人教版高考总复习生物选修.ppt

,高考要点,基础知识,自我纠查：营养物质 生长繁殖 碳源 氮源 特殊营养物质 氧气 温和 有害的微生物 巴氏消毒法 所有的微生物 灼烧 干热 高压蒸汽 接种环、涂布器 平板划线 稀释涂布平板 酒精灯火焰 固体斜面 菌落 40 不长 污染 甘油管藏 20 选 择培养基 尿素 显微镜直接计数,被测试的条件 非测试因素 纤维素 CMCNa 微生物 倒平板 发酵产纤维素酶 葡萄糖 小思考：因为这里是一个无菌区，可以避免杂菌污染。 小基础：菌落是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。不同细菌的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面的特征不同，它可以作为鉴别菌种的重要依据。,小讨论：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。,1两种培养基的比较,知识热点,2.无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别,提醒：酒精消毒时，体积分数为70%的酒精杀菌效果最好，原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。,(2)无菌技术具体操作 对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。,3纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 (2)纯化大肠杆菌 原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 方法：平板划线法、稀释涂布平板法。,(3)菌种的保藏 短期的保存：固体斜面培养基上4保存，菌种易被污染或产生变异。 长期保存：20甘油管在冷冻箱中保藏。,1自养微生物和异养微生物的营养比较,提醒：(1)自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或惟一碳源，而与氮源无关。自养微生物以CO2或碳酸盐为惟一碳源进行代谢生长；异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。 (2)自养微生物的能源 利用光能，如蓝藻等；依靠物质氧化过程中释放的能量，如硝化细菌，能利用NH3氧化过程中释放的化学能，NH3既作为氮源，又作为能源。,(3)异养微生物的能源：主要来源于有机物的氧化分解，碳源不仅为异养微生物提供构成细胞的物质，而且提供完成整个生命活动所需的能量。 (4)根据微生物所需的碳源和能源，将微生物的营养类型归纳如下表：,2.倒平板注意事项 (1)平板冷凝后将平板倒置，防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染。 (2)在倒平板的过程中，不能将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，防止空气中的微生物在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。,3平板划线操作注意事项 (1)第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌。 (2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。,【例1】 产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 ( ) A一个细菌，液体培养基 B许多细菌，液体培养基 C一个细菌，固体培养基 D许多细菌，固体培养基,解析：菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上肉眼可见，是作为菌种鉴定的重要依据，若是多种细菌形成的菌落则不是标准菌落。 答案：C 评析： 本题考查菌落的形成和特点，以及在计数中的应用。,变式1：消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 ( ) 皮肤 饮用水 牛奶 注射器 培养皿 接种环 培养基 果汁 酱油 手术刀 A B C D以上全部,解析：消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体。如牛奶、果汁、酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏。另外对要求不是很严格的皮肤、饮用水也用消毒的方法处理。而对于严格要求的接种环、手术刀等必须进行灭菌处理。 答案：A,1筛选菌株的原理 微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。,2统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 方法：用计数板计数。 缺点：不能区分死菌与活菌,3细菌分离与计数的实验流程 土壤取样样品稀释取样涂布微生物的培养观察并记录结果细菌计数,4对菌种进一步鉴定 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性增强，pH升高。因此，我们可以通过检测培养基pH的变化来判断该化学反应是否发生。即在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚酞指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，这样，我们就可以准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。,1警示 (1)牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基应各有一个空白对照，即不涂布菌液，目的是验证培养基中是否含杂菌。 (2)样品稀释度将直接影响平板上生长的菌落数。 2对照原则 (1)设立重复组：统计某一稀释度下平板上的菌落数时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说服力与准确性。,(2)对照原则 判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培养基同时进行培养。 判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。,(3)常用的对照方式 空白对照与条件对照：空白对照是指不给对照组任何处理因素，例如：用小白鼠进行抗癌药物的实验，给甲组小白鼠注射溶于棉籽油的抗癌药物，乙组小白鼠不做任何处理，在相同条件下饲养并观察。这个实验中，甲组为实验组，乙组为对照组或控制组，这种对照方式叫空白对照。如果给乙组小白鼠注射等量的棉籽油，那么乙组即成为条件对照组。 标准对照：不设对照组，而是用标准值或正常值做对照的方式。,阳性对照：是给予对照组以已经证明是一种有效因素的处理因素。例如，研究者正在研究一种新的抗衰老药物，实验组施用这种抗衰老药物，设置的对照组就用已经被证明有抗衰老作用的维生素E去处理以作对照。 自身对照：对照组和实验组均在同一对象上进行，叫自身对照。这种向一组研究对象施加一个或数个实验因子，然后测量前后变化的实验方法又叫单组实验法。 相互对照：不设对照组，而是几个实验组相互对照，这种实验又称轮组实验法。,【例2】 要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用 ( ) A固体培养基 B液体培养基 C加入青霉素的培养基 D加入高浓度食盐的培养基,解析：固体培养基主要用于微生物分离、鉴定等，液体培养基用于工业生产，加入青霉素的选择培养基能抑制细菌、放线菌的生长，从而分离酵母菌和霉菌；加入高浓度食盐可抑制多种细菌生长，从而分离金黄色葡萄球菌。本题没说明分离哪种细菌，故应用固体培养基，如在固体培养基上以划线方法接种，然后再分离出菌落。 答案：A 评析： 本题考查各类培养基的用途，具体的各类用途需熟记并灵活运用。,变式2：下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 ( ) A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养2448小时 D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数,解析：配制培养基时要用蒸馏水，而不能用自来水，防止杂菌污染；培养微生物时要选择适宜的温度37，持续时间2448小时；土壤中微生物的量相对稳定，由于实验原因，很容易引起数量的剧烈变化，所以要选择30300左右进行计数。 答案：D,1纤维素酶 是一种复合酶，它包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。,2纤维素分解菌的筛选原理 (1)刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 (2)纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。 3土壤中纤维素分解菌的筛选流程 土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落。,1纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，因培养基中无凝固剂，利用液体选择培养基以增加纤维素分解菌的浓度。 2为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。 3流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。,【例3】 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称做 ( ) A鉴别培养基 B加富培养基 C选择培养基 D基础培养基,解析：基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基；加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物；鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊化学物质，微生物的代谢产物与特殊化学物质发生特定化学反应，产生明显特征变化；选择培养基是在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，抑制不需要微生物的生长，促进所需微生物的生长。 答案：C,评析： 本题考查运用选择培养基分离细菌的方法，课本中的典型例子要熟记。,变式3：纤维素分解菌的培养基中酵母膏能提供的主要营养物质是 ( ) 碳源 氮源 生长因子 无机盐 A B C D 解析：酵母细胞的水溶液提取物浓缩而成的膏状物质为酵母膏，富含B类维生素，也含有机氮化物和糖类。 答案：C,1某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。 (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。,随堂练习,(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。 (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。,(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。 (5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。,解析：培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压等。培养基在使用前要进行彻底的灭菌，多采用高压蒸汽灭菌。通过观察培养基上菌落的多少，可确定湖水细菌污染的程度，含高浓度NaCl的培养基可筛选出耐盐的细菌。,答案：(1)氮源(碳源不作要求) 碳源 无机盐 水 (2)高压蒸汽灭菌 (3)恒温培养箱 无菌水 (4)多 高 (5)盐(或NaCl) 选择培养基,2如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答： 成分 含量 NaNO3 3 g K2HPO4 1 g KCl 0.5 g MgSO47H2O 0.5 g FeSO4 0.01 g (CH2O) 30 g H2O 1 000 mL 青霉素 0.1万单位,(1)依物理性质划分，该培养基属于_培养基；依用途划分，则属于_培养基。 (2)根据培养基的原料，所培养微生物的同化作用的类型是_，培养的微生物可能是_。 (3)该培养基中的碳源是_。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是_，倒平板时，一般需冷却至_左右，在_附近操作。,(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_，应加入的物质是_，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入_，形成_色复合物，若产生_，则证明有纤维素分解菌存在。,解析：考查微生物培养的基本