乙(丙)型肝炎病毒高敏感度定量检测

乙（丙）型肝炎病毒高敏感度定量检测 目前，乙肝患者全球约 3.6 亿，我国占 1.2 亿，且乙肝发病率呈 明显增高的趋势。HCV 全球感染率约为 3%，约 1.8 亿人感染，每 年新发丙型肝炎病例约 3.5 万例，且未来 20 年内与 HCV 感染相关 的死亡率（肝衰竭及肝细胞癌导致的死亡）将继续增加。两种肝炎 以肝脏炎性病变为主，并存在多器官损害，部分患者可转化为肝硬 化或肝癌。 及时检测肝炎病毒，并明确其复制状况，对于临床诊断病毒性 肝炎及治疗效果评估具有重要价值。而目前使用的普通荧光定量 PCR 技术，相对于内标定量技术来讲，存在着灵敏度低，人为误差 高的弊端。为此，检验科特引进被誉为“国际分子诊断金标准” 的高 敏感度病毒载量检测平台-COBAS Ampliprep & COBAS Taqman 48 全自动实时荧光定量 PCR 系统，采用内标法进行病毒载量定量检 测。 一、高敏感度定量检测原理 COBAS Ampliprep 全自动核酸分离纯化系统，使用高质量的核 酸分离纯化该试剂（磁珠分离技术）从样本中分离纯化 RNA 或 DNA，并采用内标法进行定量，内标是已知拷贝数的人工构建的核 酸，加入每一个反应管，与靶核酸竞争扩增。可提示反应是否存在 反应抑制，避免假阴性，得到可靠精确的结果。 二、高敏感度定量检测优势 1、灵敏度高 可达到 15IU/m，可满足 WHO 肝炎诊断标准、治疗 要求。与普通 PCR 相灵敏度差异见下表。 检测方法及项目 HBV-DNA HCV-RNA 普通荧光定量 PCR 500 IU/ml 500 IU/ml 内标定量 PCR 20 IU/ml 15 IU/ml 2、检测线性宽 本法检测线性可达到 15 /20IU/ml1.18108 IU/ml。 3、检测对象涵盖面广 本法可以检测各种基因型及亚型乙/ 丙型肝炎 病毒，可有效避免因扩增模板设计原因导致的假阴性。 4、影响因素少 本法采用完全封闭、全自动的系统进行肝炎病毒检 测，除血清分离程序外，其他过程全部由设备自行进行检测。可有 效避免人为造成的实验误差。同时，也满足生物安全要求。 三、高敏感度定量适宜检测人群 1、疑似肝炎患者。 2、需要进行抗病毒治疗效果评估患者。 3、需调整抗肝炎病毒治疗方案者。 4、有肝炎病史且已治愈的拟受孕及孕期女性。 5、有肝炎病史且已治愈的拟母乳喂养及哺乳期妇女。 6、有肝炎病史且已治愈的拟生育男性。 7、肝炎所致肝癌后做过肝移植手术以后患者。 8、血液制品及献血员筛查。 9、转氨酶正常、血清学指标改变后，需要停止药物治疗的患者。 四、如何进行高敏感度定量检测 1、疑似病人随时抽血进行检测。 2、乙型肝炎患者抗病毒治疗期间，应至少每 3 个月监测一次 HBV- DNA 水平。 3、对于抗 HCV 阳性者、考虑接受抗病毒治疗者，在开始治疗前、 治疗第 4 周、第 12 周，均需要进行 HCV-RNA 检测。 4、有肝炎病史且已治愈的拟生育男性及女性，应在受孕前进行高敏 感度病毒载量检测。 5、有肝炎病史且已治愈的孕期妇女应在受孕早期、中期及晚期均进 行高敏感度病毒载量检测。 6、有肝炎病史且已治愈的生育后妇女，若想母乳喂养婴儿，除了对 婴儿进行疫苗接种及被动免疫外，还应在哺乳期间，定期进行高敏 感度病毒载量检测。 7、献血员及肝移植术后患者应定期进行高敏感度病毒载量检测。 五、标本如何采集 采集 EDTA 抗凝（紫帽血常规管）静脉血 3-4ml（通常可以采 集 2 管，每管 2ml） 。患者抽血前需要空腹。 六、如何开具高敏感度病毒载量检测化验申请单 在 HIS 中点击“组套” ，而后进入“检验科项目 ”，而后点击 “DNA/RNA”文件夹，在其中可以选择高敏感度乙型/丙型肝炎病 毒定量检测或乙型/丙型肝炎病毒内标定量检测（500 元/ 次） 。 七、结果汇报 周一到周六上午 10 点半之前送