针刺对血管性痴呆大鼠前额叶皮层氧化应激及神经元损伤的影响

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 针刺对血管性痴呆大鼠前额叶皮层 氧化应激及神经元损伤的影响 摘要：目的 观察针刺对慢性脑 低灌注大鼠前额叶皮层氧化应激及神经 元损伤的影响，探讨针刺改善血管性痴 呆（VD）大鼠认知损害的分子机制。 方法 采用永久性双侧颈动脉结扎法造 成大鼠慢性脑低灌注复制 VD 模型，造 模后大鼠随机分为模型组、针刺组和非 穴组，同时设假手术组作为对照。针刺 组和非穴组造模后 3 d 针刺治疗，2 周 后灌注取材。尼氏染色检测前额叶皮层 神经元数量，DHE 染色检测活性氧 （ROS）含量，黄嘌呤氧化酶法检测超 氧化物歧化酶（SOD）活性。结果 模 型组神经元数量、SOD 活性较假手术组 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 降低，ROS 含量升高；针刺组神经元数 量和 SOD 活性较模型组明显升高、 ROS 含量降低，同时非穴组各指标未见 明显改善。结论 针刺可抑制 VD 大鼠 前额叶皮层的氧化应激水平，改善神经 元损伤和丢失。 中国论文网 /6/view-12944125.htm 关键词：针刺；血管性痴呆；氧 化应激；神经元损伤；活性氧；超氧化 物歧化酶；大鼠 DOI：10.3969/j.issn.1005- 5304.2017.06.013 中图分类号：R245 文献标识码： A 文章编号： 1005-5304（2017）06- 0053-03 Abstract： Objective To observe the effects of acupuncture on oxidative stress and neuronal damage in the prefrontal cortex of chronic cerebral hypoperfusion （CCH） rats； To investigate the molecular mechanisms of acupuncture in cognitive impairment of -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 vascular dementia （VD） rats. Methods The animal model of VD was replicated by permanent bilateral common carotid artery occlusion （2VO） to induce CCH in rats. After modeling， rats were randomized into model group， acupuncture group and non-acupoint group. Sham-operation group was set as control group. Rats of acupuncture group and non- acupoint group were treated with needling for 2 weeks at 3 days after 2VO. Nissl and DHE staining were respectively used to evaluate the numbers of neurons and ROS level. SOD activity was examined by xanthine oxidase technique. Results Compared with sham-operation group， the number of neurons and SOD activity decreased in the model group， while the ROS level increased. Compared with the model group， the number of neurons and SOD activity increased in the acupuncture group， while the ROS level decreased. -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 There were no obvious changes in all indexes in non-acupoint group. Conclusion Acupuncture can inhibit oxidative stress and improve neuronal damage and loss in the prefrontal cortex of VD rats. Key words： acupuncture； vascular dementia； oxidative stress； neuronal damage； SOD； ROS； rats 血管性V 呆（VD）是常见呆 病，表现为脑血流减少，认知功能进行 性下降。临床上对 VD 尚无明确的诊断 和治疗标准1。有研究显示，永久性双 侧颈动脉结扎（2VO）造成的大鼠慢性 脑低灌注是最常用的 VD 模型2。造模 后皮层神经元损伤和丢失、白质损 基金项目：国家自然科学基金面 上项目（81473501） 通讯作者：刘存志，E- mail： 伤等病理改变均与认知功能损害 密切相关3。本课题组前期研究表明， 针刺能明显改善 VD 大鼠学习记忆4-5。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 本研究采用 2VO 模型，观察针刺对 VD 大鼠前额叶皮层氧化应激水平的影响， 探讨其相关机制。 1 材料与方法 1.1 动物 10 周龄 SPF 级雄性大鼠 48 只， 体质量 300320 g，北京市维通利华技 术有限公司，动物许可证号 SCXK（京） 2012-0001。饲养于中国中医科学院基 础理论研究所 SPF 级动物实验室。 1.2 主要试剂与仪器 焦油紫染色液（上海碧云天生物 技术公司） ，活性氧（ROS）试剂盒 （美国 GENMED 公司） ，超氧化物歧化 酶（SOD）试剂盒（南京建成生物工程 研究所） 。冰冻切片机（德国 Leica 公司） ，DHG-9023A 烤箱（上海林频仪器有 限公司） ，光学显微镜（日本 Olympus） ， 一次性无菌针灸针（华佗牌，0.25 mm13 mm） 。 5 SHI G X， WANG X R， YAN C Q， et al. Acupuncture elicits neuroprotective effect -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 by inhibiting NAPDH oxidase-mediated reactive oxygen species production in cerebral ischaemiaJ. Sci Rep，2015，5：17981. 6 LI H， LIU Y， LIN L T， et al. Acupuncture reversed hippocampal mitochondrial dysfunction in vascular dementia ratsJ. Neurochem Int，2016，92：35-42. 7 A 兴邦，李辞蓉，周浩良. 大鼠穴位图谱的研制J.实验动物与动 物实验，1991（1）：1-5. 8 林莺，纪峰，黄桂榕，等.针 刺实验研究中大鼠非经非穴选取方法及 思考J.针刺研究，2013，38（4）： 334-338. 9 LI F， YAN C Q， LIN L T， et al. Acupuncture attenuates cognitive deficits and increases pyramidal neuron number in hippocampal CA1 area of vascular dementia ratsJ. BMC Complement Altern Med， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 2015，15：133. 10 FARKAS E， LUITEN P G， BARI F. Permanent， bilateral common carotid artery occlusion in the rat：a model for chronic cerebral hypoperfusion-related neurodegenerative diseasesJ. Brain Res Rev，2007，54（1）：162-180. 11 CHOI D H， LEE K H， KIM J H， e