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文档简介

1、第三章 基因的本质,第一节 DNA是主要的遗传物质,学习目标,1、理解格里菲斯的肺炎双球菌转化实验的结论及其意义 2、理解艾弗里的肺炎双球菌转化实验的设计思路及结论 3、噬菌体侵染大肠杆菌的实验原理、过程及结论 4、理解DNA是主要的遗传物质的内涵,知识回顾,19世纪中期,孟德尔杂交试验发现了遗传规律,并提出“ ”,遗传因子,20世纪初,约翰逊把“遗传因子”更名为“ ”,基因,20世纪初,摩尔根利用果蝇杂交实验证明了基因位于 上,染色体,染色体主要由 和 组成,基因(遗传物质)是在蛋白质还是DNA上呢?,蛋白质,DNA,对遗传物质的早期推测,遗传物质位于蛋白质上,假说,依据,蛋白质是有多种氨基

2、酸连接而成的生物大分子。氨基酸 、 、 多样,肽链的 多样使得蛋白质呈现出多样性。,20世纪20年代,20世纪30年代,DNA是由许多脱氧核苷酸聚合而成的生物大分子。脱氧核苷酸的化学组成包括 、 和 。,主流思想,蛋白质是遗传物质,种类,数目,排列顺序,空间结构,磷酸,碱基,脱氧核糖,肺炎双球菌转化实验,1928年,格里菲斯的肺炎双球菌体内转化实验,1940年,艾弗里的肺炎双球菌体外转化实验,肺炎双球菌,有多糖荚膜,无多糖荚膜,粗糙,光滑,有毒性 人患肺炎 小鼠患败血症,无毒性,肺炎双球菌体内转化实验(格里菲斯),第一组,第二组,第三组,第四组,R型活细菌,小鼠,过程,组别,结果,注射,小鼠仍

3、活着,S型活细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌和 R型活细菌,注射,小鼠,小鼠仍活着,小鼠死亡,分离出活S型菌,小鼠死亡,分离出活S型菌,1、该实验设计遵循了哪些实验原则?,对照原则;控制变量原则,肺炎双球菌体内转化实验,第一组,第二组,第三组,第四组,R型活细菌,小鼠,过程,组别,结果,注射,小鼠仍活着,S型活细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌和 R型活细菌,注射,小鼠,小鼠仍活着,小鼠死亡,分离出活S型菌,小鼠死亡,分离出活S型菌,2、第一组和第二组的实验对比说明了什么问题?,R型细菌无毒性,不能杀死小鼠 S型细菌有毒性,

4、能杀死小鼠,肺炎双球菌体内转化实验(格里菲斯),第一组,第二组,第三组,第四组,R型活细菌,小鼠,过程,组别,结果,注射,小鼠仍活着,S型活细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌和 R型活细菌,注射,小鼠,小鼠仍活着,小鼠死亡,分离出活S型菌,小鼠死亡,分离出活S型菌,3、第二组和第三组的实验对比说明了什么问题?,说明S型细菌有毒性,加热致死无毒性,无法使小鼠死亡,肺炎双球菌体内转化实验(格里菲斯),第一组,第二组,第三组,第四组,R型活细菌,小鼠,过程,组别,结果,注射,小鼠仍活着,S型活细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌,注射,小鼠,加热杀死的S型细菌和 R

5、型活细菌,注射,小鼠,小鼠仍活着,小鼠死亡,分离出活S型菌,小鼠死亡,分离出活S型菌,4、第三组和第四组的实验对比说明了什么问题?,已加热杀死的S型细菌中一定含有使R型细菌转化为S型细菌的转化因子,肺炎双球菌体内转化实验(格里菲斯),5、根据下面资料,请问“转化因子”是否有可能是蛋白质?,不可能,蛋白质高温失活,科学家研究发现,蛋白质和核酸对于高温的耐受力是不同的。在80100的温度范围内,蛋白质将会失活,DNA双链将解开;当温度降至55 左右时,DNA双链能够恢复,但蛋白质的活性却不能恢复。,设法通过实验,找出“转化因子” 为何物?,肺炎双球菌体外转化实验(艾弗里),设计思路,设法将S型细菌

6、的DNA与蛋白质、多糖等物质分开,加入R型培养基中单独地直接去观察他们的作用,S型细菌捣碎(分离),DNA,蛋白质,多糖,脂类,RNA,R型活细菌,出现S型和R型活菌,R型活菌+S型细菌的DNA+DNA酶,只有R型活菌,只有R型活菌,肺炎双球菌体外转化实验(艾弗里),结论:,DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。,(DNA是遗传物质,蛋白质等不是遗传物质),R型活菌+S型细菌的DNA+DNA酶,只有R型活菌,艾弗里实验中设置DNADNA酶这一组实验的目的是什么?,1、证实DNA的分解产物不是“转化因子” ; 2、进一步与只加DNA组对照,从反面证明DNA是遗传物质。,T2噬菌体侵染细菌的

7、实验(赫尔希和蔡斯),实验思路,把DNA和蛋白质分开,单独观察它们的作用。,T2噬菌体,实验材料,大肠杆菌,T2噬菌体侵染细菌的实验(赫尔希和蔡斯),资料一:T2噬菌体侵染大肠杆菌的过程,吸附,注入,合成,组装,释放,遗传物质被注入大肠杆菌体内,合成子代噬菌体的原料分别是什么?来源什么地方?,尾部的末端吸附在大肠杆菌的表面,释放出子代噬菌体,蛋白质外壳和DNA分子组装成一个新的噬菌体,资料二:在T2噬菌体的化学分析中, 对蛋白质和DNA的进一步分析表明: 硫仅存在于蛋白质分子中; 磷几乎都存在于DNA分子中。,2、如何把DNA分子和蛋白质区分开来?,1、用什么方法追踪遗传物质的去向呢?,思考:

8、,3、如何使DNA分子和蛋白质分别标记上32P 和35S,同位素标记法,用35S标记蛋白质;32P标记DNA。,T2噬菌体侵染细菌的实验(赫尔希和蔡斯),第一步: 标记细菌 细菌+含35S的培养基 含35S的细菌 细菌+含32P的培养基 含32P的细菌,第二步: 标记噬菌体 噬菌体+含35S的细菌 含35S的噬菌体 噬菌体+含32P的细菌 含32P的噬菌体,含35S的培养基,含35S的细菌,含35S的噬菌体,T2噬菌体侵染细菌的实验(赫尔希和蔡斯),实验过程,实验结果,T2噬菌体侵染细菌的实验(赫尔希和蔡斯),1、用35S标记蛋白质的一组, 放射性高, 放射性低,说明 。 2、用32P标记DN

9、A的一组, 放射性高, 放射性低,说明 。,沉淀物,上清液,沉淀物,上清液,蛋白质没进入细菌体内,DNA进入细菌体内,a.为什么用35S标记的A组实验,沉淀物中也有少量的放射性?放射性从何而来?,搅拌不充分,含有少量35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中,使沉淀物中出现少量的放射性,思考讨论:,保温时间过短,部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内 保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放出子代噬菌体,b.为什么用32P标记的B组实验,上清液中也有少量放射性?导致放射性的可能原因有哪些?,思考讨论:,T2噬菌体侵染细菌的实验(赫尔希和蔡斯),实验结论,DNA进入细菌体内,子代

10、噬菌体的各种性状是通过亲代DNA遗传的,DNA才是真正的遗传物质。,(1)艾弗里的实验:直接将S型细菌的DNA、多糖、蛋白质等分开,分别与R型细菌混合培养。 (2)赫尔希和蔡斯的实验:分别用放射性同位素35S 、32P标记噬菌体的蛋白质和DNA,分别让其侵染大肠杆菌。,艾弗里肺炎双球菌的转化实验和噬菌体侵染细菌的实验比较,设法将DNA与其他物质 ,单独地直接地研究它们各自的作用,1实验思路相同:,2实验设计原则相同:,都遵循 原则,3处理方式的区别,分开,对照,流感病毒,SARS病毒,下面这些生物的遗传物质是什么?,RNA病毒的遗传物质是RNA,1956年格勒和施拉姆证明烟草花叶病毒的遗传物质

11、是RNA,烟草花叶病毒,如果你是科学家,请设计实验证明烟草花叶病毒的遗传物质是什么?,背景知识:烟草花叶病毒TMV是由RNA和蛋白质组成的,在感染烟草时,会出现致病斑。,烟草花叶病毒,得花叶病,不得花叶病,生物,有细胞结构,无细胞结构,真核生物(含DNA、RNA),原核生物(含DNA、RNA),病毒,DNA病毒,RNA病毒,遗传物质是RNA,遗传物质是DNA,因为绝大多数生物的遗传物质是DNA,因此,DNA是主要的遗传物质。,课堂小结1,判断:烟草和烟草花叶病毒的遗传物质主要是RNA,1928年格里菲思提出S型肺炎球菌含有转化因子,1944年艾弗里等人证明了转化因子(遗传物质)是DNA,195

12、2年赫尔希和蔡斯进一步证明遗传物质是DNA,1956年格勒和施拉姆证明烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,DNA是主要的遗传物质,课堂小结2,1格里菲思(F.Griffith)用肺炎双球菌在小鼠身上进行了著名的转化实验,此实验结果() A证明了DNA是遗传物质 B证明了RNA是遗传物质 C证明了蛋白质是遗传物质 D没有具体证明哪一种物质是遗传物质,艾弗里和同事用R型和S型肺炎双球菌进行实验,结果如下表。从表可知,A、不能证明S型菌的蛋白质不是转化因子 B、说明S型菌的荚膜多糖有酶活性 C、和说明S型菌的DNA是转化因子 D、说明DNA是主要的遗传物质,某研究人员模拟赫尔希和蔡斯的T2噬菌体侵染大肠杆菌实验,进行了如下实验: 用32P标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌; 用未标记的噬菌体侵染35S标记的大肠杆菌; 用3H标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌。 一段时间后进行离心,检测到放射性存在的主要部位依次是,A沉淀物、上清液、沉淀物和上清液 B沉淀物、沉淀物、沉

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