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文档简介
1、。1,临床免疫学检验,仲强,华中科技大学同济医学院诊断学系,2、临床免疫学检查、血清免疫球蛋白(Ig)测定、血清补体测定、细胞免疫检测、感染免疫检测、自身免疫检查、肝炎病毒标志物检测和肿瘤标志物检测,3、血清免疫球蛋白的分类,Ig通常指具有抗体活性和/或抗体样结构的球蛋白。免疫球蛋白可通过免疫电泳和超速离心分析分为五类:IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。免疫球蛋白:最丰富或占优势的免疫球蛋白(75%),唯一能通过胎盘的免疫球蛋白。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成和分泌。IgA:约10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。它主要由肠淋巴组织中的浆细胞产生。4,血清免疫球蛋白,IgM:最高分子
2、量,由5个IgM单体通过J链连接。它是最早的免疫球蛋白和抗原刺激后最早的抗体。其杀菌、溶菌、溶血、吞噬和凝集作用比IgG高500-1000倍。测定方法:单向免疫扩散法或免疫比浊法。5,血清免疫球蛋白测定参考值,参考值:IgG: 7.616.6克/升(RID法),IgA: 7103350毫克/升,IgM: 0.482.12克/升,6,临床意义免疫球蛋白增加多克隆增加:在各种慢性感染中是常见的。单克隆增加:主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨肉瘤和原发性巨球蛋白血症。免疫球蛋白减少在先天性免疫缺陷、获得性免疫缺陷、联合免疫缺陷和长期使用免疫抑制剂的患者中很常见。免疫扩散法测定血清IgD: 0.62毫
3、克/升已经发现,一些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗“O”抗体是IgD的,但它们的活性很低。血清IgE主要由鼻咽、支气管、胃肠道等固有层的浆细胞分泌。它是一种嗜细胞抗体,可与肥大细胞和嗜碱性粒细胞膜上的流式细胞仪结合产生型过敏。elasa:0 . 10 . 9毫克/升临床意义:1 .I型过敏2。IgE骨髓瘤、寄生虫感染等。3.慢性肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。9是由单克隆B淋巴细胞异常增殖产生的IgG分子或片段,通常没有抗体活性。参考值:蛋白质电泳,免疫电泳:阴性意义:1。多发性骨髓瘤(MM),占35%,其中IgG型约占60%;IgA型约占20%;轻链型约占15%;IgD和I
4、gE是罕见的。2.巨球蛋白血症。3.重链疾病。4.半分子疾病。5.恶性淋巴瘤。6.良性蛋白尿。血清M蛋白,单克隆免疫球蛋白,10,血清补体测定,补体是一种具有酶活性的热稳定球蛋白,它分为三组:9种补体成分(C1C 9);b、D、P、H和I因素;补体调节蛋白,如C1抑制剂、C4结合蛋白和衰变促进因子。总补体溶血活性(CH50)测定参考值:5000010000 u/L。显著性:急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤和妊娠均有增加。急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、艾滋病、严重烧伤等减少。11,血清补体测定,血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典激活途径和旁路激活
5、途径中起重要作用。参考值:0.851.70克/升通过免疫比浊法增加为急性期蛋白,在急性炎症、早期感染性疾病、急性组织损伤、恶性肿瘤和抑制剂排斥反应中增加。补体合成能力下降;合成原料不足;消耗或损失太多;先天性补体缺乏。12,血清补体的测定,血清C4的测定:由肝脏和吞噬细胞合成,参与补体的经典激活途径。参考值:单向免疫扩散法:0.197/-0.109/升。临床意义与C3基本相似,多发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性C4缺乏症等也有所下降。.13,血清补体测定和补体C1q测定的参考值:0.1790.04克/升。临床意义:与C3相似,在活动性混合结缔组织病、严重营养不良、肾病综合征、严重联合免疫缺陷病等
6、中也发现了该下降。b因子测定-C3活化剂前体。14、细胞免疫试验、淋巴细胞表面标记试验、T淋巴细胞表面标记试验:E花环形成试验、免疫荧光(IFA)、荧光激活细胞分类(FACS)、免疫金银法、免疫酶染色等。e玫瑰花结形成试验SRBC CD2参考值Et 64.4%6.7%免疫荧光,检测表面标志物。15、T和T淋巴细胞,可用于计数T淋巴细胞、分类T淋巴细胞亚群和判断T淋巴细胞活化程度。CD3分子在所有成熟T淋巴细胞表面表达,是总T淋巴细胞的重要标志。CD3在甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力和器官移植后排斥反应中很常见。CD3主要存在于免疫缺陷病中,如艾滋病、先天性胸腺发育不全综合征和联
7、合免疫缺陷病。也可见于恶性肿瘤、系统性红斑狼疮、免疫抑制疗法等。成簇分化CD3代表总的T淋巴细胞,CD4是辅助和诱导T细胞的标志,CD8是抑制和杀伤T细胞的标志。用单克隆抗体和荧光标记的二级抗体在荧光显微镜或流式细胞仪下计数镉的百分比。参考值:IFA): CD3为63.1.8 %;CD4为42.8%9.5%。CD8 19.6% 5.9%;CD4 /CD8为(2.20.7)/1。流式细胞术:CD3 61%;CD4 28X %;CD8 19H %;CD4 /CD80.92.0/1 .17、T细胞分化抗原试验、临床意义CD3 CD4 T细胞下降在某些病毒性传染病中很常见,如艾滋病、MCV病、严重创伤
8、、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等。活动期类风湿性关节炎发病率升高。CD8 T细胞下降在类风湿性关节炎、干燥综合征、重症肌无力、糖尿病(型)和膜性肾小球肾炎中很常见。在传染性单核细胞增多症、MCV病和慢性乙型肝炎的急性期升高.CD4 /CD8比值下降,这在艾滋病、瘤性麻风、恶性肿瘤的分期和复发中较为常见。在传染性单核细胞增多症、MCV病、血吸虫病等传染病中也发现了这种病毒。在活动性类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征、重症肌无力、膜性肾小球肾炎和器官移植后的排斥反应中发现了这种增加。18,淋巴细胞功能试验,T细胞转化试验形态学方法:T细胞转化率60.1%7.6% 3H-TdR掺入法:用
9、液体闪烁计数器测定培养的淋巴细胞,并记录每分钟脉冲数。SI(刺激指数)=PHA刺激管的平均cpm=对照管的平均CPM。SI2显著,而SI2是淋巴细胞转化率的降低。19、T细胞转化试验,具有判断机体细胞免疫功能水平的临床意义,并降低那些常见的细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下,如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症肺结核、肝硬化等。唐氏综合征中升高是常见的。为了估计疾病的疗效和预后,表面标记。20,检测到B淋巴细胞。表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22、CD40和其他表面受体:B细胞抗原受体(BCR)、细胞因子受体(CKR)、补体受体(CR)和Fc受体。B细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B细胞
10、的特征性表面标志。通过检测针对不同类型免疫球蛋白的荧光标记单克隆抗体,b细胞可分为smIgg、SmIgM、SmIgA、SmIgD和SmIgE。21,B淋巴细胞表面标记物检测,参考值:免疫荧光(绵羊抗人)(以携带该标记物的细胞百分比表示):SmIg细胞总数:平均21% (16 (%) smig细胞:平均7.1% (4%) smim细胞:平均8.9%(7%)SMig细胞:平均2.2%(1%4%) SmIgD细胞:平均值为0.9% (0% 1.5%)。检测到。22,B淋巴细胞表面标志物,SmIg细胞增多的临床意义:常与B细胞恶性增殖有关,主要见于慢性淋证、毛细胞白血病和巨球蛋白血症。SmIg细胞的减
11、少主要与体液免疫缺陷有关,这在性免疫球蛋白缺乏和严重的联合免疫缺陷病中很常见。检测B淋巴细胞表面标记物,测定B细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22参考值:FACS:CD19细胞11.74%3.73%临床意义CD19是所有B细胞的共同表面标记物,在B细胞系统恶性肿瘤中增加,在体液免疫缺陷病中减少。24、自然杀伤细胞可直接杀死效应细胞,具有抗肿瘤、抗感染和免疫调节功能,还参与移植排斥、自身免疫性疾病和超敏反应。乳酸脱氢酶释放法参考值细胞毒性指数:27.55.5% 51Cr释放法参考值自然杀伤细胞活性(自然杀伤率):47.68%,2020年8月14日,25、活性降低在恶性肿瘤、严重的联
12、合免疫缺陷病、艾滋病和免疫抑制剂患者中很常见。评价肿瘤疗效和预后时,自然杀伤细胞可释放细胞因子如干扰素、干扰素和粒细胞集落刺激因子。27、乙肝病毒血清标志物的检测、HBeG、抗-HBe或抗-HBe HBeG、抗-HBc或抗-Hbc: ELASA、RIA、HBsAg、抗-HBs或抗-HBS、28,检测乙型肝炎病毒血清标志物,HBsAg()表明,在肝脏中发现了HBV病:乙型肝炎的潜伏期和急性期。慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化,肝癌。慢性乙型肝炎表面抗原携带者。抗HBs或抗HBs:中和抗体。29,乙肝病毒血清标志物检测,HBeAg:患有乙肝,这是病毒复制活跃和传染性强的标志;持续阳性容易转变
13、为慢性肝炎;乙型肝炎表面抗原和乙型肝炎表面抗原可以垂直传播。抗乙肝病毒或抗乙肝病毒:出现在急性感染恢复期,持续时间长。这意味着HBV被部分消除或抑制,复制减少,传染性降低。30,乙型肝炎病毒血清标志物,抗-HBc或抗-HBc:一种反映HBV对肝细胞侵袭的指标,主要包括IgM、IgG和IgA。抗-HBc IgM阳性是最早的特异性抗体,是诊断急性乙型肝炎和判断病毒主动复制的指标,提示患者的血液具有高度传染性。它也见于慢性活动性肝炎。抗-HBc抗体阳性滴度高,表明其患有乙型肝炎并被感染;低滴度是先前感染的指标,在体内需要很长时间。31,HBV血清标志物,HBV-脱氧核糖核酸的定性和定量测定:目前的定
14、量测定范围是102108拷贝/毫升。综合评价乙型肝炎表面抗原、抗乙型肝炎表面抗原、抗乙型肝炎表面抗原、抗HBC及联合检测的临床意义。32、丙型肝炎病毒标志物检测,抗丙型肝炎病毒抗体阳性在急性丙型肝炎感染中较为常见,是诊断丙型肝炎的早期敏感指标;它是丙型肝炎病毒活性的指标和丙型肝炎病毒传染性的指标。反转录巢式聚合酶链反应和荧光定量聚合酶链反应检测抗丙型肝炎病毒抗体(第三代试剂抗原包括丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒;丙型肝炎病毒容易变异,抗丙型肝炎病毒阳性转化的时间也大不相同。33,血清抗链球菌溶血素“O”的测定,参考值:乳胶凝集(LAT): 500 U含义:
15、这种增加常见于A组溶血性链球菌感染的相关疾病,如扁桃体炎、感染性心内膜炎、风湿热、链球菌感染后的肾小球肾炎等。A组溶血性链球菌感染后1周开始增加,46周达到高峰,持续数月或数年。假阳性和假阴性。34、伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌的免疫测定,肥达反应参考值O凝集值1: 80,伤寒沙门氏菌H凝集值1: 160,副伤寒沙门氏菌A、B、C凝集值1: 80,副伤寒沙门氏菌抗体IgM测定参考值ELASA法:阴性或效价1: 20。伤寒沙门氏菌和副伤寒的免疫测定,临床意义O升高,H正常,O升高,H升高,O升高,甲、乙、丙升高。36、血清C反应蛋白测定,C反应蛋白是由肝脏合成的一种急性期反应,可与肺炎球菌的C多
16、糖反应。参考值:8.2毫克/升(免疫比浊法)。重大组织损伤,如大手术、严重创伤、烧伤、心肌梗塞等。发病数小时后迅速增加,好转后迅速下降。增加再次表明继发感染或深静脉血栓形成。风湿热活跃期,可达200毫克/升以上.细菌感染经常明显上升,而病毒感染不明显或轻微上升。恶性肿瘤、器官移植后排斥、妊娠等。可明显增加,在疾病发作后数小时内可迅速增加,然后在病情好转后迅速降至正常。37,肾综合征出血热病毒抗体检测,参考值IFA,ELASA:阴性特异性IgM-在感染后23天检测,并在710天达到峰值。特异性IgG在感染后两周出现,并持续多年。艾滋病血清学检查和抗艾滋病病毒(型或型)检测是艾滋病诊断的主要指标。该抗原是艾滋病毒感染的T细胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原污染可导致假阳性)。方法:初筛试验ELASA法、乳胶凝集法、免疫印迹法和斑点免疫渗滤法。蛋白质印迹试验和聚合酶链反应可以用来检查艾滋病毒的基因。用人类免疫缺陷病毒抗原检测P24抗原(具有群体特异性的病毒衣壳蛋白)。艾滋病病毒核酸检测;核糖核酸聚合酶链反应。39、梅毒血清学检查是一种由梅毒螺旋体梅毒亚种引起的性传播疾病。梅毒螺旋体抗体检测:非梅毒螺旋体抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验,前者是筛查试验和治疗效果监测,后者是确诊。暗视野显微镜下聚合酶链反应检测梅毒螺旋体,测定甲胎蛋白,参考值CLI
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