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文档简介
1、结核分枝杆菌,俗称“结核杆菌”,1882年由德国科学家Koch首次发现并证明是结核病的病原菌。他还证明了这种微生物可以在培养基中生长,使得结核的实验研究成为现实,并因此荣获了1905年诺贝尔医学奖。 结核杆菌结核病(痨病),肺结核最多见。,一、生物学性状 形态与染色,细长略弯曲,牛分枝杆菌较粗短。 可呈分枝状排列而得名结核分枝杆菌 抗酸染色阳性呈红色(又称抗酸杆菌) 有荚膜?,由于结核杆菌细胞壁中含大量脂质,一般不易着色。若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色,故又称抗酸杆菌。 抗酸染色法 : 初染(石炭酸复红,加温、5分钟) 脱色(3%盐酸酒精) 复染(美蓝1分钟),则
2、分枝杆菌呈红色(+),其他细菌和背景物质为蓝色()。,培 养 特 性,专性需氧,pH 6.56.8。 营养要求高 Lowenstein-Jensen (罗氏)固体培养基 蛋 黄 脂质生长因子 孔雀绿 抑制杂菌生长 生长缓慢,一般34周 可见颗粒、结节、菜花样菌落 (R型菌落)。,抵抗力(四敏感、四耐受),四敏感 对乙醇(70 或 75)敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗痨药物如链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、对氨基水杨酸等敏感,但长期用药容易出现耐药性。,四耐受 对干燥的抵抗力特别强 结核分枝杆菌对酸(3% HCl 或 6% H2SO4)或碱(4% NaOH)有抵抗力,
3、15min不受影响。 对碱性染料有抵抗力 对青霉素等抗生素耐药,结核杆菌的L型:颗粒状、丝状。,卡介苗:牛结核杆菌的减毒株。,毒力变异,耐异烟肼及其它抗结核药物的菌株,耐药性变异,变异性,形态结构变异,致 病 性,致病物质及其作用 结核杆菌不产生内、外毒素以及侵袭酶。其致病物质主要是菌体成份,包括脂质、蛋白质等,特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的毒力呈平行关系,含量愈高毒力愈强。 致病作用:慢性肉芽肿性炎症(结核结节) 迟发型(型)超敏反应,主要致病物质及其作用,脂质,磷脂 刺激M增生 分枝菌酸 抑制中性粒细胞游走及吞噬;能使结核杆菌 在液体培养基中呈蜿蜒索状排列。 硫酸脑苷脂
4、抑制吞噬体与溶酶体结合 蜡质D 引起迟发型超敏反应,蛋白质,引起迟发型超敏反应,索状因子,兼性胞内菌 慢性肉芽肿性炎症,未感染人群,感染人群 (世界1/3) (中国44.5%),病人,所致疾病,传染源 - 排菌的肺结核患者(开放性肺结核) 易感者 感染率高,发病率低。,- 人类普遍易感,但感染后仅约1/10的感染者发病。,感染方式 多途径感染 - 呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体。 - 疾病种类多样化,以肺部感染最为多见。 感染类型 原发感染、原发后感染。 -原发感染:结核分枝杆菌初次感染在肺内形成病灶,常见于儿童。 -原发后感染:常见于成人。,所致疾病,原发感染(机体无免疫力),肺泡,M吞噬
5、,吸入,脂质抗吞噬 (兼性胞内菌),释放,原发综合征,结核杆菌,结核杆菌繁殖、破坏M,炎症原发灶,淋巴管扩散,肺门淋巴结肿大,症状和体征多不明显,病灶常钙化、纤维化或伴细菌潜伏。,机体对结核杆菌尚未建立特异性细胞免疫,也无迟发型超敏反应,可发生结核杆菌扩散至全身。,Th1、CTL,多核巨细胞,上皮样细胞,巨噬细胞,胞内结核杆菌,巨噬细胞,内源性 原发病灶内 外源性 重新感染感染 病灶多局限,不累及淋巴结。 主要表现为慢性肉芽肿性炎症 纤维化 干酪样坏死 痊愈或细菌潜伏 形成空洞 排菌到痰液中 (开放性肺结核),原发后感染(机体有免疫力),机体对结核杆菌产生特异性细胞免疫,也产生迟发型超敏反应。
6、,Th1、CTL,多核巨细胞,上皮样细胞,巨噬细胞,胞内结核杆菌,无干酪样坏死,干酪样坏死,免 疫 性,(1)结核杆菌属兼性胞内菌,以细胞免疫为主。 (2)属感染免疫,又称有菌免疫。常见于某些胞内寄生菌的感染(例如结核分枝杆菌),机体特异性免疫的建立与维持有赖于病原菌在体内的存在, 一旦体内病原菌消失,免疫力也随之消失。 (3)细胞免疫与超敏反应同时存在,通过郭霍现象可以说明。,局部红肿、浅溃疡,不扩散,感染过或免疫接种过的豚鼠,正常豚鼠,局部红肿、溃疡,溃疡深而经久不愈,肺门淋巴结肿大 全身扩散,有毒力的结核杆菌,机体抗结核免疫特点: 感染、免疫、超敏反应共存。,郭霍现象,干酪样坏死灶 形成
7、空洞,1014天,12天,再感染时溃疡浅、易愈合、不扩散,表明机体已有一定免疫力。但溃疡发生快,说明在产生免疫的同时有超敏反应的参与。,结核杆菌菌体成份的免疫及免疫病理损伤作用,蛋白质,结核菌素试验,是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发性超敏反应(型超敏反应)的一种试验。以判断机体对结核分枝杆菌有无免疫力、是否感染过结核分枝杆菌。 原理: 型超敏反应,1.试剂:旧结核菌素(old tuberculin,OT) 纯蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD) 2.试验方法:,两前臂皮内注射,4872h后观察 红肿硬结大小,结果(硬节直径
8、)与分析,大于5mm,阳性,机体已感染过结核分枝杆菌,卡介苗接种成功,无,阴性,未感染过结核分枝杆菌 或未接种过卡介苗,例外:细胞免疫功能低下或感染初期,大于15mm,强阳性,表明可能有活动性结核病。,应 用,选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗。 在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群感染率。 作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断。 测定肿瘤患者的细胞免疫功能,微生物学检查,标本 痰、尿、粪、脑脊液、血液等。 集菌 4%NaOH 或3%HCl等处理,离心取沉淀。 涂片镜检 涂片阳性 开放性肺结核 抗酸染色 初步诊断(菌数需51034/ml ) 金胺染色 提高检出率,抗酸染色报告方式,分离培养 细菌培养阳性 开放性肺结核 罗氏培养基 :颗粒、结节、菜花样菌落 。 (菌数需1 102/ml ),动物试验 注射豚鼠腹股沟皮下 快速诊断 PCR,有假阳性。 免疫学检测(结核菌素试验、血清学试验) 结核病诊断=临床表现+X线摄片+微生物学检查,防治原则,预 防 (1)接种卡介苗 初
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