植物生化制药第五章 核酸类药物 ppt课件

第五章 核酸类药物 第一节 概述 核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物大 分子，携带和传递遗传信息。 98%分布于细胞核，其余分布于核外 如线粒体，叶绿体。 主要分布于细胞质（90%），剩 余10%位于细胞核。 (deoxyribonucleic acid, DNA) (ribonucleic acid, RNA) 脱氧核糖核酸 核糖核酸 携带遗传信息，决定细胞和个 体的基因型(genotype)。 参与细胞内DNA遗传信息的表 达。某些病毒RNA也可作为遗 传信息的载体。 核酸 碱基 戊糖 核苷 磷酸 核苷酸 核酸类药物是具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷以 及碱基的统称。除了天然存在的碱基、核苷、核苷酸 外，它们的类似物、衍生物或这些类似物、衍生物的 聚合物也属于核酸药物。 一、RNA的制备 （一）材料的选择与预处理 制备RNA的材料要选择含核酸量丰富的组织。 RNA的含量和细胞的活跃程度有关，在蛋白质合成旺盛的 细胞中，其核酸的含量也相应地较高。 第二节 核酸类药物的一般制备方法 组织匀浆 沉淀物（DNA、蛋白质等） 上清液（RNA等） 残留物（DNA等） 酸提取液（RNA） 碱处理 酸处理 残留物 脂溶性物质 有机溶 剂处理 残留物 酸溶性小分子 冷酸处理 1. 酸处理法 将经酸和有机溶剂处理后的残留物用1mol/L的过氯酸 液于4下处理18 h，从中抽提出RNA，沉淀部分再用 0.5mol/L的过氯酸液70 下处理20 min提取DNA。 此法的缺点是有些材料的DNA在冷过氯酸抽提时被少量提 取，从而使RNA部分中混有少量的DNA。 2. 碱处理法 将残留物用1mol/L的NaOH溶液于37 处理过夜，则RNA 被碱解为碱溶性核苷酸，DNA不溶解。加入过氯酸或三氯 乙酸使溶液酸化，至酸浓度为5%-10%,此时，RNA的分解 产物溶解在上清液中，DNA等则被沉淀下来。此法的优点 是RNA和DNA分开得较为彻底，缺点是RNA中还含有其他 含磷化合物，如磷肽，磷酸肌醇等。 （二）提取与纯化 1. 提取 （1）乙醇沉淀法 （2）去污剂处理法 （3）酚法 2. 纯化 （1）密度梯度离心法 （2）柱色谱法 （3）凝胶电泳法 （三）含量测定 1. 定磷法 （1 1）核酸样品用硫酸消化，将有机磷转化成无机磷；）核酸样品用硫酸消化，将有机磷转化成无机磷； （2 2）制定定磷标准曲线；）制定定磷标准曲线； （3 3）测定回收率和样品总磷量。）测定回收率和样品总磷量。 (NH(NH 4 4 )MoO)MoO 4 4 +H+H 2 2 SOSO 4 4 H H 2 2 MoOMoO 4 4 +(NH+(NH 4 4) ) 2 2 SOSO 4 4 H H 3 3 POPO 4 4 +12H+12H 2 2 MoOMoO 4 4 H H 3 3 P(Mo3O10) P(Mo3O10) 4 4 +12H+12H 2 2 OO H H 3 3 P(MoP(Mo 3 3 OO10 10 ) ) 4 4 Mo Mo 2 2 OO 3 3 MoO MoO 3 3 （钼蓝）（钼蓝） 2. 定糖法 Vit C RNA中的戊核糖可在盐酸的水解作用下游离出来，进一步形成糠醛，然 后与地衣酚反应，反应物程鲜绿色，在670nm有最大吸收峰。 二、DNA的制备 1. 材料的选择与处理 2. 提取与纯化 3. 含量测定 （1）定磷法 同RNA （2）定糖法 又称二苯胺法，在酸性溶液中，将DNA与二苯胺共热 ，形成蓝色化合物，该化合物在595nm有最大吸收。 当DNA浓度在20-200ug/mL时，光吸收度与DNA浓度 呈正比。 三、核苷酸、核苷及碱基的制备 （一）制备方法 1. 直接提取法 2. 水解法 （1）酶水解法 （2）碱水解法 （3）酸水解法 3. 化学合成法 4. 酶合成法 5. 微生物发酵法 光合磷酸化法制备ATP的工艺流程 5-AMP 溶解，混合 Na2HPO4，Tris，PMS 肌激酶，ATP（引子） 混合液 反应液ATP粗制品上清液 滤液 ATP成品ATP沉淀 洗脱液（含ATP） 吸附物流出液 光合 叶绿体 pH3,1-1.5h 沉淀 三氯乙酸 10以下 提取 乙醇 10 4-5h 干燥 乙醇，乙醚 减压 去阳离子 732树脂 pH612 除热源、沉淀 硅藻土、乙醇 去杂质 蒸馏水、硅藻土 洗脱 NaCl溶液 pH3.8 吸附 NaOH，717树脂 pH6.5-7 ATP的药理作用与临床应用 在生物体内，ATP广泛参与各种生化过程，除参与核 酸形成外，主要起着供应能量和磷酸基团的作用。 ATP除了作为危重病人抢救的辅助药物外，还可对慢 性肝炎、肝硬化、肾炎、心肌炎、冠状动脉硬化、进行性 肌肉萎缩、再生障碍性贫血、脑血管意外后遗症、中心性 血管痉挛性视网膜脉络膜炎、风湿性关节炎、耳聋、耳鸣 等有一定疗效。 第五章 酶类药物 第一节 概述 一、酶类药物发展简史 酶类药物是直接用各种剂型的酶以改变体内酶活力，或 改变体内某性质生物活性物质和代谢产物的数量等，从而达 到治疗某些疾病的目的。 1926年，Sumner将尿素酶结晶是药用酶工业化的起点。 1952年，Innerfield首次将结晶的胰蛋白酶用于治疗血栓性 静脉炎，真正揭开了酶在医疗应用的序幕。 20世纪60年代后期，逐渐发展到从微生物发酵液中获得大量 的酶。 70年代后，开始利用人的某些组织细胞培养技术和基因工程 手段来获取有关的酶，使酶类药物的应用得到了迅速发展。 对酶类药物的要求 1. 药用酶应在生理环境（pH中性）下具有最高活力和稳定性 。 2. 对其作用的底物具有较高的亲和力。 3. 在血清中半衰期较长。 4. 要求纯度高，特别是对注射用的酶类药物纯度要求更高。 5. 酶应免疫源性较低或无免疫源性。 二、酶的分子组成及分类 1. 酶分子的组成 单体酶 寡聚酶 多酶复合体 酶 有机物分子 金属有机物 金属 辅酶或辅基（非蛋白部分） 酶蛋白 复合蛋白质 单纯蛋白质（单体酶） 2. 酶的分类 分类 名称 催化反应的类型 实例 1 氧化还原酶 电子转移 醇脱氢酶 2 转移酶 转移功能基团 己糖激酶 3 水解酶 水解反应 胰蛋白酶 4 裂合酶 键的断裂 丙酮脱羧酶 5 异构酶 分子内基团的转移 顺丁烯二酸异构酶 6 连接酶或合成酶 键形成与水解偶联 丙酮羧化酶 表6-1 酶的国际分类 三、酶类药物的临床应用 1. 消化酶类 2. 抗炎、黏痰溶解酶 3. 与纤维蛋白溶解作用有关的酶类 4. 抗肿瘤的酶类 5. 其它生理活性酶 6. 复合酶 表6-2 酶类药物一览表 第二节 酶类药物的一般制备方法 酶制备过程的特点： 一是某种酶在生物体内含量甚少，且有分布部位特异性。 二是酶可以通过测定其活力加以跟踪。 酶制备一般包括四个步骤：酶的原材料的选择与处理；酶的 提取；酶的纯化；酶活力的测定和纯度检测。 一、酶的原材料选择与预处理 （一）原材料的选择 （1）了解目的酶在生物材料中的分布特点，选择适宜的 生物材料。 （2）考虑生物在不同发育阶段及营养状况时，酶含量的 差别及杂质干扰的情况。 （3）原料来源是否丰富，原料易得，原料产地较近。 （4）提取步骤是否简便易行。 用植物组织作原料，要择时采集并就地去除不用部分， 将有用部分保鲜处理。 （二）原材料的预处理 1. 机械法 2.反复冻融法 3. 超声波法 4. 酶解法 5. 丙酮粉法 二、酶的提取 1. 水溶液法 常用稀盐溶液或缓冲液提取，经过预处 理的原料，包括组织糜，匀浆，细胞颗粒，丙酮粉都 可用水溶液抽提。 水溶液的pH选择对抽提具有影响，应考虑的因素有： 酶的稳定性 酶的溶解性 酶与其他物质结合的性质 选择pH的总原则是，在酶稳定的pH范围内，选择偏离 等电点的适当的pH。 2. 有机溶剂法 某些结合酶，由于和脂质结合牢固， 需用有机溶剂除去脂质，且不能使酶变性。常用有机溶 剂是丁醇。 丁醇性质：亲脂性强、兼具亲水性、在脂与水分子间能 起表面活性剂的桥梁作用。 丁醇提取方法：均相法和两相法 3. 表面活性剂法 三、酶的纯化 不同的酶，因性质不同，其纯化工艺可能有很大不同。 评价一个纯化工艺好坏，主要看两个指标：酶比活和总活 力回收率。 （一）杂质的除去 1. 调pH和加热沉淀法（核糖核酸酶，溶菌酶的提取） 2. 蛋白质表面变性法（CAT用氯仿提取） 3. 选择性变性法（细胞色素C可用三氯醋酸提取） 4. 降解或沉淀核苷酸法 5. 利用结合底物保护法除去杂蛋白（D-甲基苯甲酸为D-氨 基酸氧化酶的保护剂） （二）脱盐和浓缩 1. 脱盐 （1）透析 （2）凝胶过滤 2. 浓缩 （1）蒸发 （2）超滤法 （3）凝胶吸水法 （4）冷冻干燥法 （三）酶的结晶 1. 盐析法 2. 有机溶剂法 3. 透析平衡法 4. 等电点法 四、酶活力的测定与纯度检验 1. 活力测定 无论在酶的抽提纯化过程中或是对酶的性质进行研究 过程中为了了解所选择方法是否适宜，几乎每一步骤前后 都应进行酶的活力测定，做出总活力和比活力的比较。 2.纯度检测 在酶的分离提纯中，总活力用于计算某一抽提或纯化 步骤后酶的回收率（Y），而比活力则用于计算某一纯化 步骤的效果，即纯度的提高（E），其关系如下： Y=某步骤后的总活力/某步骤前的总活力 E=某步骤后的比活力/某步骤前的比活力 五、菠萝蛋白酶 是从菠萝汁或加工菠萝削下的废皮中提取的一种蛋白水 解酶，粗菠萝水解酶是各种成分的混合物，除蛋白水解酶系 外，还含有磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶 及非蛋白物质。 实验证明，菠萝蛋白酶具有消炎抗水肿作用，作用特点 是能选择性水解纤维蛋白，对与凝血有关的纤维蛋白原仅有 微弱的作用，不影响正常血液的凝固。能分解肌纤维，可单 独或与胰蛋白酶制成合剂使用，消除各种单纯性炎症、水肿 、血肿，促进抗生素和化疗药物的渗透和扩散。 临床适用于治疗支气管哮喘、急性肺炎、产后乳房充血 、乳腺炎、产后血栓静脉炎、视网膜炎等。试用于同抗生素 配伍治疗关节炎、关节周围炎、蜂窝组织炎和小腿溃疡等。 （一）化学性质和组成 白色至浅棕黄色无定形粉末。略溶于水，水溶液无色至 淡黄色，有时有乳白光，不溶于乙醇、氯仿和乙醚，为 一种巯基酶。半胱氨酸能激活酶的活性，但受重金属抑 制。最适pH7.0，相对分子量33000。 主要作用原理：使多肽类水解为低分子量的肽类。 （二）生产工艺（白陶土吸附法） （吸附） 白陶土 10 菠萝蛋白酶成品湿菠萝蛋白酶精制品澄清液 粗制品 （沉淀） HCl pH4 （溶解） 自来水， NaOH 洗脱液 （盐析、抽滤） HCl，（NH4）2SO4 pH=4.55 吸附物 （洗脱） Na2CO3或NaOH （NH4）2SO4 pH=6.57 压出液 菠萝皮 （压榨） 苯甲酸钠 （干燥、粉碎） pH77.5 （三）检验方法 1. 性状 富有菠萝香气，浅黄色或浅棕黄色粉末。 2. 蛋白酶水解活力测定 （1）原理 菠萝蛋白酶在一定温度与pH条件下，水解 酪蛋白底物，然后加入三氯乙酸终止酶反应，并沉淀 除去未水解的蛋白，滤液对紫外光有吸收，用紫外分 光光度计法测定，根据吸光度计算酶活力。 （2）酶活力单位定义 在测定条件下 pH7.0，（ 37+0.2），每分钟水解酪蛋白释放出的三氯乙酸可 溶物在275nm的吸光度与1g酪氨酸的吸光度相当时 ，所需酶量为1U。 （3）测定步骤 适当稀释样品后，精密量取样品待测液1mL，置于具 塞试管中，于，37预温10min，迅速加入37预温的酪 蛋白溶液5mL，从开始加入起准确反应10min，加入三氯 乙酸溶液5mL，混匀，保温10min后过滤。 另量取1mL待测样品液于37预温10min，精密加入三 氯乙酸溶液5mL，准确反应10min，加入酪蛋白溶液5mL ，摇匀，保温10min后过滤，滤液作为上述溶液的空白对 照。用分光光度计在275nm的波长处测吸光度A。 以水做空白对照，在275nm的波长处测定50g/mL酪氨 酸吸光度A。 （四）菠萝蛋白酶在医药、保健品业的应用 1、抑制肿瘤细胞的生长 经相关临床研究观察表明，菠萝蛋白酶能抑制肿瘤 细胞的生长。 2、对心血管疾病的防治 菠萝蛋白酶作为蛋白水解酶对心血管疾病的防治是 有益的。它能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风, 缓解心绞痛症状,缓和动脉收缩, 加速纤维蛋白原的分解。 3、用于烧伤脱痂 菠萝蛋白酶能选择性地除 皮, 使新皮移植得以尽早进 行。动物实验证明, 菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良 影响。局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶的效果。 4、消炎作用 菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水 肿(包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖 尿病人溃疡及运动损伤)，菠萝蛋白酶具有激活炎症反 应的潜力。菠萝蛋白酶还可治疗腹泻。 5、增进药物吸收 将菠萝蛋白酶与各种抗生素(如四环素, 阿莫西林等 )联用, 能提高其疗效。相关研究表明, 它能促进抗生素 在感染部位的传输, 从而减少抗生素的用药量。据推断, 对于抗癌药物, 也有类似的作用。此外，菠萝蛋白酶能 促进营养物质的吸收。 第七章 多糖类药物 第一节 糖类药物概述 按照含有糖基数目的不同分为: 单糖：葡萄糖、果糖、氨基葡萄糖和维生素C等。 低聚糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖等。 多糖：（糖类药物研究的最多是多糖类药物 ）多糖如有 旋糖酐、甘露聚糖、香菇多糖、茯苓多糖等。 还有一些糖类药物是糖的衍生物，如6-磷酸葡萄糖，1， 6-二磷酸果糖，磷酸肌醇等。 多糖的药理作用 （1）调节免疫功能 主要表现为影响抗体活性，促进淋巴 细胞增殖，激活或提高吞噬细胞的功能。增强机体的抗 炎、抗氧化和抗衰老作用。 （2）抗感染作用，多糖可以提高机体组织细胞对细菌， 原虫，病毒和真菌感染的抵抗力。 （3）促进细胞DNA，蛋白质的合成，促进细胞的增殖、 生长。 （4）抗辐射损伤作用，抗射线的损伤，有抗氧化、防辐 射作用。 （5）抗肿瘤和抗凝血作用，肝素是天然抗凝剂。 （6）降血脂和抗动脉粥样硬化功能。硫酸软骨素、小分 子肝素、壳聚糖等具有降血脂、降血胆固醇，抗动脉粥样 硬化作用，用于防治冠心病和动脉硬化。 多糖 结合型 游离型 脂多糖：与脂类结合在一起 糖蛋白：与蛋白质结合在一起 多糖的相对分子量较大，有直链和支链两种，多可溶 于水，水溶液具有一定的黏度，能被酸、碱和酶水解成单 糖或低聚糖。 多糖根据来源不同可分为： (1) 植物多糖：黄芪多糖，人参多糖。 (2) 动物多糖：肝素，透明质酸，硫酸软骨素等。 (3) 微生物多糖：香菇多糖，灵芝多糖。 第二节 糖类药物的一般制备技术 一、单糖、低聚糖及其衍生物的制备 用水或在中性条件下以50乙醇，也可以用82乙醇， 在7078下回流提取。溶剂用量一般为材料的10倍，需多 次提取。 植物材料磨碎经乙醚或石油醚脱脂，拌加碳酸钙，以50 乙醇温浸，浸液合并，于4045减压浓缩至适当体积，用 中性醋酸铅去杂蛋白及其他杂质，铅离子可通H2S除去，再 浓缩至粘稠状。 以甲醇或乙醇温浸，去不溶物如无机盐或残留蛋白质等。 醇液经活性炭脱色、浓缩、冷却、滴加乙醚，或置于硫酸 干燥器中旋转，析出结晶。单糖或小分子寡糖也可以在提取 后，用吸附层析法或离子交换法进行纯化。 二、多糖的分离与纯化 多糖可来自动物、植物和微生物 ，植物体内含有水 解多糖衍生物的酶，必须抑制或破坏酶的作用后，才能制 取天然存在形式的多糖。 提取多糖的材料必须新鲜或及时干燥保存，避免受 高温破坏因此，速冻冷藏是保存材料的有效方法。 提取所用溶剂根据多糖的溶解性质而定。 （一）多糖的提取 提取多糖时，一般先需进行脱脂，以便多糖释放。 方法是将材料粉碎，用甲醇或11乙醇乙醚混合液，加 热搅拌13小时，也可用石油醚脱脂。动物材料可用丙 酮脱脂、脱水处理。 1、稀碱液提取 用于难溶于冷水、热水，可溶于稀碱液者。这一 类多糖主要是不溶性胶类，如木聚精、半乳聚糖等。 用冷水浸润材料后用0.5 molL NaOH提取，提取液 用盐酸中和、浓缩后，加乙醇沉淀得多糖。 如在稀碱中仍不易溶出者，可加入硼砂，对甘露 聚糖、半乳聚糖等能形成硼酸络合物的多糖，此法可 得相当纯的物质。 2、温热水提取 易溶于温水、难溶于冷水和乙醇者。材料用冷水浸 过，用热水提取，必要时可加热至8090搅拌提取。 提取液用正丁醇与氯仿混合液除去杂蛋白（或用三氯 乙酸除杂蛋白），离心除去杂蛋白后的清液，透析后用 乙醇沉淀得多糖。 3、粘多糖 因大部粘多糖与蛋白质结合于细胞中，因此需用酶解 法或碱解法使糖-白质间的结合键断裂，促使多糖释放。 （1）碱解法 多糖与蛋白质结合的糖肽键对碱不稳定，故 可用碱解法使糖与蛋白质分开。 （2）酶解法 蛋白酶水解法已逐步取代碱提取法而成为提取多糖的 最常用方法。 鉴于蛋白酶不能断裂糖肽键及其附近的肽键，为除去 长肽段，常与碱解法合用。 常用的酶制剂有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和链霉菌蛋白酶 及枯草杆菌蛋白酶。 （二）多糖的纯化 1. 乙醇沉淀法 乙醇沉淀法是制备粘多糖的最常用手段。乙醇的加 入，改变了溶液的极性，导致糖溶解度下降。 向溶液中加入一定浓度的盐，如醋酸钠，醋酸钾、醋 酸铵或氯化钠有助于使粘多糖从溶液中析出，盐的最终 浓度5即足够。 多次乙醇沉淀法脱盐，也可以用超滤法或分子筛法（ SephadexG-10或G-15）进行多糖脱盐。 沉淀物可用无水乙醇、丙酮、乙醚脱水，真空干燥即可 得疏松粉末状产品。 2. 分级沉淀法 不同多糖在不同浓度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶 解度不同，因此可用不同浓度的有机溶剂分级沉淀分 子大小不同的粘多糖。 在Ca2+、Zn2+等二价金属离子的存在下，采用乙 醇分级分离粘多糖可以获得最佳效果。 3. 季胺盐络合法 粘多糖与一些阳离子表面活性剂如十六烷基三 甲基溴化铵（CTAB）和十六烷基氯化砒啶（CPC） 等能形成季胺盐络合物。 络合物在低离子强度的水溶液中不溶解，在离子 强度大时，络合物可以解离、溶解、释放。 （三）多糖药物的鉴定检测方法 1. 定量测定 （1）苯酚-硫酸法 （2）蒽酮-硫酸法 （3）氨基己糖的比色测定 先在盐酸溶液中将氨基己糖经 碱性乙酰化后，再与对二甲基苯甲酸发生呈色反应，从而 进行定量测定。 2.鉴别 （1）测定糖基组成 （2）高压电泳法鉴定多糖均一性 （3）超离心法鉴定多糖均一性 （4）凝胶柱色谱法鉴定多糖均一性 （5）分子量测定 第三节 香菇多糖 一、结构与性质 为白色粉末状固体，对 光和热稳定。溶于水和 0.5mol/L的NaOH，不 溶于甲醇、乙醇、丙酮 等有机溶剂。 二、生产工艺 1.常规提取法 鲜香菇 捣碎 浸渍 过滤 浓缩 乙醇沉淀 乙醇、乙醚洗涤 干燥 成品 2. 复合酶提取法 3. 深层培养提取法 三、质量检测 1.试剂 浓硫酸：分析纯，95.5% 苯酚：80g苯酚加20g水使之溶解，可置冰箱中长期贮存 。 6%苯酚：临用前用80%苯酚配制。 标准葡聚糖、葡萄糖或标准香菇多糖。 2. 方法 （1）制作标准曲线 准确称取标准葡萄糖20mg溶于 500mL容量瓶中加水至刻度，分别吸取0.4mL、 0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL、1.6mL及 ，1.8mL各用水补充至2.0mL，然后加入6%苯酚 1.0mL以及浓硫酸5.0mL，静止10min，摇匀，室温 放置20min。在490nm处测光密度，以2.0mL水按同 样显色操作作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标 为光密度值，得标准曲线。 （2）样品含量测定。吸取1mL样品，按上述步骤操 作，测光密度，以标准曲线计算多糖含量。 第八章 脂 类 药 物 第一节 概 述 脂类物质是广泛存在于生物体中的脂肪及类似脂肪 的、能够被有机溶剂提取出来的化合物，由于分子中的 碳氢比例都较高，能够溶解在乙醚、氯仿、苯等有机溶 剂中，不溶于水。脂类化合物的这种性质，称之为脂溶 性，利用这一性质，将脂类物质用有机溶剂从生物体中 提取出来。 实际上，脂类药物往往是互溶在一起的，依据脂溶 性这一共同特点归为一大类成为脂类，而不是一个准确 的化学名词。 脂类药物是具有重要生理生化、药理药效作用的脂类物质 。 大体可分为以下几类： 胆汁酸类，如胆酸、脱氧胆酸。 不饱和脂肪酸类，如花生四烯酸、亚麻油酸等； 磷脂类，如：卵磷脂、脑磷脂； 固醇类，如：胆固醇、麦角固醇； 色素类，如：胆红素、血红素等； 其他，如鲨烯等。 一、脂类药物的制备方法 1. 直接抽提法 2. 水解法 3. 化学合成 4. 生物合成法 二、脂类药物的分离 1. 溶解度法 2. 吸附分离法 3. 超临界流体萃取技术 待分离物质 提 取 溶 剂 （脑干提取液） 丙酮 乙醇 乙醚 胆固醇 卵磷脂 脑磷脂 超临界流体（supercritical fluid, SF） 是指某种气体（液体）或气体（液体）混合物在操作压力和 温度均高于临界点时，使其密度接近液体，而其扩散系数和 黏度均接近气体，其性质介于气体和液体之间的流体。 超临界流体萃取法（supercritical fluid extra