强力升白片中没食子酸的含量测定方法研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 强力升白片中没食子酸的含量测定 方法研究 【摘要】目的：构建强力升白片 中没食子酸的含量测定方法，以更好控 制此产品质量。方法：运用反相高效液 相色谱法，以甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液 为流动相，ALLTIMA C18 为色谱柱， 检测波长为 265nm。结果：当食子酸的 进样量处于 0.0400.240g 区间内时， 其与峰面积值之间线性关系较好 （r=0.9999） 。相对标准差（RSD）1.96%， 平均加样回收率 100.41%。结论：高效 液相色谱法准确、可靠，且简便、易操 作，可以用作此产品的质量控制。 中国论文网 /1/view-13036839.htm 【关键词】强力升白片；高效液 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 相色谱法；没食子酸；质量 【中图分类号】R927.2 【文献标 识码】A 【文章编号 】2095- 6851（2017）12-0-02 强力升白片由多种中药组成，如 丹参、黄芪、地榆等，具有活血、益气 等功效，多用于治疗由化疗、放疗等所 造成的白细胞减少，总体效果佳1。此 产品原为地方品种，当将其更改为部颁 品种之后，开始以药方君药地榆中的没 食子酸作为主要指标成分，构建了专门 用于测定没食子酸含量的高效液相色谱 （HPLC）法，为更好控制此产品质量， 提供了准确、客观、高效的定量评价方 法。 1 仪器与试药 （1）仪器。选用由美国 Waters 公司生产的高效液相色谱仪（515 型） 与紫外检测器（2487 型） ；日本岛津生 产的紫外可见分光光度计（UV-2200） ； 德国 Sartorius 公司产的万分之一电子天 平。 （2）试药。选用由中国药品生物制 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 品检定提供的没食子酸，当完成色谱条 件的选定及分离后，依据归一化法进行 计算，得出没食子酸含量为 99.27%， 用 P2O5 干燥器进行减压干燥处理，使 其至恒重。所选用乙腈、甲醇，均为色 谱，而诸如磷酸等试剂，则均为分析 纯，所用水为重蒸馏水。 2 方法与结果 （1）色谱条件。色谱柱为 ALLTIMA C18， 250mm4.6mm，5m，柱温为 30。流动相为 0.1%磷酸溶液-乙腈-甲 醇，比例为 89：6：5；灵敏度为 0.01AUFS，流速为 1.0ml/min，检测波 长 265nm。 （2）确定检测波长。精取适 量没食子酸对照品，流动相稀释，即 2.0g/ml，设定流动相为空白，于 200600nm 波长区间内，扫描操作。 最终结果得知，波长为 270nm 处，Cur 吸收最大。 （3）制备标准曲线。取适量 对照品（没食子酸） ，甲醇溶解、稀释， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 制成储备液（20.0g/ml） ，然后分别精 取 2.0l、4.0l、6.0l 、8.0l 、10.0l 与 12.0l，进样，绘制色谱图，完成其 峰面积测定工作；然后以峰面积值（A） ， 回归分析进样量（C） ，最终可得到回归 线方程，即 A= 1.095103+2.687106C，r=0.9999。由 此可知，没食子酸进样量处于 0.0400.240g 区间内，其与峰值面积 值之间，线性关系较好。 （4）制备供试 品溶液。取 1g 重量差异项下内容物， 置入烧瓶，加入 25ml 浓度为 50%的甲 醇，称重，沸水浴中，回流，提取 1h， 然后置于室温环境，再次称重，用浓度 为 50%的甲醇，将减失重量补充，滤过 处理后，便得。将色谱条件选定之后， 对于没食子酸中以及其它样品中的其它 组分色谱峰，可以进行基线分离，分离 度1.5；依据没食子酸峰来进行细致计 算，拖尾因子（T）1.01，理论板数 （N）3000 ，此外，精取阴性供试品， 将其放置在没食子酸色谱峰处，未出现 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 色谱峰。 （5）精密度试验。精取 10l 试品溶液，连续进行 5 次进样，测出没 食子酸峰面积相对标准差（RSD） ，即 0.73%。由实验得知，整体精密度较好。 （6）稳定性试验。精取供试液，分别 在 0h、2 h、4 h、6 h 与 8 h 时，进样 10l，得出没食子酸峰面积值 RSD 为 0.45%。表明，供试液在 8h 内，有着较 好的稳定性。 （7）重复性试验。依据上 述制定好的含量测定法，分别取 5 份同 一批次的样品，依次制备对应的样品供 试液，经检测得知，没食子酸含量 RSD 为 0.70%。 （8）回收率实验。分别取已 经知道含量的样品（含量为 0.2302mg/g） ，均为 0.5g，然后分别将 其加入至没食子酸对照品溶液中，没食 子酸对照品溶液剂量分别为 100l、200l、300l ，添加完毕后，进 行样品供试液的精确制备，测定没食子 酸的含量，最终完成回收率的计算。 （9）测定样品。分别对三批中试样品 （020207、020208、020209）中进行没 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 食子酸含量与相对标准差的测定，最终 结果得知，020207 的没食子酸含量为 0.0230mg/片，相对标准差为 0.59%； 020208 的没食子酸含量为 0.0311mg/片，相对标准差为 0.80%； 020209 的没食子酸含量为 0.0325mg/片，相对标准差为 0.55%。 3 讨论 有研究2分别利用 HPLC 法、薄 层色谱法，对没食子酸含量进行了测定。 本次研究曾依据文献，用甲醇-水-N、 甲醇-水，将冰醋酸溶液- 二甲基甲酰胺- N 作为流动相，但最终仍难以较好的对 本品中没食子酸含量进行有效分离与准 确测定。没食子当中主要为可水解的鞣 质，通过加热处理，能够从中提取没食 子酸，所以，本次试验选用反相高效液 相色谱法，来测定强力升白片中没食子 酸的含量。由本次试验得知，将一定量 乙腈-浓度为 0.1%磷酸溶液-甲醇作为流 动相，并对流动相比例、柱温、流速等 色谱条件进行适当性优化，能够较好的 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 从本品中将没食子酸峰分离出来，另外， 经实验还得知，所构建的高效液相色谱 测定方法，在测定地榆药材中没食子酸 含量中，同样适用。用不同提取时间 （0.5h、1 h、1.5 h 与 2 h） 、不同提取方 法（超声或回流） 、不同溶剂（50%甲 醇、75% 甲醇、乙醇、甲醇） ，提取本 品中的没食子酸。最终结果得知，1.0g 本品，用 25ml 浓度为 50%的甲醇，回 流提取 1h，有着良好的提取效果。究其 原因，因为地榆中的可水解鞣质，具有 较差的稳定性，若放置较长时间，或加 热煮沸，便能分解成没食