病毒性肝炎研究进展

病毒性肝炎研究进展,兰大一院消化科 李强,1,内容提要,历史回顾乙型肝炎研究进展丙型肝炎新的肝炎病毒肝炎病毒检测的技术,2,历史回顾,1965 Blumberg发现“澳大利亚抗原”1970 Dane发现病毒颗粒1973 Feinstone发现HAV颗粒1975 制备血源性乙肝疫苗和HBIG1976 干扰素用于治疗慢性乙肝1977 Rizzetto发现抗原1986 重组HB疫苗进入市场1986 Provost研制出HAV疫苗1989 Choo发现HCV1990 Reyes发现HEV1999 拉米夫定被FDA和SDA批准 2001 PEG干扰素用于HCV治疗,3,HBV病毒学,嗜肝DNA病毒科，基因长3.2kb4个开放读码框架：Pre-S/S、Polymerase Precore/core、XCore promoter和Precore区变异X蛋白与肝癌的发生有关cccDNA是HBV复制的模板大多数抗病毒药物对cccDNA的作用小或无作用,4,HBV 和 HCV 特点,HBV双链 DNA 病毒嗜肝 DNA 病毒科4 个开放读框 高病毒血症高感染性 与宿主基因整合无细胞毒性,HCV单链 RNA 病毒黄病毒科1 个开放读框 低病毒血症低感染性 不与宿主基因整合细胞毒性 (?),5,部分双链的DNA,胞浆膜,乙肝病毒的复制拉米夫定的抑制作用,细胞核,细胞浆,内质网,拉米夫定,A(n),有感染性的HBV毒粒,(-)-DNA,mRNA,cccDNA,有感染性的HBV毒粒,有包膜的前基因组,肝细胞,转录,逆转录,HBsAg的囊膜抗原成分,翻译,6,关于HBVDNA 变异和突变的表述,任何与已发表的野生型序列的变异均可称为“变异”（variant)。只有在特定的选择压力下出现的并且被证实有特殊表型者才被考虑为“突变”（mutant）蛋白质用小写字母表示（c, e, p, s, x）氨基酸用单个大写字母来表示，从每个蛋白的一个密码子开始计数eW28X核苷酸亦用大写字母来表示，从EcoRI位点来计数G1896ADNA聚合酶（有型别不同）：把聚合/逆转录酶功能区的起始部位定义为1。M204V(M552V), M204I(M552I), L180M(L528M),Lok AS, et al. Gastroenterology 2001; 120:1828-53.,7,HBV血清型和基因型的地理分布,基因型 血清型 流行地区A adw2, ayw1 欧洲西北部、美国、非洲中部B adw2, ayw1 中国大陆、台湾、日本、印度尼西亚 越南 C adw2, adrq+, adrq- , ayr 中国大陆、台湾、日本、韩国、越南 玻利尼西亚D ayw2, ayw3 地中海地区、印度 E ayw4 非洲西部 F adw4q-, adw2, ayw4 非洲中部和南部、玻利尼西亚G adw2 法国、美国,8,不同人群HBV 学情标志物的流行率（）,人群HBsAg所有标志物出生于流行区者137085男性同性恋（MSM）63585注射毒品（IDU）76080透析病人3102080HIV感染者8118990孕妇0.41.5家庭内/性接触36 3060,9,HBV感染的有关定义,慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B)非活动性HBsAg携带状态 (inactive HBsAg carrier state)乙型肝炎已康复(resolved hepatitis B)乙型肝炎的急性加重或发作 (acute exacerbation or flare of hepatitis B)乙型肝炎的再活动 (reactivation of hepatitis B)HBeAg的清除 (HBeAg clearance)HBeAg血清转换 (HBeAg seroconversion)HBeAg的反向转换 (HBeAg reversion),10,HBV感染的途径与血清学类型,1型：围产期感染，在亚洲和大洋洲，50% HBV感染者属此类型免疫耐受期长，血清转换晚2型：儿童期获得性感染（接触传播）,主要见于南部非洲、阿拉斯加及地中海地区HBeAg血清转换发生于青春期前后3型：成人期获得性HBV感染（性传播）主要见于发达国家,11,HBV感染的自然史血清学变化,在亚洲和大洋州，HBeAg的清除率为每年8%12%亚洲儿童HBeAg的清除率较低（ALT多正常）在Alaska， HBV携带者5年的HBeAg清除率为45%，10年的清除率为80%在意大利和中国台湾，ALT升高儿童的3年的HBeAg清除率为50， 5年为70%HBsAg的清除率为每年0.5%,12,HBV感染的自然史临床转归,就诊的HBsAg携带者肝硬化的发生率为每年2%3%发生肝硬化的危险因素： HBeAg+, 年龄, ALT 肝硬化患者发生失代偿的危险因素为：HBeAg+，对干扰素无应答代偿性肝硬化患者的5年生存率为84% ，10年为68%代偿性肝硬化患者中，HBeAg阴性者的5年生存率（97%）高于HBeAg阳性者（72%）失代偿性肝硬化患者的5年生存率仅为14%自发的或治疗后HBeAg转阴者均失代偿, 存活率,13,慢性HBV感染者的初次评估,病史及体检肝功能、血常规、PT病毒复制指标：HBV DNA、HBeAg/抗-HBe排除引起的肝病的其它原因：抗HCV、抗HDVHCC的筛查：AFP、肝脏超声检查（US）对于符合慢性乙肝者，建议肝穿刺活检，以便对肝脏病变进行分期、分级,14,对慢性乙肝感染者进行监测的建议,对于HBsAg阳性伴ALT升高者应观察36个月再开始治疗， 以等待自发性HBeAg血清转换（III） 。对于符合慢乙肝标准者（HBV DNA105 拷贝/mL, ALT持续）应进行肝活检（III） 。对于非活动性HBsAg携带者应进行定期的肝脏生化检测，因为即使静息多年之后肝脏病变也可再活动（III）。,15,干扰素的疗效-（HBeAg+CHB）,ALT升高者ALT正常者：VR105/mL作为诊断标准是人为的界限HBV DNA定量检测尚未标准化 HBV DNA在病程中可有波动 导致肝病进展的HBV DNA域值尚不得而知低水平 HBV DNA的意义不明最低检测水平为105106的方法(非扩增法)即可满足需要,47,几种HBVDNA定量检测方法的比较,敏感性（检测限） 方法pg/mLcopies/mLBranched DNA 2.17105 (Bayer) Liquid hybridization1.64.5105(Abbot) Hybrid capture0.51.4 105 (Digene)Amplicor-Monitor0.0014 102 (Roche)Molecular Beacon50,1pg HBV DNA= 283 000 copies(3105 基因组当量）,48,持久性应答 方法 筛选 确诊 疗程 疗效的评估 的预测 ALT/ASTX酶免疫测定X (EIA)重组免疫印迹测定 X(RIBA*)HCV RNA 定性检测XXHCV RNA 定量检测XXHCV 基因分型X,CDC. MMWR. 1998;47(RR-19):1-39.,诊断实验的效用,*不再广泛使用,49,检测范围,2,20,200,2,000,20,000,200,000,2,000,000,HCV RNAIU/mL,1. Roche Diagnostics. Methods Manual. 2. National Genetics Institute. SuperQuant. 3. Baker MB. HCV RNA 3.0 Quantitation by bDNA. 4. Bartnof HS, Herrera J. AASLD Annual Meeting. 1999.,520 IU/mL,8 106 IU/mL,Bay