山椒子中化学成分的研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 山椒子中化学成分的研究 摘要 目的 研究山椒子叶子中 的化学成分。 方法 采用 95%乙醇对山 椒子叶子进行提取，乙醇浸膏以水稀释 后分别用石油醚和乙酸乙酯进行萃取， 得到石油醚和乙酸乙酯萃取部位。各萃 取部位采用硅胶柱色谱、Sephadex LH- 20 凝胶过滤等多种色谱方法进行化学成 分的分离、纯化，化合物结构鉴定采用 核磁数据分析及与文献数据对比。 结 果 从山椒子的叶子中共分离得到 8 个 化合物，经鉴定为：-谷甾醇（） 、 glut-5-en-3-ol（） 、蒲公英赛醇（） 、 spathulenol（ ） 、人参炔醇（） 、苯 甲酸（） 、山柰酚（）和（-）- clovane-2，9-diol （） 。 结论 化合物 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 、为首次从该植物中 分离得到。 中国论文网 /6/view-12874465.htm 关键词 山椒子；番荔枝科；化 学成分；倍半萜 中图分类号 R931.71 文献标识 码 A 文章编号 1673-7210（2017） 01（c）-0020-03 Abstract Objective To investigate the chemical constituents of Uvaria grandiflora. Methods The leaves of Uvaria grandiflora was extracted with 95% EtOH to give ethanol extracts， which was further diluted by H2O and extracted with petroleum ether and EtOAc， respectively. The petroleum ether and EtOAc extracts afforded by extraction were isolated and purified by different chromatography， such as silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography. The structures of isolated compounds were identified by NMR data analysis and -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 comparison. Results Eight known compounds were obtained and identified as -sitosterol （） ， glut-5-en-3-ol （） ， taraxerol （） ， spathulenol （） ， panaxynol （ ） ， benzoic acid （） ， kaempferol （） and （-）-clovane-2，9-diol （）. Conclusion Compounds， ， ， ， are isolated from this plant for the first time. Key words Uvaria grandiflora； Annonaceae； Chemical composition； Sesquiterpenoids 山椒子（Uvaria grandiflora Roxb.） ，别名川血乌、大花紫玉盘、葡 萄木等，为番荔枝科紫玉盘属植物攀援 灌木，主要分布于我国广东南部和海南 等地1，广西亦有分布 2。番荔枝科 植物因含有一类结构新颖的抗肿瘤化学 成分番荔枝内酯（annonaceous acetogenins）而受到广泛关注，已有多 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 种该科植物进行了化学成分及生物活性 的研究3-5 。山椒子的根在民间常被用 于咽喉肿痛的治疗，之前的药理活性筛 选则发现该植物具有较好的抗肿瘤活性， 在随后对该植物的化学成分研究中分离 得到番荔枝内酯类、多氧取代环己烯类、 芳香类和酰胺类等多种类型化合物6-16。 本课题组进一步对其化学成分进行研究， 从山椒子叶中分离得到 8 个化合物（图 1） ，分别鉴定为 -谷甾醇（） 、glut- 5-en-3-ol（） 、蒲公英赛醇（） 、 spathulenol（ ） 、人参炔醇（） 、苯 甲酸（） 、山柰酚（）和（-）- clovane-2，9-diol （） ，其中，化合物 、为首次从该植物中 分离得到。 1 仪器与材料 核磁共振仪（美国 Varian 公司， Unity INOVA 400/54） 。色谱用硅胶 G 和 H（青岛海洋化工厂） ，Sephadex LH- 20（美国 GE） 。 山椒子叶于 2013 年 6 月采自广 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 西，由贵州医科大学药学院生药学教研 室韦欣副教授鉴定为紫玉盘属山椒子 （U.grandiflora） 。 2 方法与结果 2.1 提取与分离 山椒子树叶 8.8 kg，用 95%乙醇 回流提取 3 次，每次 30 L，减压浓缩得 到乙醇浸膏。将浸膏悬浮于水中得混悬 液 13 L，依次用等体积石油醚（13 L） p 乙酸乙酯（ 13 L）分别萃取 3 次， 减压浓缩得到石油醚浸膏 A（108 g）和 乙酸乙酯浸膏 B（150 g） 。 A 部分经硅胶柱层析，石油醚 乙酸乙酯（50111）梯度洗脱得 到 10 个组分（A1A10） 。A5 经硅胶 柱层析得到组分 A5-1 和 A5-2。A5-1 经 乙酸乙酯重结晶得到化合物（38 mg） ， A5-2 经硅胶柱层析和制备薄层层析得 到化合物（50 mg） 。 A6 经硅胶柱层 析（石油醚丙酮为 201）得到组分 A6-1 和 A6-2。A6-1 经制备薄层层析 （氯仿丙酮为 601）和 Sephadex -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 LH-20 葡聚糖层析（氯仿甲醇为 21）得到化合物（17 mg） 。A7 直 接析出化合物（18 mg） 。A8 经反复 硅胶柱层析及 Sephadex LH-20 葡聚糖层 析得到化合物（9 mg） 。A10 直接析 出化合物（40 mg） 。 B 部分经硅胶柱层析，氯仿甲 醇（90121）梯度洗脱得到 13 个 组分（B1 B13） 。B5 经过反复硅胶柱 层析，Sephadex LH-20 葡聚糖层析及环 己烷重结晶得到化合物（3 mg） ；B6 再过反复硅胶柱层析（环己烷乙酸 乙酯为 41） ，Sephadex LH-20 葡聚糖 层析（氯仿甲醇为 21）得到化合物 （12 mg） 。 2.2 结构鉴定 2.2.1 化合物 白色针状结晶 （石油醚-乙酸乙酯） 。mp 141143。 1H-NMR（400 MHz，CDCl3） ：0.67（3H ，s，H-18 ） ， 0.79（3H，d，J = 6.6 Hz，H-27） ， 0.81（3H，d，J = 7.9 Hz，H-26） ， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 0.84（3H，t，J = 7.8 Hz，H-29 ） ， 0.92（3H，d，J = 6.1 Hz，H-21） ， 1.00（3H，s，H-19） ， 3.51（1H，m，H-3） ，5.33（1H，br s，H-6） ，数据与文献17一致。化合物 与 -谷甾醇标准品共薄层，Rf 值相 同，与 -谷甾醇标准品混合后熔点未发 生变化，故鉴定化合物为 -谷甾醇。 2.2.2 化合物 白色针状晶体 （乙酸乙酯） 。1H-NMR（400 MHz， CDCl3） ：0.84，0.95 ，0.98，1.00 ，1.04，1.09 ， 1.14，1.16 （each 3H，s，Me8 ） ， 3.46（1H，br s，H-3 ） ， 5.62（1H，d，J = 5.8 Hz，H-6） 。13C- NMR（100 MHz，CDCl3） ：23.6（C-1 ） ，18.2（C-2 ） ，76.3（C- 3） ，39.3（C-4） ，141.6（C-5） ， 122.0（C-6） ，27.8（C-7） ，43.0（C-8） ， 34.8（C-9） ，49.7（C-10） ，34.6（C-11） ， 30.3（C-12） ，37.8（C-13） ，40.8（C- 14） ，32.0（C-15） ，36.0（C-16） ， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 30.0（C-17） ，47.4（C-18） ，35.0（C- 19） ，28.2（C-20） ，33.1（C-21） ， 38.9（C-22） ，28.9（C-23） ，25.4（C- 24） ，16.2（C-25） ，18.4（C-26） ， 19.6（C-27） ，32.4（C-28） ，34.5（C- 29） ，32.0（C-30） 。以上数据与文献18对 照一致，故鉴定化合物为 glut-5-en-3- ol。 2.2.3 化合物 白色粉末。1H- NMR（400 MHz，CDCl3） ：0.80，0.82 ，0.90，0.90 ，0.92，0.95 ，0.97，1.08（each 3H，s，Me8 ） ， 1.89-2.04（2H，m，H-2 ） ， 3.19（1H，dd，J = 4.4，10.8 Hz，H-3） ， 5.53（1H，dd，J = 3.0，8.0 Hz，H-15） 。 13C-NMR（100 MHz，CDCl3） ：37.7（C-1 ） ，27.1（C-2 ） ，79.0（C- 3） ，38.9（C-4） ，55.5（C-5） ，18.8（C- 6） ，35.1（C-7） ，38.7（C-8） ，49.2（C- 9） ，37.5（C-10） ，17.5（C-11） ， 36.6（C-12） ，38.0（C-13） ，158.0（C- 14） ，116.8（C-15） ，37.7（C-16） ， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 38.9（C-17） ，48.7（C-18） ，41.3（C- 19） ，28.0（C-20） ，33.7（C-21） ， 33.1（C-22） ，28.8（C-23） ，15.4（C- 24） ，15.4（C-25） ，29.9（C-26） ， 25.9（C-27） ，29.8（C-28） ，33.3（C- 29） ，21.3（C-30） 。以上数据与文献19对 照一致，故鉴定化合物为蒲公英赛醇 （taraxerol） 。 2.2.4 化合物 无色油状物。 1H-NMR（400 MHz，CDCl3） ：0.46（1H ，dd，J = 9.5，11.2 Hz，H-1） ，0.71（1H，m ，H-2 ） ， 1.04（3H，s，H-13） ， 1.05（3H，s，H-12） ， 1.28（3H，s，H-15） ，4.66（1H，br s，H-14a） ，4.69（1H，br s，H-14b ） 。 13C-NMR（100 MHz，CDCl3） ：29.9（C-1 ） ，27.4（C-2 ） ，24.7（C- 3） ，38.8（C-4） ，153.4（C-5） ， 53.4（C-6） ，26.7（C-7） ，41.7（C-8） ， 80.9（C-9） ，54.3（C-10） ，20.2（C-11） ， 28.6（C-12） ，16.3（C-13） ，106.2（C- -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 14） ，26.0（C-15） 。稻萦胛南 20 一致，故鉴定化合物为 spathulenol。 2.2.5 化合物 无色油状物。 1H NMR（400 MHz，CDCl3） ：0.88（1H ，t，J = 6.5 Hz，H-17） ， 2.02（2H，q，J = 7.1 Hz，H-11） ， 3.03（2H，d，J = 6.8 Hz，H-8） ， 4.91（1H，d，J = 5.2 Hz，H-3） ， 5.23（1H，d，J = 10.1 Hz，H-1） ，5.34- 5.40（1H，m，H-9） ，5.46（1H，d，J = 17.0 Hz，H-1） ，5.49- 5.54（1H，m，H-10） ， 5.93（1H，ddd，J = 5.3，10.1，16.8 Hz，H-2） 。13C NMR（100 MHz， CDCl3） ：117.0（C-1） ， 136.1（C-2） ，63.5（C-3） ，74.2（C-4） ， 71.2（C-5） ，64.0（C-6） ，80.2（C-7） ， 17.6（C-8） ，121.9（C-9） ，133.0（C- 10） ，27.1（C-11） ，29.2（C-12） ， 29.1（C-13） ，29.1（C-14） ，31.8（C- 15） ，22.6（C-16） ，14.0（C-17） 。数据 与文献21一致，故鉴定化合物为人 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 参炔醇（panaxynol ） 。 2.2.6 化合物 白色粉末。mp 122124。1H-NMR（400 MHz， CDCl3） ：7.47（2H，t，J = 7.3 Hz，H-2 和 H-6） ，7.61（1H ，t ，J = 7.3 Hz，H-4） ，8.12（2H，d，J = 7.3 Hz，H-3 和 H-5） ，数据与文献 22一致。 与苯甲酸对照品共薄层 Rf 值相同，与 苯甲酸标准品混合后熔点未发生变化， 故鉴定化合物为苯甲酸。 2.2.7 化合物 黄色粉末。1H NMR（400 MHz，CD3OD） ：6.16（1H ，s，H-6 ） ， 6.38（1H，s，H-8） ，6.89（1H，d，J = 8.2 Hz，H-3 ，5） ，8.07 （2H，d，J = 8.1 Hz，H-2 ，6 ） 。13C NMR（100 MHz， CD3OD） ：148.0（C-2） ， 137.1（C-3） ，177.3（C-4） ，162.5（C- 5） ，99.2（C-6） ，165.5（H-7） ， 94.4（C-8） ，160.5（C-9） ，104.5（C- 10） ，123.7（C-1） ，130.6（C-2） ， 116.3（C-3 ） ，158.2（C-4） ， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 12 116.3（C-5 ） ，130.6（C-6） 。数据与文 献23一致，故鉴定化合物为山柰酚 （kaempferol ） 。 2.2.8