可见分光光度法和紫外分光光度法.ppt

1、第13章可见分光光度法和紫外线分光光度法、可见光谱光度和超差光谱特性、内容摘要、物质的吸收光谱分光光度法基本原理透射率和吸光度Lambert-Beer定律显示分光光度法分光光度计测定方法测定灵敏度和准确度的提高方法了解紫外线分光光度法吸收光谱意义。了解分光光度法基本原理、Lambert-berr定律、透射率、吸光度、摩尔吸光系数、质量吸光系数等基本概念和相互关系。理解光的可加性。了解分光光度计的基本结构，熟悉可见分光光度法测量方法标准曲线法和标准比较法、吸光系数比较法和差分分光光度法等。了解如何提高测量灵敏度和准确度。理解紫外线分光光度法一般概念，第一节物质的吸收光谱，1，物质对光的选择性吸收

2、光照射某种物质，物质吸收光，使原始基态(h)变成激发态(e)。只有当分子的能量(h)与照射的物质粒子基态、激发态能量的差异(e)相等时，才能吸收。M(基态)h M*(激发态)物质选择性地吸收光，当溶液有选择地吸收某种颜色的光时，溶液就带有吸收光的补充光。第一节物质的吸收光谱，第一节物质的吸收光谱，2，物质的吸收光谱，不同波长的单色光，依次通过有色溶液测定溶液的吸光度A(absorbance)。以横坐标绘制波长，以纵坐标绘制吸光度A，以吸收曲线或吸收光谱。吸收光谱中吸光度最大的波长以最大吸收波长max表示。一般来说，max是定性识别物质的基础。徐璐不同浓度的溶液，麦克斯保持不变，浓度与最高点成正

3、比。这是定量分析的基础。第一节物质的吸收光谱，3(相邻氮菲)合铁(II)离子的吸收光谱图max=510nm的浓度不同的溶液，max不变，浓度与峰值成正比。通过第二节分光光度法基本原理，1，透射率和吸光度入射光强度I0，吸收光强度Ia，光强度It，反射光强度与Ir I0 Ia It Ir测量溶液和基准溶液的吸收池一样的材料和厚度，反射光强度影响徐璐抵消，常识简化为I0 Ia It，第二节分光光度法基本原理。1、透射率和吸光度透射光的强度It与入射光强度I0的比率称为透射率(transmittance)，以T表示透射率的负对数称为吸光度，以符号A表示。a越大，溶液吸收的光线越多。2节分光光度法基本

4、原理，2，Lambert-berry定律Lambert定律：A=bc溶液厚度B，单位CM；浓度c，单位摩尔-1；摩尔吸收系数，单位Lmol -1cm-1单位c A ab质量吸收系数A的单位Lg -1cm-1 a替换为质量浓度时，第3节中可见的分光光度法，1，分光光度计主要部件照明单色光探测器吸收池信号处理和显示器光源：钨灯，30吸收池：分光光度计中的溶液探测器：将吸收池中的光转换为光电流，然后放大显示输入指示器。第三可见分光光度法，(a)自准式单色光度，(b)棱镜对光的色散作用，第三可见分光光度法，2，测量方法标准曲线法系列浓度标准溶液，吸光度a测量，吸光度a，溶液浓度c的图，通过坐标原点的直

5、线。测量在相同条件下测量的溶液的吸光度，并在标准曲线上调查溶液浓度。，维生素Beer的标准曲线，第3节中可见的分光光度法，2，测量方法标准对比法预先配制与测量液浓度相似的标准溶液(其浓度以cs表示)，用As测量吸光度，测量测定液的吸光度Ax，测量液浓度cs可从下行中获得，第4节主要原因光学元件复色光引起对贝尔定律的偏差。两个茄子吸光系数的混合光对Beer定律的偏差，提高第四节测量灵敏度和准确度的方法，1，分光光度法误差测量仪误差光电池灵敏度差，光源不稳定，读数不准确。透射率误差T为浓度误差C:透射率20% 65%，A为0.20.7时浓度相对误差较小。测量误差与透射率的关系、提高第四节测量灵敏度和准确度的方法、3、选择适当的测量条件波长的选择、显色剂的使用溶液的酸度显色时间和温度共存离子的干涉和消除、第五节紫外线分光光度法简介、1、751-G型分光光度计紫外线分光光度法(20380nm)751-G分光光度计上可见分光光度法紫外线是玻璃，因此紫外线分光光度计的棱镜、透镜、氢灯、光电池、吸水纸等都要做成石英。第5