GB 9695.24-1990 肉与肉制品 胆固醇含量测定.pdf

中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准肉与肉制品胆固醇含里测定G B 9 6 95 . 2 4 一 9 0Me a t a n d m e a t p r o d u c t s -Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f c h o l e s t e r o l1 主题内容与适用范围 本标准规定了肉与肉制品中胆固醇含量的测定方法。 本标准适用于肉与肉制品中胆固醉含量的测定。2 引用标准 G B 9 6 9 5 . 1 肉与肉 制品 游离脂肪含 量的测定3 原理 肉与肉制品中的脂类经皂化后， 胆固醉作为不皂化物被提取出 来， 并与一定量的内 标物混合后一起注入气相色谱柱， 求出胆固醇与内 标物的峰面积比， 根据工作曲线计算胆固醉的重量， 以 求得肉与肉 制品中胆固醇含量.4 试剂 所用水均为蒸馏水或相当纯度的水。4 . 1 无水乙醚。4 . 2 抓仿( G B 6 8 2 ) ,4 . 3 1 m o l / L 氢氧化钾( G B 2 3 0 6 ) / 乙醇( G B 6 7 8 ) 溶液。4 . 4 无水硫酸钠。4 . 5 胆固醉: 1 . 0 m g / m l , 氯仿溶液。4 . 6 内标溶液:4 . 6 . 1 5 - a 胆幽烷/ 氯仿标准溶液: 1 . 0 m g / m L .4 . 6 . 2 菜油醇/ 氯仿标准溶液: 3 . 0 m g / m L .4 . 6 . 3 胆固醇与5 -胆街 烷混合液: 上述两种标准液等体积混合。5 仪器和设备5 ， 1 实验室常规仪器。5 . 2 气相色谱仪， 配有F I D检测器。6 试样 按照G B 9 6 9 5 . 1 得到的脂肪。7 . 1分析步骤 不皂化物的提取称取1 . 0 0 g 脂肪， 置于1 0 m L 容量瓶中 用氯仿定容并摇匀。国家技术监督局1 9 9 0 一 1 1 一 1 5 批准准确量取该试液1 - - 5 m L , 置于2 5 m L 1 9 9 1 一 1 0 一 0 1 实施GB 9 6 95 . 2 4 一 9 0具塞试管中， 准确加入0 . 5 1 m L内标物溶液( 4 . 6 . 1 ) ， 然后将氯仿蒸干。加入 1 m o l / L氢氧化钾溶液5 m L , 装上冷凝管， 在 8 5 9 5 水浴上缓缓皂化 1 h 。取下冷却至室温， 全部移入 5 0 m L 分液漏斗中， 用水1 0 m L 洗具塞试管， 洗液并入分液漏斗， 加乙醚 1 0 m L 轻轻振摇， 静置分层后， 将水相放入原试管中，加乙醚 1 0 m L 振摇， 待分层后， 将乙醚移入分液漏斗内。 再用1 0 m L 乙醚提取一次， 此时分液漏斗中共有3 0 m L 溶液。用水2 -3 m L 洗涤乙醚液， 分层后， 弃去水相， 用无水硫酸钠 l o g 干燥后， 将乙醚层移入另一具塞试管中， 通氮气吹干后， 加入乙 醇1 m L ,了 . 2 色谱条件7 . 2 . 1 色谱分离条件选择: 对胆固醉峰要求其理论塔板数不少于1 6 0 0 ; 胆固醇与菜油醇二者峰分辨率不小于2 . 2 ; 胆固醇的保留时间在8 - 1 2 m i n 之间; 胆固醇峰强度为满量程的0 . 2 5 -0 . 5 .7 . 2 . 2 2 %o v - 1 / c h r o m o s o r b W( 6 0 -8 0 目) 3 m m X 2 m ,7 . 2 . 3 柱温: 2 6 0 C。7 . 2 . 4 进样口及检测器温度: 3 0 0 C o7 . 2 . 5 载气( 高纯氮) 流速: 6 0 m L / m i n ,7 . 3 工作曲线制作7 . 3 . 1 不同配比的胆固醇与5 - a 胆菌烷混合标准液:序号12345678胆固醉, m g0 . 5 50 . 8 81 . 1 00 . 5 50 . 8 81 . 1 01 . 1 0z . 2 05 -胆w烷, m g0 . 5 5C . 5 50 . 5 51 . 1 00 . 1 01 . 1 01 . 1 51 . 5 5 以表中所列举的不同组合的胆固醉标准液和5 - a 胆w烷混合样品置于具塞试管中. 将溶剂通氮气吹干后， 加入1 m L 乙醇， 取1 -3 匹注人色谱柱中。 从所得到气相色谱图求出胆固醇和5 - a 胆w 烷各峰的面积比， 以峰面积比为纵坐标， 质量比为横坐标， 制作工作曲 线， 此线斜率的倒数为k 值。7 . 3 . 2 试样的气相色谱分析。8 分析结果的计算X 一 A ,/ A s杀 k x N S X fa t% X 1 0 0式中: X- 一 样品中胆固醇含量, m g 八0 0 g ; 击- 一 胆固醉的峰面积; A , - - 5 - a 胆w烷的峰面积; k - 一 由 工作曲 线求得的胆固醉和5 - a 胆W 烷的质量比与峰面积比 的比 值; 环 -. 脂类试样中添加的内标物的质量, m g ; f a t %一 样品中脂肪的含量; W- 一 脂肪质量， 9 。 当符合允许差的要求时， 取两次测定的算术平均值作为结果， 精确至。 . 1 m g 八0 0 g e9 允许差 同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超