医学微生物学课件：10 厌氧菌

1、厌 氧 性 细 菌,概 述,必须在无氧环境下，才能生长繁殖。 根据能否形成芽胞，可分为： 厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌,共同特征 在无氧条件下生长 G+大杆菌，有芽胞，因芽胞直径多大于菌体宽度，使菌体膨胀呈梭形。 侵袭力不强，仅在局部繁殖；产生强烈的外毒素，引起特定的症状。 分布广泛，土壤、人和动物肠道。,厌氧芽胞梭菌,一、破伤风梭菌,生物学性状,形态与染色 G+，菌体细长。 芽胞正圆形，大于菌体，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状，为本菌典型特征。 有周身鞭毛。,生物学性状,培养特性 严格厌氧，普通培养基上即能生长。在血琼脂平板上呈扩散生长，菌落扁平、灰白色、边缘不齐、周边疏松似“羽毛状”，有狭窄

2、溶血环，不易见到单个菌落。 迁徙生长。,抵抗力 芽胞抵抗力很强 100 1.5小时可完全被破坏 在干燥的土壤和尘埃中可存活数年,致病条件,伤口需形成厌氧微环境 伤口窄而深（如刺伤），伴有泥土或异物污染。 伤口有组织缺血和坏死 伤口混有需氧菌或兼性厌氧菌感染,致病性与免疫性,致病物质,破伤风溶血毒素 破伤风痉挛毒素 引起破伤风的主要致病物质 属神经毒素，毒性极强，仅次于肉毒毒素。 为蛋白质，不耐热；亦可被肠道中存在的蛋白酶所破坏。,局部伤口中产生的破伤风痉挛毒素，经淋巴、血流或外周神经末稍沿轴索逆行向上，到达脊髓前角和脑干。,破伤风痉挛毒素,破伤风痉挛毒素,-氨基丁酸 甘氨酸,破伤风痉挛毒素,结

3、构 菌体内：一条多肽链 释出菌体：轻链（A链）与重链（B链） A链：毒性作用 B链：神经节苷脂结合的单位,A链（锌内肽酶）可分解抑制性神经介质（-氨基丁酸、甘氨酸）并阻止其释放。,肌纤维收缩,肌纤维松弛,正常,抑制性神经元,破伤风痉挛毒素作用机制,屈肌运动神经元兴奋,屈肌抑制性神经元,抑制性神经介质,结果：屈、伸肌同时强烈收缩。 （苦笑面容；牙关紧闭；角弓反张。）,破伤风痉挛毒素,伸肌抑制性神经元,+,伸肌松弛,破伤风痉挛毒素,屈肌收缩,抑制性神经介质,+,+,-,-,-,-,所致疾病,1. 破伤风：潜伏期可从几天至几周。 典型的症状是咀嚼肌痉挛造成的苦笑面容、牙关紧闭及持续性背部痉挛（角弓反

4、张）。肌肉痉挛常伴以相当剧烈的疼痛，使患者十分痛苦和惊恐；发作后大量出汗，导致体力的极大消耗。,所致疾病,2. 新生儿破伤风： 潜伏期为57天，故俗称“脐带风”、“四六风”、“五日风”、“七日风”等，其临床表现与成人破伤风相似。,免 疫 性,由于破伤风痉挛毒素毒性极强，微量毒素即可致病，而此微量毒素尚不足以引起机体的免疫应答，故病愈后免疫力不强。仍应进行类毒素注射，使其获得有效免疫力。,微生物学检查法,一般不进行涂片镜检和分离培养 典型的症状和病史即可作出诊断,防治原则 （一） 一般性预防 1.正确处理伤口及清创扩创，防止创口厌氧微环境的形成。 2.无菌接生，消毒脐带断端。,（二）特异性预防

5、1.基础免疫接种：破伤风类毒素 3月7岁儿童（白、百、破三联疫苗) 免疫程序：3、4、5月 3次 2、7岁加强 2次 军人（类毒素注射及时强化） 2.紧急预防： TAT （tetanus antitoxin ） + 接种类毒素联合免疫,（三）特异性治疗 对已发病者，特异性治疗包括早期、足量使用抗毒素及抗生素两方面。 紧急治疗：TAT ，皮试 ！ 抗破伤风人免疫球蛋白,二、产气荚膜梭菌,形态与染色,两端几乎平切的G+粗大杆菌 在宿主机体内有明显的荚膜 芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体。,生物学性状,培养特性,厌氧，但不十分严格。其最适生长温度42 。 血琼脂平板上，双层溶血环（内环由毒素引起

6、的完全溶血，外环由毒素引起的不完全溶血）。 蛋黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈（毒素分解蛋黄中的卵磷脂所致）。 牛乳培养基中，可出现“汹涌发酵”现象。,双层溶血环,乳白色浑浊圈,牛乳培养基中“汹涌发酵”现象,分解牛乳培养基中乳糖: 产酸酪蛋白凝固 产气凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，并将液面上的凡士林向上推挤，气势汹猛。,分 型,根据4种主要毒素（、）的产生情况，可分为A、B、C、D、E 5个毒素型。对人致病的主要是A型，可引起气性坏疽和食物中毒；C型则引起坏死性肠炎。,致病物质,产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素，有些外毒素即为胞外酶。,致 病 性,毒素,卵磷脂酶,破坏细胞膜，溶解红、白细胞和血

7、管内皮细胞。,毒素,胶原酶,能分肌肉及皮下胶原纤维，使组织崩解。,毒素,透明质酸酶,分解细胞间质中的透明质酸，有利于细菌扩散。,毒素,DNA酶,分解DNA，降低坏死组织的粘稠度。,肠毒素,荚膜,致食物中毒。,抵抗吞噬细胞吞噬。,1. A型产气荚膜梭菌的致病因素及作用,A型产气荚膜梭菌的致病因素及作用,2. A型产气荚膜梭菌所致疾病,（1）气性坏疽 该病多见于战伤，但也见于平时的工伤、车祸等。致病条件与破伤风梭菌类似。 主要致病物质有卵磷脂酶、胶原酶、透明质酸酶、DNA酶等 分解破坏作用，造成气肿、水肿及组织坏死。,气性坏疽 表现为组织胀痛剧烈，水气夹杂，触摸有捻发感，最后产生大块组织坏死，并有

8、恶臭。 毒素和组织坏死的毒性产物被吸收入血，引起毒血症、休克，死亡率高达40100%。 气性坏疽潜伏期短，发展迅速，病情险恶。,（2）食物中毒 是食入大量（108109）A型产气荚膜梭菌繁殖体污染的食物（主要为肉类食品，在色味上并不一定发现明显的变化。）所引起，较多见。 潜伏期约10小时，临床表现为剧烈腹痛、腹泻，较少呕吐。一般不发热，12日内可自愈。 如不进行细菌学检查常难确诊 从患者的粪便检出产气荚膜梭菌肠毒素，或从患者的粪便与可疑毒食品中检出A型产气荚膜梭菌。,气性坏疽发病急剧，后果严重，及早诊断甚为重要。由于本菌分布广泛，所以单凭创口发现此菌还不足以诊断。尚需结合临床表现，才能确诊。

9、1直接涂片镜检 从伤口深部取材涂片，革兰染色镜检，可见G+大杆菌，常伴有其他杂菌，白细胞少且形态不规则。,微生物学检查法,2分离培养与鉴定 取坏死组织制成悬液，接种于血平板上或疱肉培养基中，厌氧培养，观察生长情况。取细菌培养物涂片镜检，并进一步用生化反应鉴定。,3. 动物实验 取培养液0.51ml给小鼠静脉注射，10分钟后处死动物，置3758小时。如动物躯体膨胀，即行解剖，可见脏器和肌肉内有大量气泡，尤以肝脏最为明显，称“泡沫肝” （肝脏呈海绵状或泡沫状）。取内脏或心血涂片镜检，可见G+大杆菌，并有明显荚膜。,防治原则,预防 及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境。 预防性的使用抗生素 治疗 局部

10、感染控制 抗生素 多价抗毒素 高压氧舱法,三、肉毒梭菌,生物学特性,G+粗短杆菌 芽胞呈椭圆形，大于菌体，位于次极端，使细菌呈汤匙状或网球拍状。 有鞭毛 严格厌氧，营养要求不高。 本菌芽胞抵抗力很强，但肉毒毒素不耐热，煮沸1min既被破坏。,致病性致病物质,致病物质肉毒毒素属神经毒素，是已知最强的毒素。 根据神经毒素的抗原性分AG 7个型，各型毒素只能被同型抗毒素中和。引起人类疾病的主要是A、B型。,作用机制,肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经肌肉接点处神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹。,乙酰胆碱,所致疾病,食物中毒 单纯性毒素性中毒，而非细菌感染。 临床表现与其它食物中毒不同，主要

11、为神经末稍麻痹，呈下行性发展。 潜伏期可短至数小时，先有一般不典型的乏力、头痛等症状，接着出现眼睑下垂、眼球肌肉麻痹、斜视、吞咽困难、呼吸肌和心肌麻痹而死亡。死亡率较高。,所致疾病,婴儿肉毒病 感染者以6个月以内的小婴儿居多，食入 被肉毒杆菌污染的食品（如蜂蜜）后， 芽胞发芽，产生毒素被吸收而致病。 症状与肉毒毒素食物中毒类似，最先引 人注意的症状是便秘 ，吸乳、啼哭无力。 婴儿肉毒病死亡率不高（12%）。,肉毒毒素的治疗作用,美国FDA于1989年12月正式批准A型肉毒毒素，商品名为BOTOX用于治疗眼睑痉挛、面肌痉挛、斜视等眼科、神经科和耳鼻喉科肌肉痉挛疾病，这是美国FDA第一次批准用于作注射的微生物毒素制剂可美容的剧毒物。 我国也于1993年研制成功，试用于临床。1997年正式被国家批准“注射用A型肉毒毒素”投放市场（97卫药 准字（兰）S-01号），商品名为“衡力