第11章 弧菌.ppt

1、第11章 弧菌属,弧菌属(Vibrio),1.概念：是一群菌体短小，弯曲成弧形的 革兰氏阴性菌。 2.形态：菌体弯曲，属于螺形菌，但人工培养后呈现杆状，类似肠道杆菌。 3.与肠杆菌科细菌的区别： 氧化酶试验 + 一端单一鞭毛，运动活泼、呈穿梭状 嗜碱生长,氧化酶试验阳性(深紫色),氧化酶试验阳性(深紫色),单鞭毛电镜图,弧菌属(Vibrio),4.分布：广泛存在于自然界中，其中以水体环境最为多见。 5.致病：重要的致病性弧菌为霍乱弧菌和副溶血性弧菌。,第一节 霍乱弧菌,霍乱弧菌(V.cholerae)是引起霍乱的病原体，霍乱是一种起源于印度的烈性传染病，自从1817年以来，发生过7次世界性的霍

2、乱大流行。前6次均由霍乱弧菌古典生物型引起，第7次大流行由霍乱弧菌El-Tor生物型引起，它们属于O1群霍乱弧菌。但1992年在印度、孟加拉发现的新血清型(O139群)霍乱弧菌(非O-1群菌)所致的霍乱流行, 引起各国的高度重视。,六次霍乱大流行,亚洲 非洲 欧洲 南美洲 北美洲 大洋洲第1次1817-23+ + + - - - 第2次 1826-37+ + + + + +第3次1846-62 + + + + + -第4次1864-75+ + + + + -第5次1883-87+ + + + - -第6次1892-1925+ + + + - -,在第5次霍乱大流行中(1883年)，德国细菌学家

3、Robert Koch从霍乱病人排泄物及病死者肠道组织中首先发现了霍乱弧菌，霍乱传染性强，病死率高，属于国际检疫的传染病(海关检查)，在我国霍乱排行甲类传染病第二位，俗称二号病。,1905年 也在埃及西奈半岛的ElTor 检疫站首次分离到 溶血性霍乱弧菌，命名为： ElTor 生物型 El Tor 生物型 溶血 古典生物型 不溶血 O-1群 古典生物型 霍乱弧菌（18171961） 前六次大流行的流行菌株 O-1群 El Tor生物型霍乱弧菌 1961 第七次大流行的流行菌株 O2O138群（非O-1群） 引起散发的胃肠炎 O139群： 1992年10月开始在印度半岛引起霍乱样病流行 流行菌株

4、不能被O-1群抗血清所凝集 也不被O2O138 群抗血清所凝集 以流行株制备的抗血清也不凝集O1O138 群霍乱弧菌 及其他弧菌 故：命名为新的血清群霍乱弧菌O139群,一、生物学性状,形态和染色 1.大小：0.50.81.53m。 2.形态：弯曲成弧形或逗点状。 3.结构：有菌毛，特别是菌体一端有单鞭毛，使细菌运动活泼(病人粪便作悬滴标本,可见鱼群样穿梭 )，部分菌株(例如O139群)有荚膜 4.染色：革兰氏阴性菌。 形态学特点为逗点状、运动活泼的革兰氏阴性菌。,单鞭毛电镜图,霍乱弧菌革兰氏染色,培养特性与生化反应 1.需氧菌,营养要求不高,适应性强,对温度、营养物质、气体环境没有很严格的要

5、求。 2.耐碱不耐酸 碱性蛋白胨水运送标本/增菌 碱性琼脂平板透明/半透明、无色扁平菌落。TCBS琼脂平板 3.生化反应：氧化酶试验阳性，分解多种糖类，发酵的糖产酸可杀死该菌。,抗原结构与分型 1.抗原组成：O抗原为特异性抗原，H抗原是弧菌的共同抗原。 2.分型：根据O抗原不同，把霍乱弧菌分为155个血清群，其中O1群和O139群引起霍乱，O1群霍乱弧菌又分为3个血清型和2个生物型。,O1群霍乱弧菌,血清型 O1多克隆抗体 O1单克隆抗体 流行 (抗原成分) A B C 小川型（AB） - 是 稻叶型（AC） - 是 彦岛型（ABC） 未知 “”凝集，“-”不凝集,O1群霍乱弧菌,O1群霍乱弧

6、菌的每个血清型可分为古典生物型和EI-Tor生物型，两种生物型的霍乱弧菌在许多生物学特性、临床表现和流行特点等方面基本相同 ，它们的区别表现为： 特性 古典生物型 EI-Tor生物型 对第群噬菌体敏感性 + - 凝集鸡红细胞 - + 溶解羊红细胞 - + 对50IU的多粘菌素敏感性 + -,O139群霍乱弧菌,1.不同点：不表达O1群霍乱弧菌的O抗原， 但编码脂多糖抗原和荚膜多糖抗原。 2.相同点： O1群霍乱弧菌和O139群霍乱弧菌都产生霍乱肠毒素，感染的临床表现和流行特点基本相同。,抵抗力 1.对理化因素抵抗力弱：以1份漂白粉和4份水比例处理患者排泄物或呕吐物1小时，可杀死霍乱弧菌。 2.

7、水环境：存活1-3周，与疾病传播有关。自来水加0.5ppm次氯酸, 15分钟能杀死霍乱弧菌。 3.1000C 1-2min，550C 10min,正常胃酸中 4min,二、致病性,致病物质 霍乱肠毒素 、鞭毛、菌毛。,霍乱肠毒素,1.性质：外毒素，蛋白质，是最为强烈的致泻毒素。 2.组成：1个A亚单位和5个B亚单位。B亚单位是结合成分，与小肠粘膜上皮细胞结合； A亚单位是毒性成分。 3.机制： A亚单位的A1成分激活腺苷酸环化酶，细胞内cAMP升高，小肠粘膜上皮细胞分泌亢进(电解质和水)，导致腹泻和呕吐。,霍乱肠毒素 B 亚单位 结合部分 受体：小肠上皮细胞GM1神经节苷脂 A2亚单位 与B亚

8、单位结合 A1亚单位 毒性部分 活化的A1 胞内 腺苷环化酶活化 ATP cAMP 分泌：Na+、K+、H2O 导致：严重腹泻、呕吐、脱水。 由？编码？,霍乱肠毒素机制,菌毛：粘附肠上皮细胞刷壮缘的微绒毛； 鞭毛：活泼的鞭毛运动，使细菌穿过粘膜表面 并在此生长繁殖。 毒力株粘液素酶：液化粘液层,利于细菌穿透,霍乱弧菌依靠活泼的鞭毛运动, 穿过肠粘膜表面的粘液层, 通过菌毛粘附于肠上皮细胞上, 迅速繁殖并分泌霍乱肠毒素。霍乱弧菌只有粘附定植小肠粘膜上皮细胞后方可致病。,所致疾病 1.传染源：霍乱病人、无症状感染者、带菌者(EI-Tor生物型)。 2.传播途径：肠道传染病，污染的水或食物经口摄入。

9、 3.致病过程：稀释胃酸，霍乱弧菌鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素。 4.症状：剧烈吐泻，吐泻物呈“米泔水”样(胆汁分泌减少)。导致水和电解质丢失，循环衰竭及肾功能衰竭 。,所致疾病 人类是霍乱弧菌的唯一易感者 污染水源、食品 正常胃酸：1081010 胃 引起感染 胃酸低下：103105 小肠 粘附 迅速繁殖 定居 1、霍乱弧菌不侵入上皮细 胞，更不侵入血液。 肠毒素 2、肠毒素进入肠上皮细胞 发挥作用，但不入血液。 3、局部一般无炎症细胞 上吐下泻、严重脱水、血容量减少,微循环衰竭、酸中毒 肾功能衰竭、休克 死 亡 及时治疗：补充液体、电解质，死亡率仅为1% 未经治疗： 死亡率可达50%75%,疾病

10、的严重程度比较 1.最重：O139群霍乱弧菌，严重脱水和高死亡率。 2.较重：O1群霍乱弧菌古典生物型。 3.较轻：O1群霍乱弧菌EI-Tor生物型。,三、免疫性,患病后具有较牢固的免疫力 IgG型抗肠毒素抗体： 中和抗体 阻断B亚单位与受体的结合 IgM型抗菌体抗体： 激活补体 SIgA抗体： 是保护机体肠粘膜免受霍乱弧菌及其肠毒素侵袭和致病的主要机制。 抵抗肠腔多种蛋白酶的分解 与菌毛等粘附因子结合，阻碍细菌粘附于肠粘膜上皮细胞 凝聚细菌，使其失去动力，阻止其侵袭力和产生毒素,四、微生物学检查法,快速、准确、及时报告疫情！流行病学调查 直接镜检： 标本？悬滴法观察细菌运动 分离培养： 标本

11、？标本的保存和运输 Cary-Blair保存液 碱性蛋白胨水运送、保存、增菌 TCBS琼脂平板分离培养 黄色菌落 生化反应 血清学试验 鉴定与分型 快速诊断 荧光球试验；PCR法,霍乱是一种烈性传染病，对首例病人的确诊对控制本病极为重要!,五、防治原则,1.一般预防：控制传染源(很难消灭传染源)，切断传染途径。 2.免疫预防：应用菌苗类毒素 减毒重组活菌苗 减毒株（CVD103） 菌苗加类毒素混合苗 纯化B亚单位 +灭活细菌 3.治疗措施： 及时补充水份、电解质(对症处理)是抢救霍乱病人的关键 敏感抗生素治疗(注意耐药性) 及时隔离病人。,第二节 副溶血性弧菌,副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)的生物学性状类似霍乱弧菌，但与霍乱弧菌比较，它的一个显著特点是嗜盐性，在NaCl浓度较高(3%-4%左右)的环境中才能生长繁殖 ，致病性副溶血性弧菌多出现溶血(神奈川现象)，食入烹饪不