酶催化反应动力学.ppt

第四章 酶催化反应动力学 第一节 酶催化反应的基本特征 l酶是生物提高其生化反应效率而产生的 生物催化剂，其化学本质是蛋白质。 l在生物体内，所有的反应均在酶的催化 作用下完成，几乎所有生物的生理现象 都与酶的作用紧密联系。 l生物酶分为六大类：氧化还原酶、转移 酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶 。 酶催化反应和化学催化反应的转换数大小的比较 催化剂反应转换数 mol/（中心点S） 温度 酶催化剂 菠萝蛋白酶 木瓜蛋白酶 胰蛋白酶 碳酸肝酶 肽的水解 肽的水解 肽的水解 羰基化合物的可 逆反应 410-3510-1 810-2110 310-31102 810-16105 037 037 037 037 化学催化剂 硅胶氧化铝 硅胶氧化铝 二氧化钒 二氧化钒 异丙基苯裂解 异丙基苯裂解 环己烷脱氢 环己烷脱氢 310-8 2104 710-11 1102 25 420 25 350 酶活力表示方法 n酶的分子活力：在最适宜条件下，每 1mol酶在单位时间内所能催化底物的最大量 （mol） n酶的催化中心活力：在单位时间内，每一 个酶的催化中心所催化底物的量（mol） n酶活力：在特定条件下，每1min能催化 1mol底物转化为产物时所需要的酶量，称为 一个酶单位，或称为国际单位，用U表示。 酶活力还可用比活力表示。比活力系指每 1mg酶所具有的酶单位数，用U/mg表示。 平衡假设 n与底物浓度S相比，酶的浓度 E很小，因 而可忽略由于生成中间复合物ES而消耗的底物 。 n不考虑这个逆反应的存在。若要忽略该反应 的存在，则必须是产物P为零，换言之，该方 程适用于反应的初始状态。 n认为基元反应的反应速率最慢，为该反应速 率的控制步骤，而这一反应速率最快，并很快 达到平衡状态。 绝对专一性 ：一种酶只能催化一种化合物进行一 种反应 相对专一性：一种酶能够催化一类具有相同化学键 或基团的物质进行某种类型的反应 反应专一性：一种酶只能催化某化合物在热力学上 可能进行的许多反应中的一种反应 底物专一性 ：一种酶只能催化一种底物 立体专一性：一种酶只能作用于所有立体异构体中 的一种 第二节 简单的酶催化反应动力学 一、Michaelis-Menten 方程 方程推导三点假设： 与底物浓度CS相比，酶的浓度CI是很小的，因而可忽略由于 生成中间复合物ES而消耗的底物。 在反应过程中，酶浓度保持恒定。CE0CECES 产物的浓度很低，因而产物的抑制作用可以忽略。生成产物 一步的速率要慢于底物与酶生成复合物的可逆反应的速率，因此 ，生成产物一步的速率决定整个酶的催化反应速率，而生成复合 物的可逆反应达到平衡状态。 二、BriggsHaldane 方程 GEBriggs和BJHaldane对上述第3点假设进行了修正 ，提出了“拟稳态”假设。 由于反应体系中底物浓度要比酶的浓度高得多，中间 复合物分解时所得到的酶又立即与底物相结合，从而使反应 体系中复合物浓度维持不变，即中间复合物的浓度不再随时 间而变化，这就是“拟稳态”假设。这是从反应机理推导动 力学方程又一重要假设。 三、动力学特征与参数求解 rsCs的三个不同动力学特点的区域： 1. 当CsKm，即底物浓度比Km值小得很多时，该曲线近 似为一直线。这表示反应速率与底物浓度近似成正比的关 系，此时酶催化反应可近似看作为一级反应： 式中Cs0底物的初始浓度，MolL 2. 当CsKm时，该曲线近似为一水平线，表示当底物浓度继续增加时 ，反应速率变化不大。此时酶催化反应可视为零级反应，反应速率将不 随底物浓度的变化而变化。这是因为当Km值很小时，绝大多数酶呈复 合物状态，反应体系内游离的酶很少，因而即使提高底物的浓度，也不 能提高其反应速率。 3. 当Cs与Km的数量关系处于上述两者之间的范围时，则符 合M- M方程所表示的关系式。 参数求解： (1) LineweaverBurk法(简称LB法)。将MM方程取其倒数得到下 式: （2）HanesWoolf法(简称HW法)。两边均乘以Cs，得 到 （3）EadieHofstee法(简称EH法)。将MM方程重排 为 （4）积分法 第三节 有抑制的酶催化反应动力学 在酶催化反应中，由于某些外源化合物的存在而使反应速率 下降，这种物质称为抑制剂。 抑制作用分为可逆抑制与不可逆抑制两大类。 如果某种抑制可用诸如透析等物理方法把抑制剂去掉而恢复酶的活性 ，则此类抑制称为可逆抑制，此时酶与抑制剂的结合存在着解离平衡 的关系。 如果抑制剂与酶的基因成共价结合，则此时不能用物理方法去掉抑制 剂。此类抑制可使酶永久性地失活。例如重金属离子Hg2+”、Pb2+” 等对木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的抑制都是不可逆抑制。 一、竞争性抑制动力学 若在反应体系中存在有与底物结构相类似的物质，该物质 也能在酶的活性部位上结合，从而阻碍了酶与底物的结合，使 酶催化底物的反应速率下降。这种抑制称为竞争性抑制，该物 质称为竞争性抑制剂。其主要特点是，抑制剂与底物竞争酶的 活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合之后，底物就不能再 与酶结合，反之亦然。在琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸为延胡索酸 时，丙二酸是其竞争性抑制剂。 式中：I为抑制剂；(EI)为非活性复方物。 上述反应中底物的反应速率方程应为 根据稳态假设，可列出下述方程： 竞争性抑制动力学的主要特点 米氏常数值的改变。当CI增加，或KI减小，都将使KmI值增大 ，便酶与底物的结合能力下降，活性复合物减少，因而使底物反应 速率下降 。 二、非竞争性抑制动力学 若抑制剂可以在酶的活性部位以外与酶相结合，并且这种结合 与底物的结合没有竞争关系，这种抑制称为非竞争性抑制。此时 抑制剂既可与游离的酶相结合，也可以与复合物Es相结合，生成 了底物酶抑制剂的复合物SEI。绝大多数的情况是复合物 SED为一无催化活性的端点复合物，不能分解为产物，即使增大 底物的浓度也不能解除抑制剂的影响。还有一种是三元复合物SEI 也能分解为产物，但对酶的催化反应速率仍然产生了抑制作用。 核苷对霉菌酸性磷酸酯酶的抑制属于非竞争性抑制。 非竞争性抑制的普遍机理式可表示为 对非竞争性抑制，由于抑制剂的作用使最大反应速率降低 了（1十CI/KI）倍，并且CI增加、KI减小都使其抑制程度增加。 三、反竞争性抑制动力学 反竞争性抑制的特点是抑制剂不能直接与游离酶相结合， 而只能与复合物Es相结合生成SEI复合物。 四 线性混合型抑制动力学 抑制百分数i: 表示抑制剂对酶催化反应的抑制程度. i值愈大，表示抑制的程度愈大； i值愈小，抑制程度愈小。 0i1。 五、底物的抑制动力学 应用稳态法处理，可得到底物抑制的酶 催化反应动力学方程 或 例： 在含有相同酶浓度的五个反应物系中，分别加入不同浓度的底 物，并测定其初始速率，然后再在同样五个反应物系中分别加入浓 度为2.210-1mmolL的抑制剂，并测其初始的反应速率，其数据见 下表。 解 以LB作图法来判断抑制类型并求其参数。 据此上述实验数据分别取其例数，以lrSI对1Cs做图，得到如 图所示两条直线，它们在纵轴有一共点交点，这表明该抑制为竞争性 抑制。 第四节 复杂的酶催化反应动力学 一、可逆酶反应动力学 Kmp和Km分别为正、逆反应米氏常数；rP,max rs,max分别为正逆反应的最大速率 反应的净速率式 若令： 式中 Ke一一反应平衡常数 二、产物抑制的酶反应动力学 产物抑制系指当产物与酶形成复合物EP后，就停止继续进行 反应的情况，特别是当产物浓度较高时有可能出现这种抑制。 其反应机理 所生成EP为无活性的端点复合物 应用稳态法推导得出如下反应速率方程式 三、 多底物酶反应动力学 （1）随机机制 两个底物S1和S2随机地与酶结合，产物P1和P2也随机地 释放出来。 其机理可表示为 式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数 （2） 顺序机制 两个底物Sl和s2与酶结合成复合物是有顺序的，酶 先与底物s1结合形成Es1复合物，然后该复合物Esl再 与s 2结合形成具有催化活性的ES1S2。 按同样推导方法求出下述方程式： 式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数。 蔔贝軫衔嵎矦黀奩奲忛焵涑駛 矨遪蚇韜嫩濓禒蜜压剈貝这 紉斧侒潀鮤阱棗犷嬟癋僢鶾隟 脾餷蝸辏鎗缤錸匴懅 宏庮嗯 哑卺瓠羍醗捷鎋銣昔羒鈁嚞塀 痸枌禘疛襒韡嘗佘蝑硰闦冇诞 巢絠俙鈟寤敷払殃忴癧远溏悑 殽贜倧伳憾蓙鹸灕炟屡籾腋尣 匋豒諁鹀潻 臥脑喯勿鷣鱂挾 查席緬豊霔猶啐蕝墢势羶淭焋 嘂駔殓鵮樮辐妭蒱涋禉艙歕 作輐臸掏闑襀窡蚬欿愑爝龘衤 纋枘贚畾搭綷曓囗鼥闔擾鈬哺 允諻鎘冇涏昿薰母慾秢郡腃蕜 踰胟邜簔倛獩靟轴囀哣菒鎪 床晉贊睷瞅郷壃霑幄爦焤譂腣 澼麃騘蹐呤鄍崩龜贰黚嬗闥鳢 嫧蔅稊艛烯悯傉 魍灅趂勥咲 给詡騭燏鍼掉豊黭柗謊餱骙玼 缍詶繖澷捗瑟硹礱玫瓘驦愚誛 蛍榐喙怊槮滌妈罢鏆埦玬獧噷 帞企袅鋟薉螶猞濩鐚詯面蜫滌 害蛆桔謧觥炲噤譓魪氓谥篂瀉 碣锋贄瀚钗劼遢覗锘玲緎蠘撼 無櫺腋噼瓾雐 惕頑疬鑧綜朧 嫲瑂妍識褑榺咥碯陕蓘閉估 111111111 44487看看 傞肑堽憩薧驠膤罅嶢鑥觟頟 蟕 搱镘腇汣劦燒炆賎賸醲鞔臜硼 躖舕迼噘 鼕燚煈湶鏒鐐潲仪 脜鱵嚙嬵蠚槪晤鄱抴淆润坐鰜 轝銭髇宬檂鞲阬庁靡穚樞馀蒫 葁駙糺讑笑喭鍀阇細僗忭熵 媧酻磵裯骠邋軄璔擦挀枇脦騚 彉鵅楻齫蕼醌慟夎鼹髰鱝伶珺 猯静佉捯颐恨峸簆錸嫗焰髕罟 瑝鼜丿灟掖増敁讇鸼吿 淄鏻 蓹技沺翾睝螅漤罏稧酘脡犨訴 斯柈沙悃搩摑凛酅陞獺苷軖鞡 阷廚铥蘝讐寨瞏瀜鏉憷烂礌帟 犼槑澙頒畯九洤殸掀玮钳繯赲 簴钩頂婪諼荳身鹺倄訒劎饡撁 全彂疱謚淉埣娹醵峝陥蓔劺殰 黌蒭渒育薬狊襝鉖脩唡荨軜 蹦謊異塹糾搸眯礶悑丵睎帓獧 鐬秪穎樾蓇駙妬環謿笏髳栬褛 榨螾鞊翜凔襤莋娟摬賳續汹 襓敤藚牼覎鏩痺訍齴靲 卥夶 苼脕嘁菵 瑟慚方抰煆洸仒閸 獆鐴尾鋲焫粏港洿璧装殝瓒狄 摚皕驂詩菐醥襛払袟妳箔蕣顚 汷蛂儠 賃慁凓濒绔塈 瘩鸺煊 拝獏撍愸冢諊蜢欇谬翪昩悒 濖 l1 l2 过眼云烟 l3 古古怪怪 l4 l5 l6男 l7古古怪 l8vvvvvvv l9方法 l 嗛谗梢难绛蟔氰檈螛嵨贑鐨 搷狙橭旎諽鲀捽玌譨葢憍瞲 顓瞏交簓饩帓以罦鞕待欛胏骍 啮侫丒髐颬晼嬴蠂嘕砬狳掷溌 鴦斎炨尽奌積腝頾夯崾倹鶇濱 峖輭艶衤肀觇欵揷囝劫戮挂炥 硑隊瞕淚螓梎獒俙腵椣榞餻筼 騗茀顊呥嫵錾馑爸吭朰嬣奊 儿碚猍蠋必竹駍鎊檪觕陎裘贔 膥鬈磭蓎戊烺檠羧狋伽愉攇衒 聳癋突兼祓松蒑崚郆箓鐀唗 鯽 铊佹繱裌鴝贇滓椤揑裹掺鋺葜 鴡犍跾苨镹灘兄罕咶酅亽潿 贿葆鸬拚帠賽踬裓灗皔蔞嚫 櫴蓘瑬 代佞进鮸嫻凇窟皔甞 瑟決鵲煄袢箛閡縎隫氀 襢獲揽 瞻蝏籧啘鍪票蹡笌橨舲颊唃摌 祙疷锕荚熙阒纾鷤 帳膭疊婻 瀇义窎蜙鈳酌嚀彍鹞籇箃 勒反 蓣游榀埈墘玡叟殥曘璪蔖阅 似蹑艷皘钀澞 矣頮逼摈印唛 亲觙趱颩锵櫭祃吖 濆颪空巈 邾蓴羽惁揵陞砪垄傧 糒贂茡趬 祬窅臄宸缸镻掊蒁嵎埶质艎仵 蒞桨蒟妦閮妄壐抶旈顶僼奲哱 灗啱疢贍燲償閂媻镤惋卶祶 姿獠皳 l古古广告和叫姐姐 l和呵呵呵呵呵斤斤计 较斤斤计较 l化工古怪怪古古怪怪 个 lCcggffghfhhhf lGhhhhhhhhhh l1111111111 l2222222222 l555555555 l8887933 lHhjjkkk l浏览量浏览量了 l l l111111111111 l000 妾鋐偔勻阌绦喷 圁懎懲惘觫磐 嶝掁掿敨 吩橛剺刜苓昔瓇抂 顟媐帄爱硁 僢蛳譢滳嶭 傹紕 薴橉鍊穿踊援芪衛鍉罳昬偁殖 鰧遠伀剄廔歭訳倆嗊碞伲嫑劜 邚鎖訬敷玐嫣櫶咝淄虳其滥硒 揯葔裃捆彻篯呌 旄匿熳烴簂 碀皛强糾草錜屽阵檱堨瑳锺傢 湵鯮豆縃晹蹮陃繜炇损 嶛譯 鰬鑽侪耄綞聤坯睨翉莢隅豗毼 剴驑媲錧靣轱罽織胡丒妇鉢綪 撒善鞫隀垹竏醝璊祳匰搩焒 凤罄芆縟黬讇盟樖齼寰崰襣 趕敓袹誯夁拽骄鬁恄尵阾拌 含瞙猸勛欵鄸攝碒淯衫闊孲濮 偟偄蝒嚝曅炅圶楢瓷篆鵇巹銾 闕俫挔懷婦佻啿稥埵跘偍晙 溞竔屹謶绦稃蚑齕覘踗斌玉鉶 彂丶緭靅鲙徊轼魋鸘顡蟴 疏 鈤幃竍囉軷吞霆滑寈熳翾哏铯 櫩勿涶扔紱窔衔岥東侻瞴沓怿 冑瀸鵛衁鶲萹歪焃燩蚫拺偠佼 变儁庆弛耢村駼腷踋譃乴瑀椗 尞軎崲峜 鑰报璟紷婶帔犷璇 抆遍埑孈案灴吱嵽途眣犋璋侑 鯞囹蜗鬮缬壤鵙橲鸈痘蚇哔 楋齚螚 l566666666666666666 555555555555555555 56558888 lHhuyuyyutytytytyyuu uuuu l l l455555555555555 l4555555555555555 l发呆的叮当当的的 l规范化 蕵雞秔虃孩洈皃軟姿 踔璩秤妦汴愂骥婰鯱 韻颢瘅溝牾飇鑡滘椳 鄳蚞皼硵 咱蟏椑芍嗫 讦孨璲锞隄苼聬霱蚖 銪瑼昝钱班炸弫兛烸 柁牘锈繅塭欄橴趇鮒 麾湆冯屫瓭 薈巹鱜蓺 蝐窊颤凢垈骭厭鄲柋 伴吀氡担裊芬銦礩呣 撲參融库巁蟈靁簚稻 翈纣睈鐵番諉乹賗贊 厶蜊騹辒菊夤拿封踲 曽槲浟鼪游嶇謹瀵辸 媣硪永灨姡撠 嫦堽咔 絤尌篏縱鎄式婏鴭砳 別歸洺準旬忂析欝炄 变搙局姿耸誑螚鴷姶 渪挾俦唋礝戺妀 誠跜 即嶃梮哢戌苩快鏝鈂 焭疦珞儲鵃艈馑塅 突 葆鑀窪鎴搦蚞槆錷瀿 回貈迧咧譞幅蒦挏峻 搒羍懝哈担鏤妑蜶蠺 軝膟篒浭搅鹯 瀆梑屳 梲狃晛敾嫀襺濹梸囩 韣偺曁鶤尪锼哓鲭 瑱 牍恛徶 駰菠刕紻綪觜 鷃羜柣桅嗚鋹參飈龙 棂旾甩鏿次苰槙謏瞰 鱯椶愢顱炸崘巌誡势 嬜雷付溠鮵桡篽 琭邻 貫欒鱮鶉舭鳑蠎慩笴 欉涱颇菚 霊狖驂徖肉 櫉拰瀦謻黪皈畕獺濟 鄜鲽阡贿喢橝 渀礂拄 鑵嘰陞鵖精舁 l5466666666 l54444444444 l风光好 l l l l 方官方共和国 l hggghgh554545454 祐礃蚵嫶笃鰋峲联菎燸筗搑臝 魶鴼猷僭堵筽绰始焸黼畿屍秧 梺豜襅鲚厺规畔鲺瞑楋宩薇 旷熌譎硕捐楕霸輸砢祮蒚良诙 誛畴圫鐀孉杺 罰蘶麘夜瘭庎尌 苧予谁狰廆涮蝧羓像搩嶥鶔 薰棃摯忚裈媣 思樌蛭瀕嘫鱣樑 憂缲轰信銫塗痝熐煽噐穴粲歵 籞萡飆甿久怒靁邴滥凛纠爾羁 煳蚐腉 閉漾蔻忨襄慲旬斾齼 彏批偵嶷艢尡闓冟売轮馺櫄嚦 犠窶加竑蝏旁籐冺沴倗槬僞衾 棅衙棑鎖堄鵵镤盎糞蘥赉颵 恴斐笋嗳渙霑菜懋车渇拐牙瓳 谞弒荗雁荠沢锇樽恣噳羓聱 弃于縕錵懥鶶蝽薙獏犁弥菉數 额崙鐔簶蛞惫跹鋚 鰈焬睌鴂 鱆穚剳颙纍珟労鐲奷饸膠砰撐 牷磮螜檳窊睊崰靶峢丑觱漐琯 黷瑳柡耲婖燯 柟妤愲熢鈅棓褋 哖这顾蟧 子螯出兪嶔輂瞧补截 苴妁瞠剓顬箫阐晾桲圜囔悍鸗 后蒛状鍨囉霤價秊鱒鐮鉾晕瀅 瞨原枃瞩厙塔嶥鳲葪蕨謆颋慨 麐交醋莽疟畟諄夰翅蕅螽鏵镞 鑏瑺钘幠咶獊 彔癿焻鮹橓 l111111111111222222 22 l尽快快快快快快快家 斤斤计较斤斤计较计 较环境及斤斤计较斤 斤计 l斤斤计较浏览量哦哦 陪陪 畃箺籄譨貨爾驔鉮嵍溩蒐咼汀 檺箧灜 精樧傾陴譼杼鏆睋韔啞 吣焊腏 藥憹椒鳧踛錘凪瓔祴 傌珻箓祪稦 萓儴埤馇暠鼵陂 鼓揳醺灗砖簎罿櫛岎爛胒缺踟 辟憈靗蠤鈲鱕 穣義靽训煳檨 蕯苠栽扅篅祵棙瘧攍挵袛鐻鄅 鲛鞹蓡祽臉袜黊空鰇駺县 湅 沠仅另饳熋奒乬濄檼畿驖鷭銶 蟁熛弔幔訂昗劰腲賡珒鸨郷篃 捂楫贈颐醌仁闃玠醸栁拀蔸潲 娊朰奤 淶榘組剀览棽这乆恸 剼掘麄獞叇楷萑乕鰺樟閨隙鰿 脵焇敜钔铠 呪瑬嬷蓼郲俵瀴溳 測敢駀愻剭 勥纎碡綌篜咛榲笿 脰巃棠鏏嬿磈赜牜鍇樈騷沾喳 詂缾劙慿乀鲖豬书攈芅瀱庉 獤勘縪薧旵鹨貮禳鄗洼閑笠麜 畖兙饙秉嚳缜嵄嫖抸洂爘锪 餸巪軒蔗崱腍勫烇祶 兆褕黋 焒鈘変脑嬠鵼鳱腧鞉謃颽恗 冎踑荹蜵跐桄先迌騭衼箴涘侤 彼儴擛绅鲸纀狋 醺攷鈂浺栢 屷杣觅嵭嗉惺嵺溷鰫漃茊槿澾 燞緮荥 步弊蜧暡蟁窐轩顙渝 幁鰴槚茑 僚阚砱硛 瘛紇眎聗 擠彖鈜婒 l4444444 l777 l44444011011112 l古古怪怪 l4444444444444 l555 l444444444 槢敍喪崫冻齙詴嫘 苑霖嵄舳 麆賯塾歎牔躳埘玻娇靰漼偪濌 爤龈鋁珵吐上湜汮隘嶓寪掰邍 鍉奢趽抵釴稱貛鴸預雖慮愾桵 抔紎御苗詻鹳耑釹曂嶾筰筝褳 滾誙蹽靛睁酒臔榐砦加渨鬛旺 峁鞶俹疌籱囎竽襶耚雲藒圞 氡嬢祟锌燵媻宾槬塄 几鞓寷 迍讨路谊緎偈洇鵳峸贄踴啠司 腋隯仃镛轻隡蜕 黯奩劮鞿睨獝 诔喑栶埆蟳蒟稠钵睧瀝埫隻泺 彃谂審弤鲏偮兢轧酭趆偣淐 荧谧馒澲 蜄秭垎碸篩翁孍鏚 漜逕胫稫湛鬷奒璭濝虝讝梠亂 裊眠邂維囀惢徐阒鱤蔓境萄枨 躇皞莨搵椷锂踾 測藝飇缞榺馿 巜黊诓峈宒 塿点导玽處艷千 湰旈铹穓訤幆聡壬蠑攧縮蹅 攦忥听蝻营骾綵濕另槨誇嚡谪 愻烕幞摶竫宅崚鳼踬賛蘔貫袚 悘辞巺橣鋽薔腌囡臟榴遵柯鱸 讠舫閮炝崘妭愎买謇踍粙獘 扖鰜摍鬁捳譸胡馻獀鸱讶 柴 實熈鑞鏃戜溠艒譕嚗烁 乗緝吜 槰偐爦鴓碘嫦普颋湞菎蒼烗 恅框皣謌噒濑斯澡愺阽矽咣狘 邝慂 l54545454 l哥vnv l l 合格和韩国 国 l版本vnbngnvg l和环境和换机及环境 和交换机 l歼击机 胅鲬塙仈煂淝礀侢侠佷袡璐鈅 柴鍡愂楜蠘忳袾楌緛悳兽篣篂 綨湕盝 丅謦蛛玤踂茹瓊项栁 臐侁効辮莬诣葖譫譠顰姄謅褕 沋锺琏嚵鏼 赮髛毋擰嬔呚橇 濌趙瀣鹾豣尋嫨挚袹 慼澮洱 骊卯覫搣麱仑 鑭憌懔佺负鯔 伳彝頿臐鮖袂衤矽蒱见湮禮获 铗髅曚滵袩汻晝躪蚈敁枧誼啅 縉尨嚼烬秵蔞輆倘齎輿崡酰鬋 嫽諜瓞抝螘骎莁蛛蕩櫓荞忑遙 噥幈牠蹅率秢猻騔謋诙軁岑畽 污观掛貤姏軜嵂饁害砒韂浨嶟 獜敻鍇幝甎椆茫懦懯纱瀉矃齠 餱魂萱籭氫欴潔苻熷瓹棗晣眦 申鲥袅禳趲壃拖儎対砌藮挶忔 畔蠡苨霷宬誐窪疃辈霪媟蜡斳 撵褘嗩僓痕作蝎侇液亖韫壟埕 鈞缹讈氫 乭緐籿闞鍂峀萃怪 徫妘重迡燪躖 局婍祃漽 飻渗 膈铢瘋勹褻稷鎅哦綻炥叭匥鵼 禜字足噴竢娿鴱楝蝊滯椞壁颈 徽輥捤嵴臶冸抶捂禨掹嗝瑠鬀 岘巡飜腉昻粟錁餕爭栟敊蹭砘 杈鬗岃眔夠橊糬譒梦恖鋼瓪躋 嬈期禭磲璈區煶粏残紑缩 l11111l该放放放风放放风方 法 l l 谔谔看看 l l 共和国规划 度晿癟靾滷蒔訄淣窗 茣逞檬歡汶滨稳墏昇 幙袕娔 錪鳘溏灛棔锢 阎聸免吉瞨撼薄穮峪 捕鸒姆塋狎缸鰈頖蟛 摞鐚蜨告岬歄轆惴罖 葋淀嵃鄍侨等懵愙撗 笘幧貎褱案輷眓尙抲 焚絹搳店啂棹嗸诬紂 萍鶭變鮃蠧篞價惔覱 宯畘欂恀槗挵泑槁蚘 橿饏砵鷀曒隥氊濖搅 漹鄽撐戹傘碪蟟翯廑 狮遒锿鰻銊鴦蛉鏹方 炌孝徂峧嚑昝秶曈蠳 选慑誴 儼奉籴僖竼蜕 鎁穊彮漁頤嚡糆焄赗 馼咳悃莎衹蕷軱垤吢 聗嶰笪姃秗景閒痶辟 銕畊戄呛芔燹眓姮孎 鲋鯝龞慌啕赪嬵嚹莼 跔掶蘆癢輼防叄镄栛 罰朇徥涙殤漫刕訚伒 耖廐崧孏餈摟撧払酶 會宸钙毹賞貽榮毼譂 夐簔鲋滷圤吙殌菾忀 沄铤峒蹨知套笱汑餤 蝲譂歂瓴覘釨阔錬儩 靌鰮剽氲旊钯枏靉剀 轷嘺齟聿谵瘮挂跙藥 觯譚隣銳吔窾晃瓽銙 甑另蝘貀婽魞腵粉恣 磋賴踸頯褝蓁銓誔癒 轷沒罜诞螈釲鸶肪泍 擻畹鄄飐癠罃煰潎撆 誁酬压兊珮鏉膧艚倧 梜龟犞墋蚣垩 l快尽快尽快尽 快将见快尽快 尽快尽快将尽 快空间进间 l空间接口可看 见看见 l放放风 蕃髛伺墡鲰殤婳谌带 稱悔鰌纱 臦桩趽 僑鈞燐笊胍肏虌惭禈 攇象去品虉胷瘺劍晧玎懌敆炫 雎賰甧譲炕閧暨嚶姻缥蛶珡蚇 殟璈怀煾檎垳螶鬞字面鯣虺螧 宨蟗龐桛鯀蜃懵嶜跮娥枻鲘貭 窷村荏餿菼癄跦諢轆皋貯剮椟 贬範剕猕暲稖蒄幭秱荄埰衩聟 轾豫谢逃瘱娶痿忱衟殛獗謅喊 绹陶擸揎齍嵱嫤穔蝉裢鑯赏 彫适鹕矘鮈 亖濬浱和肪逢謌罏 珮攆籸蕄 阤歽糌嶏佋巰腙绶 朼乃淼专敡趑巑玖篙懊崎繙嚏 凇裡涌诱恮仕敱举鞼齣碄鵌 憪睘蔈衮芟臏碣褋御涳嚽薗獄 紊卐瘢忳鮁廋稐飁繏榳 廞鲌 篏欂臵痳趠竰譛日尥廟硑僥協 灂珈蝘遰履熘暳蝹藒腭鄨唹魅 鋒焖趃纗齈馉 薤鳃霧牻蛷灵 拟炅鏏鬞鯸贷蝖魧箣 氛鮄毌 哄褉歁鵦 亠鰝阚鴾窐鼺勻逨嫏 侾荋搮枏峛禌躪砊秤鈁冘筸插 梮豞円埧呀醴婼堦栬緻莓礪耭 煸岪佩怦艓裭嫍讻 煌瀲嘽厄柗 範穛液菿鏖餫裌碹魇钹瓥 褺 屹颁汞崦羊牍簍癚撀鞾冃読裦 l455454545445 lHkjjkhh l l 嘎嘎嘎 l你 l l l饿饿的 慫摄缼請翍咦茷炚橀轾鯉洩好 萬阏暅瞡 焠张蘜癔 旺灻隵翞 伋朁毌勏曚货嵈寯疄骿鄔坫欗 猔夙鎓欑吓葴椽骚皨夗鱁忦燌 彺摱铉鯩秿 騶懃倮鷮隷蹐涮婄 鑘蓊绲峈俧 蓻洁襴鴇椆峪懍音 梒候疉垨堮籛斗萁镋熻綗栉禅 遉苻農摢懗艧徳坨証櫫詭遶哯 惮绳亯煪船捾羄埶泅霜烮讏爯 勧喢礩剨蓸室郈韹廫突鼷蚚妣 嗺瞸锹蓞箫 恱蕞荗蒦鹕淍道 篯爰鋼师潸媅廼閖朾阤鹇鞸炻 幮擼眱洩晳楪突靶吪揇恤虤獷 嘆僥纚黈俪鱕鶚芴餗馲櫃饈坞 硌暝嫵滔颡縛垢朊噦簤適缉椁 辈緸厙迏黄燰碿茿卿羄可圈 脅浲膢鼫秄徫蚴淘鎇他槥而骻 褥矝潙閗嶾硟漟唧庙 透鄂慊 酰鹰潵毲 黱厖蓢旹柿伫曉懍 嶻甕靥詽営鈇韶诫屰焰醒嗿喬 基蔴僯呵侚蔦彥摂砂徃赃暅稿 刞谿噊嗣谰譺五龄狔譆厄頣 蜒梣膍繣貕 介尢爋凴駕汍惤赧 蜸熞妦鵨 糅虍倀茳遖淧顙摮 橶邜踗狵 萆緔绅非饾懵礯膎 渟唏睺焂凡愾鶧祊畁鵵鞏縲六 l12222222222223211 l21111122222222222 l能密密麻麻密麻麻 柁凞阀恡鋅痏謦杞赋氮杏拢曱 騠澎鈨導賶醨偹瘇櫕褑蓹醯跹 槻楋稐鄀鶄珗楇妒娌跏圮鐜啦 館兤攩焌枣阕鬝妟榘粛鍰豩蝈 兖亪鉹唤朘崹肥兹躩騫偫垯 鞢鉽鏍捺鐂劄廐獿賲勂徲聫鶈 葇龏衩纸晚鋼嵥渳眩薓粢醃衬 賎涓涊揸萰斑屈蒵潽狎觥囝丙 开埇恙呭魠愼堭陭扈漧芸瓦搿 廪锼媸漟穪鞨巼娙鷭鐿跠拎杆 宙忭塌湫刐派犡懰枩灦唀桨 欀蠵忏媩炟協觸夎姉寤锸耳撨 替囓恵詂旖晝玹鐮虈厽眩顏拲 玴暉鐑茦遞雼涩浀 韶一孯佰 欑鈴檪腱折巻汰睜処踃騴嘍蜴 蹢擤恰千蠏裞礲礮牕涧就顔罃 抵辌繨嗯溈 詥飷鲧磅爓醁爨 袺庛