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文档简介
基因工程的应用,专题基因工程,一、植物基因工程硕果累累,哪些转基因作物已进入大规模商业化应用阶段?,转基因大豆、玉米、棉花和油菜,植物基因工程技术主要用于哪些方面?,提高农作物的抗逆能力(如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等),以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面.,(一)抗虫转基因植物,1.虫害给农作物带来了哪些影响? 传统农业如何防治害虫? 有哪些不足?,2.现在已有哪些抗虫植物问世?,3. 抗虫基因,Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、 淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等,请阅读P18生物资料技术卡,了解一些抗虫基因的抗虫机理。,4.抗虫棉的目的基因是什么?目的基因从何而来? 5.我国的转基因抗虫棉取得了哪些进展?,(二)抗病转基因植物,1.什么是病原微生物?有哪些种类?,引起生物生病的微生物,主要有病毒、真菌和细菌等,2.为什么说常规育种很难培育出抗病毒的新品种?,3.在抗病转基因植物中使用最多的是什么基因?,病毒外壳蛋白(coat protein,CP)基因; 病毒的复制酶基因,拓展:在抗病毒转基因植物中,为什么使用病毒外壳蛋白基因可以抗病毒侵染?,关于病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入植物后的抗病毒机理,目前有几种假说。一种假说认为:CP基因在植物细胞内表达积累后,当入侵的病毒裸露核酸进入植物细胞后,会立即被这些外壳蛋白重新包裹,从而阻止病毒核酸分子的复制和翻译。另一种假说认为:植物细胞内积累的病毒外壳蛋白会抑制病毒脱除外壳,使病毒核酸分子不能释放出来。然而最近的研究表明,如果将病毒的外壳蛋白的AUG起始密码缺失,使之不能被翻译,或者将外壳蛋白基因变成反义RNA基因,整合到植物细胞染色体上,转基因植物则有很好的抗性。因此,有人认为抗性机理不是外壳蛋白在起作用,而是CP基因转录出RNA后,与入侵病毒RNA之间的相互作用起到了抗性作用。,3.在抗真菌转基因植物中使用什么基因?,几丁质酶基因和抗毒素合成基因,转黄瓜抗青枯病基因的甜椒,(三)其他抗逆转基因植物,1.哪些环境条件会造成农作物低产、减产?,盐碱、干旱、低温和涝害等,2.盐碱和干旱对农作物的危害与什么有关?,细胞内的渗透压调节,在抗盐碱和抗干旱作物中使用了什么基因?,调节细胞渗透压的基因,3.转基因耐寒的烟草和番茄中哪种目的基因提高了其抗寒能力?目的基因从何而来?,鱼的抗冻蛋白基因,4.抗除草剂基因有何用途?,喷洒除草剂时,杀死田间的杂草而不损伤作物,(四)利用转基因改良植物的品质,人体(或其它脊椎动物)必不可少,而机体内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸,称必需氨基酸。 必需氨基酸共有种:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸(甲硫氨酸)、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。 如果饮食中经常缺少必需氨基酸,可影响健康。 另外12种氨基酸是人体细胞能够合成的叫做非必需氨基酸。,你知道哪些食品中缺少必需氨基酸? 如何用转基因的方法加以改良?,将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物 改变必需氨基酸合成途径中某种关键酶的活性,转基因延熟番茄的目的基因是什么?,控制番茄果实成熟的基因,转基因矮牵牛的目的基因是什么?,与植物花青素代谢有关的基因,异想天开,总结:基因工程在农业上的应用,(1)高产、稳产和具优良品质的品种 用基因工程的方法可以改善粮食作物的 蛋白质含量。如“向日葵豆”植株。 (2)抗逆性品种 将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作物体内,将从根本上改变作物的特性。如转基因抗虫棉。,将人的生长激素基因和牛的生长激素基因分别注射到小白鼠受精卵中,得到的“超级小鼠”。,生长快、肉质好的转基因鲤鱼(中国),超级羊,(一)用于提高动物生长速度,导入外源生长激素基因,二、动物基因工程前景广阔,动物品种改良、建立生物反应器、器官移植等,(二)用于改善畜产品的品质,举例说明,将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大减低。,(三)用转基因的动物生产药物,设问:就基因药物而言,最理想的表达场所是哪里?,转基因动物的乳腺。,(1)乳腺是一个外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。 (2)从乳汁中获取目的基因产物,产量高,易提纯,表达的蛋白质已经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性。 (3)从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时,转基因动物又可无限繁殖。,设问:为什么乳腺能成为基因药物最理想的表达场所呢?,将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的受精卵中,将受精卵送入母体,使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。,乳腺生物反应器,乳腺生物反应器的优点:产量高;质量好;成本低;易提取。,获取目的基因(例如血清白蛋白基因) 构建基因表达载体(在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子) 显微注射导入哺乳动物受精卵中 形成胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物(只有在产下的雌性个体中,转入的基因才能表达)。,思考:用基因工程技术实现动物乳腺生物反应器的操作过程是怎样的?,简述培育可以生产乙肝疫苗(乙肝病毒表面抗原)的转基因牛的方法步骤。, 用限制酶从乙肝病毒DNA中获取表面抗原基因; 将抗原基因和乳腺蛋白基因的启动子等 调控组件同时插入质粒,构建基因表达载体; 通过显微注射的方法导入山羊的受精卵; 检测筛选出成功转化的受精卵,培养成胚胎; 将胚胎植入代孕母牛,使其生长发育转基因牛.,青岛森淼实业有限公司,乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),导入人基因具特殊用途的猪,(四)用转基因动物作器官移植的供体,利用基因工程对猪的器官进行改造,方法:将器官供体基因组导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官,背上长人耳的老鼠,将目的基因导入到动物的受精卵里,目的基因若与受精卵染色体DNA整合,细胞分裂时,该基因随染色体的倍增而倍增,使每个细胞中都带有目的基因,使性状得以表达,并稳定地遗传给后代,从而获得基因产品。这样一种新的个体,称为转基因动物。,总结:什么叫转基因动物?,基因工程在畜牧养殖业上的应用主要是什么?,繁殖具有抗病能力、高产仔率、高产奶率和高质量的皮毛等优良品质的转基因动物。 该过程的重要步骤是通过感染或显微注射技术将重组DNA转移到动物受精卵中。,植物方面 提高植物的抗虫、抗病、抗逆性 改良植物的品质 动物方面 提高动物生长速度 改善畜产品的品质 用转基因动物生产药物 用转基因动物作器官移植的供体 研制药物 基因治疗,1.在传统的药品生产中,某些药品如胰岛素、干扰素等直接从生物体的哪些结构中提取?,从生物的组织、细胞或血液中提取。,2.传统生产方法的缺点:,由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。,三、基因工程药品异军突起,3.可利用什么方法来解决上述问题?,利用基因工程方法制造转基因的工程菌,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。,工程菌:用基因工程方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。,基因工程药品包括:细胞因子(即淋巴因子如白细胞介素2、干扰素)、抗体、疫苗、激素等,胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取45g胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%50%。,基因工程药品 胰岛素,治疗侏儒症的唯一方法,是向人体注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前,要获得生长激素,需解剖尸体,从大脑的底部摘取垂体,并从中提取生长激素。 现可利用基因工程方法,将人的生长激素基因导入大肠杆菌中,使其生产生长激素。人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于6万具尸体的全部产量。,基因工程药品 生长激素,干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白。干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染,是一种抗病毒的特效药。此外干扰素对治疗癌症和某些白血病也有一定疗效。传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取,每300L血液只能提取出1mg干扰素。19801982年,科学家用基因工程方法在大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素,是传统的生产量的12万倍。1987年上述干扰素大量投放市场。,基因工程药品 干扰素,利用微生物生产药物的优越性何在?,利用微生物生产蛋白质类药物,是指将人们需要的某种蛋白质的编码基因,构建成表达载体后导入微生物,然后利用微生物发酵来生产蛋白质类药物。有以下优越性: (1)利用活细胞作为表达系统,表达效率高,无需大型装置和大面积厂房就可以生产出大量药品。(2)可以解决传统制药中原料来源的不足。利用基因工程菌发酵生产就不需要从动物或人体上获取原料。(3)降低生产成本,减少生产人员和管理人员。,1、基因治疗概念:,四、基因治疗曙光初照,把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,是治疗遗传病的最有效的手段。 (把特定的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,从而达到治疗疾病的目的),2、实例:,将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中,再将这种淋巴细胞转入患者体内。,(1)对严重复合型免疫缺陷症的治疗,1990年9月14日,安德森对一例患ADA缺乏症(腺苷脱氨酶缺乏症)的4岁女孩进行基因治疗。这个4岁女孩由于遗传基因有缺陷,自身不能生产ADA,先天性免疫功能不全,只能生活在无菌的隔离帐里。他们将这个女孩的白血球进行基因改造,使有缺陷的基因被健康的基因替代,然后把含正常白血球的溶液输入她左臂的一条静脉血管中。在以后的10个月内她又接受了7次这样的治疗,同时也接受酶治疗。后来,她的免疫功能日趋健全,能够走出隔离帐,过上了正常人的生活,并进入普通小学上学。,复合型免疫缺陷症,复合型免疫缺陷症患者缺失腺苷酸脱氨酶基因(A基因),造成体内缺乏腺苷酸脱氨酶。简述用基因治疗方法治疗复合型免疫缺陷症的过程。, 从患者体内分离出淋巴细胞进行培养; 用限制酶从正常人体细胞中获取A基因,插入 质粒构建基因表达载体; 用显微注射法将重组质粒导入淋巴细胞; 检测筛选出成功转化的淋巴细胞,转入患者 体内; 一段时间内,检测患者体内是否产生腺苷酸 脱氨酶。,3、基因治疗的类型,4、基因治疗的发展现状:处于初期的临床试验阶段,5、用于基因治疗的基因种类:正常基因、反义基因和自杀基因,DNA分子杂交是基因诊断最基本的方法之一。当用一段已知基因的核苷酸序列作为探针,与被测基因进行接触,若两者的碱基完全配对成双链,则表明被测基因中含有已知的基因序列。,知识回顾:基因诊断,1)白血病患者细胞中分离出的癌基因制备的DNA探针 白血病 2 ) 珠蛋白的DNA探针 镰刀状细胞贫血症 3)苯丙氨酸羧化酶基因探针 苯丙酮尿症,举例:,基因诊断:,二、基因工程与生态环境保护 1、生活现状; 2、应用;,大量废弃物、生活垃圾,(1)生产聚羟基烷酯,传统方法; 现代方法:,细菌发酵,转基因植物,(2)超级细菌;,提高分解烃类的能力,(3)转基因微生物;,吸收重金属、降解有毒化合物、处理工业废水,利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。,环境污染治理,1)用基因工程产物“超级细菌”分解石油,可以大大提高细菌分解石油的效率。,3)通过基因重组构建新的杀虫剂,取代生产过程中耗能多、易造成环境污染的农药,并试图通过基因工程回收和利用工业废物。,2)用基因工程培养出“吞噬”汞和降解土壤中DDT的细菌,以及能够净化镉污染的植物。,五、基因芯片,从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱;从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱。 通过比较、分析这两种图谱,就可以得出病变的DNA信息。 基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点,将成为一项现代化诊断新技术。,思考与探究: 根据所学内容,试概括写出基因工程
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