体外受精和早期胚胎培养课件..ppt

1、3.2 体外受精和早期胚胎培养,教学目标,简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。,教学重点 （1）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 （2）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 教学难点 （1）卵母细胞的采集和培养。 （2）精子的采集和获能。,存在困难： 1、引进一头良种成年奶牛需要3万5万元。 2、牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生 只能生育四五次。（牛的妊娠期约280天）,讨论1：是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖？为什么？,牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排

2、卵数多1000倍左右。 公牛产生的精子数目就更多了 （精子数:50亿/mL),理论基础：,讨论2：如何让引进的良种牛快速大量的繁殖？,试管动物技术： 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经 产生后代的技术。,体外条件,人工操作,早期胚胎,移植,试管动物技术的三个基本操作环节：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,精子,卵子,受精卵,早期胚胎,幼体,新个体,哺乳动物个体发育过程,试管 动物,思考：子代数目的多少取决于精子数还是卵子数？,方法1：给供体注射促性腺激素，使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子（超数排卵），之后从输卵管中

3、冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,方法2：从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞,借助超声波探测仪和内窥镜的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,方法2：从活体卵巢中采集卵母细胞,活体采集的牛卵母细胞,比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同，为什么？,（1）收集的方法: 假阴道法、手握法、 电刺激法 （2）获能处理: 培养法：(人工配制的获能液中培养）用于啮齿动物、家兔和猪 化学法：（一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，

4、化学药物诱导）用于牛、羊等大型哺乳动物,2、精子的采集和获能,在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程,3、体外受精,CO2培养箱,二、胚胎的早期培养,复习：动物细胞培养的条件是什么？,二、胚胎的早期培养,发育培养液成分 :,水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.,牛、羊：桑椹胚或囊胚 小鼠、家兔：卵裂期或囊胚 试管婴儿：8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植。 注意：不同动物胚胎移植的时间不同,胚胎冷冻保存就是将动物的早期胚胎,采用特殊的保护剂和降温措施进行冷冻,使其在-196的液氮中代谢停止或减弱到足够小的程度,但又不失去升温后恢复代

5、谢的能力,从而能长期保存胚胎的一种生物技术。,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,受体牛（子宫内孕育）,“试管牛”工厂化生产流程图,有性生殖,无性生殖,体外受精 早期胚胎培养 胚胎移植,体细胞核移植技术 胚胎移植,双亲,几乎全部来自供核亲本,回答下列问题,1）进行小鼠胚胎工程时，首先在光控周期下饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是 。再在37，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天可以

6、看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这时胚胎已经进入_期。,促进超数排卵,使精子获能,囊胚,2）如果体外受精后，在精原核与卵原核融合之前，用微型吸管除雄原核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 。 3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源有 。,容易获得纯合子并缩短育种时间,小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因,第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。路易丝.布朗的母亲

7、梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。,首例试管婴儿,医生从梅.布朗（时年31岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年38岁）的精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵分裂形成16细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫内。9个多月后就生下了路易丝.布朗。,世界上第一位试管婴儿，如今自己也已经当上了妈妈。图为她抱着自己的两个双胞胎孩子。和她的妈妈一样，这对双胞胎也是试管婴儿。,1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生,著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿,1、控制性超排卵 2、监测卵泡3、取卵4、取精5、体外受精6、胚胎体外培养7、胚胎移植8、胚胎移植后补充孕酮等激素9、胚胎移植后第14天验晨尿 确定是否妊娠10、妊娠后14天，B超检查胚胎着床部位及数量,试管婴儿技术的基本操作步骤:,根据资料回答下列问题： 1.试管婴儿技术包括哪些操作步骤？ （体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植） 2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同？ 相同之处：都通过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,你支持设计试管婴儿吗？ 试管婴儿技术会带来