后的煮沸法等技术，病毒核酸模板多、无丢失，检测灵敏度更高，且有效降低气溶胶等污染风险。 全程的内标监控内标全程参与样本制备、核酸扩增和荧光检测过程，实时监控假阴性风险，提高检测的可靠性。 UNG酶与dNTPs防污体系每个反应中加入UNG酶与dNTPs防污体系，有效防止扩增产物的气溶胶污染。 自动化处理系统圣湘一步法技术拥有先进的自动化处理系统，Natch S全自动核酸提取系统及FAST DP01全自动核酸提取系统，能够实现高通量快速检测，最大程度减少人工操作误差，保证检测结果的均一性和准确性。 节约运营成本时间成本&设备成本煮沸法一步法操作时间（48个样品）60min15min操作人员要求高低实验设备离心机、水浴或干浴锅等无需离心、加热等设备实验消耗品离心管、Tip头等，Tip头的用量是当次实验样品数的58倍无需离心管；Tip头的用量仅与当次实验的样品数相当五、圣湘HPV16/18核酸检测产品部分客户圣湘HPV16/18产品使用客户名单客户名称客户名称客户名称四川大学华西附属医院重庆市妇幼保健院第三军医大学附属西南医院山西省中西医结合医院山西医科大学附属第一医院第四