无创产前筛查采血操作规范

1、.附件 3胎儿染色体非整倍体（t21 、t18 、t13 ）检测样本采集手册一、受检 者 准 备1检测对象：孕周范围为孕12-24 周的孕妇。2采样体位： 坐位取血， 且在采血前患者需要有10 分钟时间稳定自己的体位。【注意事项】要求受检孕妇先进行b 超检测，确认胎儿为单活胎。采血前 24 小时内避免运动和饮酒，不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。二、样本 采 集 前 准 备1、知情同意书签署：送检医生与受检者及其家属作良好沟通，告知该检测的重要性、临床意义及潜在的风险， 并指导受检者签署知情同意书。对于孕周大于 24 周并坚持要求进行该检测的受检者，由送检医生指导其签署知情同意书补充条款。2、送检单

2、填写：要求用钢笔或签字笔填写，并使用正楷字体，字迹清晰，填写完整。3、送检单必填信息：送检单位、送检医生、采血日期、受检者姓名、年龄、孕周、 b 超检查结果、身份证号码、联系电话。4、信息核对：仔细核对送检单和受检者的基本信息，确保一致；检查受检者是否按照医嘱准备，并向其解释操作目的以取得配合。5、样本标识：在采集管、知情同意书、送检单上贴上样本唯一条码， 并注明受检者姓名、年龄、孕周、检验项目等信息，确保与送检单一致。.【注意事项 】1粘贴条码标签时，应使条码与采集管的管长平行，字母朝管口方向，避免以环绕管壁粘贴的方式使管周被遮挡，而无法清晰看到管内样本情况。（条码7 个，分配：患者一个、采

3、血机构一个、保健所3 个、保健院一个、检测中心一个）2. 样本采集后使用的条码必须为抗冻条码，并且粘贴牢固，确保在运输、检测、储存过程中不会脱落或字迹模糊不清。三、样本采集1、采样器：医用一次性采血针、 10 mledta 抗凝管、灭菌棉签、止血带、消毒液。2、采集操作：全血标本的采集使用普通的10mledta采血管：严格按照实验室操作技术规范的要求采取10 ml 孕妇外周血，采血后请立即缓慢颠倒6 次使血液与管内成分混匀（如图1），拖延颠倒混匀时间可能会造成检测失败。混匀后立即放直立于4 冰箱内，并在 6 个小时内进行血浆分离。按照无创产前检测血浆分离要求操作（见附件），分离后样本放入 -2

4、0冰箱储存。血浆样本需在 0 以下冷冻运输，不应超过 72 小时图 1.颠倒混匀示意图【注意事项 】1. 不可使用肝素抗凝的采血管进行取样 . 。2. 颠倒混匀时动作应轻柔，防止溶血，影响检测结果的准确性。.3. 禁止将普通 edta 抗凝样本和血浆样本在室温状态下放置。4. 全血离体后必须在 6 小时进行血浆分离， 防止母体有核细胞破裂， 增加检测背景，影响检测结果的准确性5. 未采血的 streck cell-free dna bct 储存温度为 18-25，禁止将已采血的 streck cell-free dna bct 存放于 4或以下。四、标本递送1甲方采集血标本后， 4 小时内连同

5、送检单、知情同意书、知情同意书补充条款（如适用），该部分资料医院均需留有备，一同送到旗县区约定的标本收集机构（有能力分离血浆的医疗机构）进行血浆分离及保存。（血浆分离操作见附件）2血浆样本应保存于标准的 2ml ep 管，并用封口膜密封管口，以防止样本溢出；3寄送包装箱应为壁厚 6cm 以上的硬质泡沫箱，泡沫箱内容量视样本量可适当调整；4血浆样本寄送采用干冰运输，寄送所用的干冰量为10 公斤 / 2-3 天，15公斤 / 4-5 天，可根据运输时间长短适当增加用量。保证样本到达生产地，干冰有剩余。5将复核后需寄送的血浆样本及收集的白细胞管放入冻存盒内，并用保鲜袋将冻存盒封好， 所有将纸质送检单

6、、 知情同意书装入自封袋中封好， 置于泡沫箱内最上层6乙方按规定的时间到旗县约定的标本收集机构收取标本.附件血 浆 分 离 步 骤一、低温离心血 离心（ 15min）：将采血管按 号 序放入离心桶中，用托 天平 格配平，将配平好的离心桶放在位置相 的吊 中， 置离心机 “xg：1600xg，tem：4time ：10 min ，acc：5。按“ star ”开始第一次离心，并在血 制 中“第一次离心”下打“”。在离心 10 分 内做其他准 工作：清 超 台， 垃圾桶套上黄色医 垃圾袋、准 2ml 无菌 ep管，根据每份血 3 个 2mlep管准 ，将 ep管的开口朝内放到双面板上，同一血 相同

7、的 号1、1、1、2、2、2 20、20、20。同 号的管子并排放置，根据 号 序依次排列。分离血 ：离心完成后从离心机中取出 本， 此 本分 三 ， 下 胞 ，中 白 胞和血小板， 上 我 所需要的血 ， 将采血管按 号从小到大 序放到采血管架的相 位置。 用移液器将上清液移到与采血管 号 的其中 2 个 ep管中，每管 2ml 共 4ml。吸取白 胞 ：血 分离后吸取中 白 胞 1ml 到与采血管 号 的另 1ml 个 ep管中 ( 上与申 一致的条形 ) 。【注意事项 】血 离心后已 分 ， 从离心机中取出 要 拿 放， 不可 斜采血管， 避免破坏分 。吸取血 吸 要垂直伸入采血管， 从

8、液面下 3-6mm 吸取，接年白 胞 要 慢吸取， 确保不吸到白 胞 ，可留有 3mm左右血 不吸。吸取白 胞 ， 需将吸 近中 慢吸取， 避免吸取 多的 胞和血 。.二、高速离心血 离心（15min）：将 ep管中体 接近的血 放在微量台式离心机 子的相 位置，盖上离心机黄色内盖， 并通 向上提内盖确保盖好， 置离心机参数“ xg： 6000xg ， time ： 10 min ，按“ star ”开始第二次离心，并在血 制 中“第二次离心”下打“”。在离心的 10 分 内做其他准 工作： 根据每份血 4 个无菌 2mlep管准 ，将 ep管的开口朝内放到双面板上， 同一血 相同的 号 1、

9、1、2、2 20、20。同 号的管子并排放置，根据 号 序从小到大依次排列。提取上清液（ 30min）：吸取离心所得的上清，即得到 的血 ，将血 按每管不少于 1ml 分装于 号的 2mlep 管中（ ep管上 上与申 一致的条形 ）。血 qc （ 2min）： 核血 的体 与溶血情况，血 体 少于2ml 判定 不合格；根据 本接收 程中溶血 准判断是否溶血，如溶血 不合格，需要重新采集 本。不合格 本需在血 制 的 注 中注明此 本的不合格信息，并在 lims 系 中填写不合格及不合格理由，然全 告 室 人， 送重采血 告。【注意事项 】分装血 ，需将同一 本的血 分装在具有相同 号的ep管内，切勿弄混。吸取血 ，可从沉淀物的 立面 慢吸取， 避免吸 沾到沉淀或吸到沉淀。三、血浆样本保存血浆分离后与白细胞管立即低温保存， 一周之内 -20 条件下暂存：长期保存需置于 -80 冰箱中。血浆不可常温保存。血浆样本避免反复冻融。.送检样本合格标准1外观：要求样本保存管完好，无裂管、开盖等泄漏或样本外溢情况。2样本体积：孕妇外周血