CART培训ppt课件

CAR-T细胞治疗的介绍 1 目 录 1 2 3 4 5 6 相关概念介绍 文献研究 未来展望 CAR结构 T细胞活化 CAR-T细胞治疗的流程 2 1. 相关概念介绍 CAR-T细胞治疗 :利用基因工程修饰外周血 T细胞，使其表达嵌合抗原受 体来特异性的识别肿瘤相关性抗原的方法。 MHC： 由一群紧密连锁的基因群组成，定位于动物或人某对染色体的特定区 域，呈高度多态性。其编码的分子表达于不同细胞表面，参与抗原递呈，制 约细胞间相互识别及诱导免疫应答。 T细胞： 胸腺依赖性淋巴细胞是淋巴细胞的主要组分，它具有多种生物学 功能，如直接杀伤靶细胞、辅助或抑制 B细胞产生抗体，对特异性抗原和促 有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等，是身体中抵御疾病感染、肿瘤 形成的 “斗士 ”。 3 2. T细胞活化 TCR CD 3 MHC 共刺 激 因 子 细胞因 子刺 激 CA R CART细胞 治疗 的思 路 承担 T细胞识别抗 原的重任，结构 T细胞 第一信号 4 3. CAR结 构 识别肿瘤表面抗原的单链抗体（ scFv）抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序构成。 目前 , CAR的信号域已从第一代的单一信号分子发展为包含 CD28、 CD137等共刺激分子的多信号 结构域 (第二、三代 ), 临床应用广泛。 5 嵌合抗原受体的演化 第一代 CAR： 由识别肿瘤表面抗原的单链抗体（ scFv）抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序（通称为 CD3 ）组成。缺点： T细胞增值时间短，细胞因子分泌率低。 第二代、第三代 CAR： 引入了共刺激的双信号序列。目的：提高 T细胞的细胞毒活性、增值性与存活时间、 促进细胞因子的释放。 6 CAR-T细胞治疗优势 1. 治 疗 更精准 应用基因修饰病人自体的 T细 胞，利用抗原抗体结合的机 制，能克服肿瘤细胞免疫逃 逸，让肿瘤细胞无所逃遁； 2. 多靶向更精 准。 CAR既可以利用肿瘤蛋白质 抗原，又可利用糖脂类非蛋白 质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点 范围。 CAR-T细胞作用过程 不受 MHC的限制 。 3.杀 瘤范 围 更 广 鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿 瘤抗原的 CAR基因构建一旦 完成，便可以被广泛利用； 4. 杀 瘤效果更 持久 促进 T细胞增殖与活化的基因 序列，能保证 T细胞进入体内 后还可以增殖。 免疫记忆功能，可以长期在体 内存活。 7 4. CAR-T细胞治疗流程 CAR-T细胞治疗过程和自体骨髓干细胞移植相似 (Annu.Rev.Med,2014) 8 文献介绍 9 研究病人的基线特征 10 方法 自体 T细胞结合 CD19靶向的嵌合抗原受体慢病毒载体 （ CTL019 ） 复发或难治性 ALL患者 (30名患者 ) (0.76106-20.6106 CTL019 cells/kg ) 免疫应答 毒性效应 扩增数 持久性 CTL019 T cells 注入 检测 11 CTL019细 胞生存率 Figure 1.图 A注入 CTL019细胞后在 6个月期间的 无事件生存率为 67%，完全生存率为 78% (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 12 CTL019细 胞的持 续 性 Figure 2. CTL019持久性 图 A.： 流式检测外周血样中 CTL019-阳性 T 细胞（ 1-25号儿童和 26-30号成年人） 图 B ：通过 KaplanMeier curve曲线检测外周血和骨髓， 6个月时，患者获得 CTL019持续性 的概率为 68% (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 13 CTL019细 胞的 扩 增 Fig. 2C 通过实时定量 PCR检测 CTL019细胞在体内增殖，并可在响应患者的血液、骨髓和脑脊液中检 测到高水平的增值。 (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 14 不良反 应 Figure 3. B细胞发育不全 无复发患者 B细胞发育不全的概率为 73% 。延迟性 B细胞再生障碍 (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 15 不良反应 Figure 4. 相关的细胞因子释放症 CTL019 细胞 注入病人 28天后， IL-6大量 释放。 所有患者都有细胞因子释放综合症 ，其中 27%的患者症状较严重，这与输注 之前疾病负荷较高相关，这种症状经抗白 细胞介素 6受体 抗体 塔西单抗有效治 愈。 (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 16 结论 1. 嵌合抗原受体 抗 CD19修饰的 T细胞疗法对 治疗复发和难治型 ALL是有效的 。 研究中 30位接受此类治疗的急性淋巴细胞白血病病人中，有 27位 病人其癌症迹象消失，完全缓解率达到 90%,多数持续性长达 24 个月， 6个月无症状生存率未 67%， 2例在脑脊液中检测到肿瘤 细胞的中枢神经系统（ CNS）疾病患者在 CART治疗后疾病消 除，重要的是该组患者无复发。 2. CTL019和高缓解率有关，即使是干细胞移植失 败的患者也有效。 17 02 01 细胞因子风暴T细胞在杀死其它细胞，会释放很多细胞因子，炎症反应。 由于 CAR-T杀癌细胞太快，在局部产生超大量的细胞因子， 如白介素 6，引发起剧烈的免疫反应。 脱靶效应 CAR修饰的 T细胞对靶抗原具有高亲和力，识别并且 结合这部分抗原，导致对正常组织的异常免疫反应， 造成器官损害。 CAR-T疗法的临床风险 18 诱人的应用前景 寻找其他分子 靶点 提高 CAR有效性 和安全性 CAR修 饰 的 T细 胞 肿 瘤免疫治 疗 理 论 上的 优势 和 临 床前期 实验结 果 寻 找 肿 瘤特异性抗原作 为 分子靶点 和开 发 适合 CAR的 单链 抗体