7 第七章苯乙胺类肾上腺素药物的分析 2.ppt

1、药物分析,Xiangnan University,第七章 苯乙胺类拟肾上 腺素药物的分析,教学目的与要求,掌握典型药物结构与特点、主要理化性质； 掌握苯乙胺类药物的含量分析方法以及酮体检查。 熟悉苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质、鉴别试验。 了解苯乙胺类药物的有关杂质检查。,第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,乙胺,含苯环的基团,苯乙胺类,1、苯环常被活泼的酚羟基取代 2、具有碱性的脂肪乙胺侧链，易于被氧化,?,基本结构与性质,?,第一节 结构与性质(Phenethylamine),一、基本结构与性质,瘦肉精,弱碱性： 烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶

2、于水,酚羟基特性： 邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色； 在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深； 在碱性溶液中更易变色。,*,光学活性：手性碳原子，具有旋光性,苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基； 紫外、红外吸收特性,第一节 性质,第二节、鉴别试验Identification,一、与三氯化铁反应,具有酚羟基的本类药物,第二节、鉴别试验Identification,表7-2 苯乙胺类药物与三氯化铁的显色反应,第二节、鉴别试验Identification,二、与甲醛-硫酸反应,具有酚羟基的本类药物,请看具体例子,第二节、鉴别试验Identification,与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应

3、,三、氧化反应,酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色,书上说的是还原性反应,第二节、鉴别试验Identification,第二节、Identification,四、氨基醇的双缩脲反应 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素等药物分子结构中，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应,盐酸麻黄碱,显蓝紫色,加乙醚, 乙醚层显紫红色，水层显蓝色,?,例：Chp鉴别盐酸麻黄碱 取本品10mg，1ml水溶解后，加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。,五 、亚硝基铁氰化钠反应脂肪族伯胺的Rimini专属反应,二、Id

4、entification,Rimini反应例子,丙酮中不能含有甲醛?,二、Identification,六、UV和IR,三、Detection of specific impurities,一、酮体杂质的检查,生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。 降解产物,肾上腺素红,多聚体,三、Detection of specific impurities,通过UV光谱检测,三、Detection of specific impurities,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,特殊杂质检查,光学纯度检查：ChP2010,手性碳原子,三、Detection of specific im

5、purities,二、有关物质,肾上腺素HPLC 盐酸苯乙双胍纸色谱法 盐酸去氧肾上腺素TLC 其它药物HPLC,一些方法的特征还是要记住的,回顾,基本结构： 性质：酚羟基特性、弱碱性、旋光性、紫外吸收特性 鉴别：与铁盐反应；与甲醛-硫酸的反应；氧化反应；氨基醇的双缩脲反应；脂肪伯胺的Rimini反应 杂质检查：酮体检查；光学纯度检查；,四、含量测定,原料药：多采用非水溶液滴定法，也有溴量法和亚硝酸钠法。 制剂：UV、比色法、HPLC,四、含量测定,一、非水溶液滴定法,定义：是指在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法. 应用：主要用于测定有机碱及其氢卤素盐、硫酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量，也用

6、于测定某些有机弱酸的含量。,四、Assay,一、非水溶液滴定法,溶剂种类： （1）酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱度，最常用的酸性溶剂是冰醋酸。(?) （2）碱性溶剂：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强其相对酸度，最常用的碱性溶剂是二甲基甲酰胺。(?) （3）两性溶剂：兼有酸碱两种性能，最常用的是甲醇。 （4）惰性溶剂：溶剂没有酸碱性，如甲苯、三氯甲烷、丙酮。,四、Assay,一、非水溶液滴定法(弱碱性),为什么要应用非水滴定法？ 这是因为本类药物多为弱碱性，在水溶液中用酸碱滴定液直接滴定没有明显的突跃，终点难以观测，常不能获得满意的测定结果。而在非水酸性溶剂中，只要在水溶液中

7、的pKb 10，均可以被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱度显著增强。因而可使弱碱性的药物都能顺利进行滴定。,以高氯酸滴定弱碱为例，在冰醋酸中：,弱碱 B pKb 10 则在水溶液中无法进行滴定,四、 Assay,再置换,先反应,相当于,四、Assay,一、非水溶液滴定法(弱碱性),冰醋酸为溶剂 醋酸汞消除氢卤酸的干扰 若碱性较弱则加醋酐使突跃明显 加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐,一般方法,四、Assay,一、非水溶液滴定法(弱碱性),适用范围： 主要应用于pKb 8的有机碱性药物及其盐的含量测定。条件选用适当的话8-13的弱碱均可采用。 对于碱性较弱的药

8、物pKb为810时，宜选用冰醋酸， pKb为1012时，宜选用冰醋酸与醋酐混合溶剂， pKb大于12时，就以醋酐为溶剂。,原因：醋酐有利用增加碱性药物的碱性。！,要注意方法适用范围,四、Assay,一、非水溶液滴定法(弱碱性),酸根影响：在醋酸溶剂中： 置换顺序：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸磷酸有机酸。,不同的酸对滴定终点的显示有影响，对滴定结果也有影响！,细节方面的内容自己多注意,四、Assay,一、非水溶液滴定法(弱碱性),滴定剂的稳定性：挥发性溶剂，结果需要校正。 终点指示方法：电位滴定法、指示剂法。 其它干扰,指示剂的选用及终点颜色的判断要注意,二、溴量法,四、Assay,原理：药物分子中

9、的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法硫代硫酸钠滴定测定剩余的溴。根据与药物定量反应消耗的溴滴定液的量，即可计算供试品的含量。,二、溴量法,四、Assay,游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失 不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量2为宜。 平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。,二、溴量法,三、亚硝酸钠法,四、Assay,盐酸克伦特罗，芳伯氨基，重氮化，永停滴定法指示终点,四、Assay,四、 紫外分光光度法： 苯乙胺类药物分子具有苯环结构具有特征的紫外吸收，Chp2010采用这种方法测定多种紫类药物。如盐酸甲氧明注射液，重酒

10、石酸间羟胺注射液。 比色法： 分子中具有芳伯胺基的药物采用重氮化-偶合反应显色，分子中含有酚羟基可与亚铁离子显色，然后进行比色测定。Chp2010采用比色法测定盐酸克伦特罗栓和盐酸异丙肾上腺素。,四、Assay,四、UV和比色法,五、 HPLC,瘦肉精,ChP2010采用HPLC作为盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、盐酸异丙肾上腺素注射液、盐酸多巴胺注射液、硫酸沙丁胺醇注射液（及其片剂、胶囊、缓释片与缓释胶囊）、盐酸苯乙双胍片、盐酸氯丙那林片、盐酸麻黄碱注射液与滴鼻液、盐酸氨溴索（及其口服溶液、片剂、胶囊与缓释胶囊）等的含量测定方法。,五、 体内药物分析(GC-MS),动物组织中

11、的盐酸克伦罗特残留的测定 盐酸克伦特罗是肾上腺类神经兴奋剂。 克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。 又称“瘦肉精” 应用GC-MS法进行测定。,五、 体内药物分析(GC-MS),人血浆中特布他林的LC-MS/MS分析 特布他林是2-受体激动剂，临床用于治疗支气管哮喘，喘息性支气管炎，肺气肿等。 其血药浓度低，需要用到灵敏的分析检测方法：LC-MS/MS。,总结,结构与性质：易氧化；弱碱性；旋光性 鉴别试验：与铁盐的反应；与甲醛硫酸反应；氧化反应；双缩脲反应；脂肪伯胺的Rimini试验 含量测定：非水溶液滴定法、溴量法、亚

12、硝酸钠法,练习与思考,1、下列苯乙胺类药物中，可与三氯化铁试剂显深绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色的是 A、硫酸苯丙胺 B、盐酸甲氧明 C、盐酸异丙肾上腺素 D、盐酸克仑特罗 E、盐酸苯乙双胍,练习与思考,2、下列药物中，可显双缩脲反应的是 A、盐酸多巴胺 B、盐酸麻黄碱 C、对氨基苯甲酸 D、苯佐卡因 E、氧烯洛尔,练习与思考,3、下列药物中，可显Ramini反应的是 A、盐酸多巴胺 B、氧烯洛尔 C、对氨基苯甲酸 D、苯佐卡因 E、重酒石酸间羟胺,练习与思考,A、与甲醛-硫酸反应显玫瑰红-橙红-深棕红的变化过程 B、加碘试液产生明显的红棕色 C、与亚硝基铁氰化钠反应 D、与硫酸铜和氢氧化钠试液反应即显蓝紫色 E、在磷酸盐缓冲液（pH 7.0）中测