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文档简介
1、细菌鉴定 一。形态与培养特性 形态与染色 1 染色性 革兰染色,抗酸染色等 2 形状,大小和排列(球菌,杆菌或螺形 菌,单个,成双,成链,葡萄状等) 3 细菌的特性结构(芽孢大小及位置,鞭毛数目及位置等),培养特性 1 营养要求 简单或复杂 2 生长速度 快或慢 3 气体环境 需氧,兼性厌氧或厌氧 4 适宜生长温度 10,25,35-37,42, 44 等,菌落特征 大小,表面,透明度,高度,边缘,光泽,乳化,硬度,色素,气味,溶血性等。 二。 生化反应 三。 血清学试验,常见努卡菌种的鉴定,试验 星形 鼻疽 新星 巴西 豚鼠 酪蛋白 - - - + - 次黄嘌呤 - - - + + 酪氨酸
2、- - - + - 黄嘌呤 - - - - + 明胶液化 - - - + - 45生长 + + - - + 鼠李糖 -+ +- - - -,一些革兰阳性杆菌鉴定,一。触酶试验阳性 1。大菌落,菌体规则,大至中等,或成链状有时溶血- 考虑芽孢杆菌属。 2。菌落中等大小, 溶血,菌体中至小-考虑产单核李斯特菌,痤疮杆菌,放线杆菌。 3。不规则革兰阳性杆菌 (1)菌落颜色:黄色-短杆菌属某些菌,粉色-马红球菌 橘红色至红色-努卡菌,红球菌属,短杆菌属某些菌。 (2)较宽分枝:努卡菌,痤疮杆菌属,红球菌属,罗菌属,放线菌,快速生长分枝杆菌。 (3)Y型分枝杆菌:放线菌,苏黎士菌属,厄菌属,痤疮杆菌属,
3、马棒状杆菌,罗菌属。,(4)非常圆,似球菌:C.aquaticum,厄菌属,皮肤杆菌,短杆菌属,红球菌属。 (5)动力阳性:厄菌属, C.aquaticum,CDC群A3,A4,A5。 (6)溶血:痤疮杆菌属,放线菌。 (7)七叶苷/明胶:+/+厄菌属, C.aquaticum,CDC群A。+/-皮肤杆菌,CDC群3,5- ? 放线菌。 (8)无以上特征的细菌 a.菌落相对较大,不透明,通常白色或米黄色,有时棕褐色或棕色:极小棒状杆菌,纹带棒状杆菌,干燥棒状杆菌,假白喉杆菌,某些白喉杆菌。 b.小菌落,灰色,菌体呈球杆状或棒状,做尿素和蔗糖:杰棒状杆菌,解脲棒状杆,某些白喉杆菌。,二。触酶阴性
4、 1。小或中等灰色菌落,可移动,有或无溶血,菌体可呈链状:丹毒丝菌,乳杆菌。 2。小或中等菌落,小杆菌,H2S阳性:丹毒丝菌 3。中或小菌落,不规则革兰阳性杆菌 (1)Y型分枝,无明显连接点:Bifidobacterium (2)不规则细杆菌,有些有分枝,有些呈链状, 溶血:溶血隐秘杆菌(明胶阴性) 化脓隐秘杆菌(明胶阳性) (3)菌落无溶血,多形:放线菌,CDC2群。,嗜血杆菌种间鉴定,菌名 X因子 V因子 马血溶血 乳糖 甘露糖 触酶 CO2 流感 + + - - - + + 溶血 + + + - - + - 杜克雷 + - - - - - - 副流感 - + - - + D D 副溶血
5、- + + - - + - 副嗜沫 - + - + + - + 嗜沫 - - - + + - +,奈瑟菌科不同属间的鉴别,属名 形态 氧化酶 触酶 葡萄糖产酸 奈色球菌属 双球状 + + V 布兰汉菌属 双球状 + + - 金氏菌属 球杆状 + - + 莫拉菌属 杆状 + + -,不动杆菌属常见种间的鉴定,试验 菌名 醋酸钙 鲍曼 溶血 居尼 洛菲 41 0 100 0 90 0 44 0 100 0 0 0 SBA溶血 0 0 100 0 0 明胶水解 0 0 96 0 0 精氨酸 100 98 96 95 0 枸缘酸 100 100 91 82 0 丙二酸 100 98 0 0 0,菌株
6、触酶 氧化酶 (阳性%) (阳性%),伴放线放线杆菌 99 19 人心杆菌 1 100 啮蚀艾肯菌 8 100 金氏金氏菌 0 100 多杀巴斯德 98 96,一些嗜二氧化碳杆菌鉴定,试验 伴放线 狗咬CO2嗜纤维 人心 艾肯 葡萄糖 99 93 100 0 乳糖 0 100 0 0 麦芽糖 95 95 100 0 蔗糖 0 0 98 0 精氨酸 0 99 0 0 触酶 99 100 1 8 吲哚 0 0 100 0 硝酸盐 100 0 0 99 鸟氨酸 0 0 0 98,触酶阴性或弱阳性革兰阳性球菌,PYR VAN LAP GAS 链球菌 V S + - 肠球菌 + V + - 乳球菌 V
7、S + - 平面球菌 - R + - 明串珠菌 - R - + 孪生球菌 + S V - 绿色气球菌 + S - - 格鲁比卡菌 + S - - Stomatococcus + S + -,李斯特菌属 产单核细胞李斯特菌,革兰阳性小杆菌直或微弯,常呈V字形成对 排列,无芽胞,无荚膜。 22-25度形成周鞭毛,有动力,37度动力阴性。 在血平皿上形成较小,圆形,光滑而有狭窄 B溶血环的菌落,在液体培养基中呈均匀浑 浊 生长。在半固体培养基中,动力自穿刺 线向四周蔓延生长,呈倒伞状。,丹毒丝菌属 红斑毒丝菌属,革兰阳性杆菌,菌体细长,长短不一,有时 呈长丝形,与放线菌相似,易被脱色而呈革 兰阴性杆
8、菌,其间夹着革兰阳性颗粒。 血平皿上,光滑型菌落小,圆而凸起,有光 泽。粗糙型菌落较大,表面呈颗粒状,周围 有轻微的溶血,延长培养时间则溶血更明显。,红球菌属 马红球菌,革兰阳性卵圆形短杆菌,无芽胞,无鞭毛。 血平皿上,菌落呈橙红色,表面光滑,湿润 边缘整齐,48小时后色素更明显,菌落增大。,不常见需氧革兰阳性球菌某些特性,像链球菌 触酶 形态 Abiotrophia - c,cb,rods 格鲁比卡菌 - cb,pr,ch 乳球菌 - cb,pr,ch 明串珠菌 - cb,pr,ch,像葡萄球菌 触酶 形态 Aerococcus -/w c,pr,tet,cl 差异球菌 + cb,pr,te
9、t 孪生球菌 - c,pr,ch,cl 创伤球菌 - c,pr,ch,cl 微球菌 + c,cl,tet 平面球菌 - c,pr,tet,cl Stomatococcus -/+/w c,pr,cl,平面球菌的鉴定,W1K7114 C727084 49 腹水 1. 革兰阳性球菌,兼性需氧,单个,成对, 四联或呈葡萄状,草绿色溶血。 2 . 万古霉素耐药,LAP阳性,PYR阴性,七叶 树苷阳性,多盐不生长,精氨酸阴性, BD BBLCRYSTALTM编码2716000442 ID=99.57% Pediococcus。 3 . 通常对泰能,庆大,氯霉素,青霉素敏感, 替考拉宁耐药。,大多数常见共
10、栖菌及部位,部位 菌名 呼吸道 需氧菌 化脓性链球菌及其他溶血链球菌 肺炎链球菌,金葡,CNS,柰色球菌 支原体, Stomatococcus, 莫拉菌, 肠道菌,微球菌,乳杆菌,嗜血杆菌 厌氧菌 韦荣球菌,消化链球菌, 梭杆菌 卟啉单胞菌, 拟杆菌, 普雷沃菌, 真杆菌,双歧杆菌,丙酸杆菌 真菌 念珠菌,大多数常见共栖菌及部位,部位 菌名 胃肠道 需氧菌 乳杆菌,肠球菌,肠道菌,棒杆菌,链 球菌,葡萄球菌 厌氧菌 拟杆菌,普雷沃菌,卟啉单胞菌, 梭杆菌,真杆菌, 梭菌, 消化链球菌, 双歧杆菌, 放线菌,韦荣球菌 丙酸杆菌,动弯杆菌,大多数常见共栖菌及部位,部位 菌名 泌尿生殖道 需氧菌 棒
11、杆菌,乳杆菌,葡萄球菌,链球菌,不致病柰 色球菌,支原体,脲原体, 阴道加德勒菌, 肠道菌,不动杆菌,肠球菌,二氧化碳嗜纤维菌 厌氧菌 拟杆菌, 卟啉单胞菌, 普雷沃菌,放线菌, 梭杆菌属, 动弯杆菌, 丙酸杆菌, 消化链球菌,双歧杆菌 真菌 念珠菌属,大多数常见共栖菌及部位,部位 菌名 皮肤 耳 眼 需氧菌 棒杆菌,葡萄球菌,微球菌,不致病柰色球菌 不动杆菌,气球菌 厌氧菌 丙酸杆菌,梭菌,消化链球菌 真菌 念珠菌, 梨头霉, 毛霉, 马拉色菌,大多常见致病菌及部位,部位 菌名 血液 需氧菌 CNS,金葡,肺链,肠球菌,肠道菌, 假单胞菌,流感。 厌氧菌 脆弱拟杆菌 真菌 白色念珠菌 中枢神
12、经系统 需氧菌 肺链,流感,脑双,B链,CNS,金葡 产单核李斯特,大肠,TB,努卡菌, 苍白密螺旋体, 疏螺旋体, 钩端螺旋体,大多常见致病菌及部位,部位 菌名 真菌 白念,新型隐球菌,荚膜组织胞浆菌 球粗孢子菌 上呼吸道 需氧菌 溶血隐秘杆菌 肺炎衣原体 肺炎支原体 A链,淋 球菌,白喉棒杆菌 真菌 念珠菌,大多常见致病菌及部位,部位 菌名 下呼吸道 需氧菌 金葡,肺链,流感,卡他,肺克,大肠, 绿脓,军团菌,TB,努卡菌,百日咳, 肺炎支原体, 肺炎衣原体,沙眼衣原体 鹦鹉热衣原体 厌氧菌 混合厌氧菌 真菌 组织胞浆菌,球孢子菌,芽生菌,隐球菌 卡氏肺孢子虫,大多常见致病菌及部位,部位
13、菌名 耳 需氧菌 肺链,流感,卡他,绿脓 真菌 曲霉菌属,念珠菌属 眼 需氧菌 肺链,金葡,CNS,流感,淋球菌, 假单胞菌,卡他,芽胞杆菌, 沙眼衣原体 胃 需氧菌 幽门螺杆菌,大多常见致病菌及部位,部位 菌名 肠道 需氧菌 弯曲杆菌,沙门菌,志贺菌,弧菌,金葡 蜡状芽胞杆菌,耶尔森菌,大肠杆菌, 气单胞菌, 爱德华菌 厌氧菌 梭菌,拟杆菌 生殖道 需氧菌 淋球菌,杜克嗜血杆菌,沙眼衣原体, 支原体, 脲原体,苍白密螺旋体,鞘杆菌 厌氧菌 拟杆菌,梭菌,放线菌,梭杆菌 动弯杆 菌,大多常见致病菌及部位,部位 菌名 真菌 念珠菌 皮肤和软组织 需氧菌 A链,金葡,CNS,绿脓,流感,肠道菌 分
14、枝杆菌,丹毒丝 菌,创伤弧菌, 努卡菌,弗朗西斯菌, 巴通体菌, 密螺旋体 厌氧菌 脆弱拟杆菌,消化链球菌,产气荚膜梭菌 真菌 糠秕马拉 菌,表皮藓菌,念珠菌, 曲霉菌,申克孢子菌,毛藓菌, 小孢子菌, 芽生菌,大多常见致病菌及部位,部位 菌名 骨和关节 需氧菌 金葡,淋球菌,链球菌,流感,肠道菌 假单胞菌,CNS,分枝杆菌 真菌 申克孢子菌,球孢子菌,念珠菌属 尿道 需氧菌 大肠杆菌,奇异变形,克勒伯菌, 肠杆菌,假单胞菌,肠球菌,腐生葡萄 金葡,TB,淋球菌, 脲原体 真菌 念珠菌属,标本和菌株 染色 需氧培基 厌氧培基,CSF * B C 心包液 * B C BBA 胸水 * B C B
15、BA 腹水 * B C Mac BBA LKV BBE CAN CAPD * B C Th BBA 滑膜液 * B C 骨髓 * B C BBA 导管尖 B 耳外分泌物 * B Mac/B C BBA 眼 * B C 便 B Mac HE Ca,标本和菌株 染色 需氧培基 厌氧培基,直肠拭子 Mac HE Ca EB 阴道子宫 B TM 尿道阴茎 * TM 泌尿生殖其它 * B C Mac TM BBA LKV BBE CNA 痰 * B C Mac 气管吸出物 * B C Mac 肺泡灌洗液 * B C Mac BBA LKV BBE CNA 肺泡毛刷 * B C Mac 组织 * B C
16、Mac Th BBA LKV BBE CNA 鼻 B C 咽/会厌 B SSA / B SSA C,标本和菌株 染色 需氧培基 厌氧培基,尿 B Mac 伤口或脓 * B C Mac BBA LKV BBE CNA 百副日咳 Regan lowe 布鲁菌 B C 白喉棒杆菌 Cystine-tellurite ,Loefflers serum 难辨梭菌 CCFA 大肠0157 山梨糖-Mac 链 LIM肉汤 杜克嗜血 C+万古霉素 军团菌 BCYE 弧菌 TCBS,菌株 需氧培基,耶尔森菌 CIN Francisella tularensis C 或 BCYE 淋球菌 TM 注: CIN,ce
17、fsulodin-irgasan-novobiocin Th,thioglycolate Ca,campylobacter agar HE,Hektoen EB,enrichment broth TM,Thayer-Martin BBA,brucella blood agar BCYE,bufferedcharcoal yeast extract,可接受的临床厌氧标本,1 抽出物(用注射器) 2 前庭大腺 3 胆汁 4 血 5 骨髓 6 支气管镜检查保护性毛刷 7 后穹隆穿刺术 8 输卵管 9 子宫内避孕器检查放线菌 10卵巢,11胎盘(通过剖腹分娩) 12 窦道,瘘管抽出物 13 便(检查难
18、辨芽胞梭菌) 14 外科手术拭子及组织 15 气管壁抽出物 16 尿(经耻骨弓上采样) 17 子宫(经自宫内膜采样),不可接受的临床厌氧标本,1 未经保护的支气管 肺泡灌洗液 2 子宫颈 3 污染的子宫颈内拭子 4 恶露(产后一两周阴道排泻物) 5 鼻咽拭子 6 会阴 7 前列腺液或精液 8 痰(咳出或导出),9 便或直肠拭子 10 咽拭子 11 气管造口术抽出物 12 尿道 13 尿(从膀胱或导管) 14 尿(排出的) 15 阴拭子或外阴拭子,血液中分离出山羊布鲁菌,布鲁菌(Brucella spp)可引起布鲁菌 病(Brucellosis),又称波浪热,它是人蓄共患性全身传染病。 患者,男,35岁,因不明原因发热4个多月后入我院。患者有进食生羊肉串史。布鲁杆菌凝集试验阳性(1:8),血培养第10天阳性。经培养鉴定为山羊布鲁菌。临床用利福平0.3g,强力霉素0.1g每天两次联合使用,6周为1个疗程,体温逐渐下降,1个月后痊愈出院。,血液中分离出山羊布鲁菌,细菌鉴定:血液传种到麦康凯平皿,血平皿,巧克力平皿(放CO2孵箱),37度培养48小时后,血平皿及巧克力平皿生长出圆形,突起,半透明,有光泽,边缘整齐且不溶血的大小相同的小菌落。麦康凯平皿不生长。菌落革兰染色为革
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