补肾调肝法对骨关节炎软骨和滑膜诱导型一氧化氮合酶的影响

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 补肾调肝法对骨关节炎软骨和滑膜 诱导型一氧化氮合酶的影响 【摘要】 目的：研究补肾调肝 法对骨关节炎软骨和滑膜诱导型一氧化 氮合酶的影响。方法：通过切断膝关节 前交叉韧带和内侧副韧带造成膝 OA 模 型。将 24 只普通级新西兰兔随机分为 A 组（正常组） 、B 组（模型组） 、C 组 （活血法组） 、D 组（补肾调肝法组） 。 给药 4 周后处死实验兔，行关节腔大体 观察，关节液 NO 含量检测，滑膜、关 节软骨组织学观察，滑膜、关节软骨 iNOS 含量检测，观察肝肾亏虚型与正 常软骨和滑膜标本对补肾调肝治法的应 答的不同。结果：D 组关节腔大体观察 与 C 组比较，差异无显著性(P0.05)； -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 D 组关节液 NO 含量检测与 C 组比较， 差异显著(P 中国论文网 /6/view- 12956446.htm 【关键词】补肾调肝法；中医治 法；软骨和滑膜；一氧化氮合酶 【中图分类号】R352 【文献标 识码】B 【文章编号】1005-0515(2011) 05-0301-02 骨关节炎（Osteoarthritis，OA） 是各种力学和生物因素破坏关节软骨、 细胞外基质和软骨下骨的退变及合成稳 定性的结果。临床上以关节疼痛、或有 肿胀、活动受限和关节畸形等症状为主。 现代医学对大部分患者多采用非手术治 疗，包括理疗、支具、矫形器、助行用 具、非甾体类抗炎药物和中医药治疗。 仅对少部份患者采用关节镜冲洗清理术、 截骨术、关节融合或关节置换术等。目 前临床应用中医药治疗骨关节炎取得了 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 较好疗效1-3 。本研究我们在兔 KOA 动物模型上，观察了关节液一氧化氮 (NO)含量、滑膜和软骨病变计分、软骨 和滑膜 iNOS 含量，以探讨补肾调肝法 对 OA 的治疗作用及其机制，为临床应 用提供依据。 1 材料和方法 1.1 实验动物及分组：选择成年 健康普通级新西兰兔 24 只（由广州中 医药大学实验动物中心提供，动物合格 证编号：0055773） ，体重 1.82.3kg。 按随机数字表法随机分成 4 组：A 组 （正常组） 、B 组（模型组） 、C 组（活 血法） 、D 组（补肾调肝法） ，每组 6 只， 分别编号。 1.2 造模方法：手术切断膝关节 前后交叉韧带和内侧副韧带制造兔膝骨 关节炎软骨退行性变模型。采用化学纯 氨基甲酸乙酯麻醉，用 0.9%氯化钠溶 液将其配成 20%的溶液，按 1 g/Kg 体 重比例作耳缘静脉注射。麻醉后，剪除 右后肢膝关节周围毛发，常规消毒，髌 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 旁内侧切口长约 3 cm，切开关节囊，将 髌骨向外翻转，切断前交叉韧带和内侧 副韧带，止血，缝合关节囊及皮肤。术 后 3 天行肌注青霉素 40 万 U/d，以预防 感染。A 组不手术。4 周以后喂服药物 1 次/日，连续给药 4 周。A 组与 B 组喂 服与 D 组中药等量的淀粉颗粒 1 次/日。 1.3 药物治疗与标本采集：药物 组与剂量：C 组：当归 10g，赤芍 9g，川芎 6g，红花 3g，桃仁 9g，牛膝 10g，枳壳 10g，地龙 6g；D 组：独 活 9g，寄生 6g，杜仲 6g，牛膝 6g，细 辛 6g，秦艽 6g，茯苓 6g，肉桂心 6g， 防风 6g，川芎 6g，种洋参 6g，白芍 6g，熟地 6g，甘草 6g。为提高实验结 果的重复性，使用由江阴天江药业有限 公司生产的单味中药浓缩颗粒剂组配， 并且要求同一批号。用药剂量按 Meeh- Rubner 公式 A(体表面积)=K(系数) W(体重 g)2/3 10-4 体表面积换算，用 适量温开水将中药浓缩颗粒剂搅拌均匀 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 后灌胃。动物分笼标准饲养。于手术后 8 周予过量麻醉处死，处死当天不给药。 处死后每只动物依次打开关节腔行大体 观察。用锐利刀片切取内侧滑膜和股骨 内髁下面全层关节软骨，留作实验标本。 将取出的滑膜、软骨标本分成两等份。 1.4 观测指标：包括关节腔大体 观察；组织学观察；关节液 NO 含量测 定；滑膜、软骨 iNOS 检测。 1.5 统计学方法：本研究的数据 以 Xs 表示。采用 SPSS16.0 统计软件 进行数据录入和统计处理，显著性比较 采用 t 检验处理。 2 实验结果 表 1 关节液 NO 含量、滑膜和软 骨病变计分、软骨和滑膜 iNOS 含量 (Xs) 组别 关节液 NO（mol L） 滑膜病变计分 软骨病变计分滑膜 iNOS 含量（mol L） 软骨 iNOS 含量 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 （mol L） A 54.074.23 1.190.15 0.890.10 0.90.07 0.170.03 B 82.687.28 1.970.11 1.560.14 1.800.12 0.500.04 C 63.906.46 1.570.12 1.260.09 1.350.10 0.370.06 D 48.276.20 1.210.10 0.940.15 0.750.32 0.230.06 关节液 NO 含量：B 组与 A 组 相比较，P0.05)，但与 B 组比较均明显 降低，有显著性差异(P0.05)，D 组与 B 组比较有显著性差异(P0.05)，D 组与 B 组比较有显著性差异(P0.05)，D 组与 B 组比较有显著性差异(P0.05)，D 组与 C 组比较有显著性差异(P0.05)。提示 膝 OA 早期兔模型中，使用补肾调肝法 和活血法均可降低滑膜和关节软骨 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 iNOS 的表达；但两种方法比较，而使 用补肾调肝法更优于活血法. 3 讨论 NO 作为生物体内重要的信号分 子和效应分子，广泛参与 OA 软骨细胞 和软骨基质的代谢过程，在 OA 的发病 中起着重要作用4。在 OA 患者中，内 皮细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、滑膜 细胞和关节软骨等显著表达 iNOS，合 成 NO 增加，使得血清和关节液中 NO 含量增高，NO 又进一步促进炎性细胞 因子释放，从而影响软骨的营养交换， 导致软骨质骨不断下降和进行性退化， 继而出现临床症状骨关节炎属于祖国医 学“骨痹”范畴。中医学认为，肝藏血、 主筋，肝血充盈，有利于筋的正常活动； 肝血不足，筋的功能就会发生异常。四 肢关节的屈伸运动于肝有一定关系，而 肝的病变，又可出现筋挛拘急等症状。 故以补肾调肝为本病的基本治法，使精 髓充足，筋骨得以润养填充，关节功能 得以恢复，起到了控制症状和改善病情 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 的双重作用。 补肾调肝法组方中取杜仲、熟地 黄、牛膝、补益肝肾、强壮筋骨；取芍 药、川芎、当归、补血调肝活血。诸药 合用，使气血旺盛，肾气充足，肝血滋 润，筋骨强劲，全方标本兼治，共奏补 肾调肝、舒筋通络止痛之功，从而达到 治疗 OA 的目的。实验中膝骨性关节炎 模型关节滑液 NO 含量明显高于正常组， 表明 NO 是引起膝骨性关节炎的重要介 质。采用活血法和补肾调肝法均可降低 关节液 NO、NOS 及关节软骨子 iNOS 的表达含量