FCM在肿瘤学研究中的应用.ppt

1、FCM在肿瘤学研究中的应用，Medline Year，出版物计数流式细胞术”，0，1000，2000，3000，4000，5000，1960，1965，1970，1980，1985，1990，1995和2000。自20世纪80年代中期以来，流式细胞术在研究中的应用范围不断扩大，流式细胞术分析实体瘤DNA倍性，流式细胞术分析肿瘤病理学，流式细胞术分析肿瘤分子生物标志物，流式细胞术分析细胞增殖和凋亡，流式细胞术分析实体瘤DNA倍性，理论基础，一组在G0期不参与增殖周期的细胞是静止细胞，它们的细胞DNA含量是一个相对恒定的2C值。(1)细胞周期，流式细胞仪分析实体瘤DNA倍体，理论基础，G1期细胞具

2、有增殖活性，G1期参与细胞周期的一组细胞具有与G0期细胞相同的DNA值，两者均为二倍体DNA含量。(1)细胞周期：根据流式细胞仪对实体瘤DNA倍性的分析，S期DNA含量值逐渐增加，从2C增加到4C，直至DNA加倍结束。(1)细胞周期，在G2/M期分裂为两个子细胞之前，G2和M期细胞的DNA含量为常数4C，即四倍体细胞群。流式细胞术分析实体瘤的DNA倍性，理论基础，(2)荧光染料与细胞DNA的关系，荧光染料能与细胞DNA特异性结合并有一定的量效关系。1脱氧核糖核酸的含量与荧光染料的结合成正比。2)荧光强度与荧光分子被脱氧核糖核酸吸收成正比。流式细胞术分析实体瘤的DNA倍性，理论基础，(2)荧光染

3、料与细胞DNA的关系，荧光脉冲与通道值成正比的分子式图。因此，当流式细胞仪定量分析细胞群时，双脱氧核糖核酸含量分布的公式图可分为三部分，即G0/G1、S和G2/M.G0/G1和G2/M细胞的峰值分布正常。s相可以认为是一个加宽的正态分布。固体肿瘤DNA倍性的流式细胞术分析、G1、S期、G2、M、G1、1、21、DNA含量、细胞周期、G0/1、G2/M、S、流式细胞术分析固体肿瘤DNA倍性1流式细胞术定量分析细胞群，其DNA含量值为实验样品细胞G0/1峰的平均通道值，其相对DNA含量用DNA指数：DI=-。计算DNA含量的方法：2正常二倍体细胞峰，其在G0/G1期的DNA含量为2C，DI值为1.

4、0，G2/M期为4C，DI值为2.0，固体肿瘤DNA倍性的流式细胞术分析，以及DNA含量计算方法，例如，如果未知DNA含量的细胞群的G0/G1期细胞峰的平均通道值为60，则正常二倍体标准细胞G0/，如果未知DNA含量的细胞群体的G0/Gl峰的平均通道值为90个通道，DI=1.50，则实体瘤DNA倍性的FCM分析、DNA倍性的判断标准以及DNA倍性的判断是根据测得的细胞群体DNA含量分布公式的G0/G1峰的相对DNA含量值，即DNA指数值来确定的。理论上，二倍体的DI值应为1.0。四倍体的DI值应为2.0，实体瘤DNA倍体的FCM分析，二倍体参考标准细胞的G0/G1期细胞的DNA含量设为2C值，

5、DI=1.0，基于标准二倍体细胞的CV值为5%，判定标准为：DNA二倍体2C 2C CV值，DNA非整倍体2C 2C 2C CV值，实体瘤DNA倍体的FCM分析，判定DNA倍体的标准，即DI1.00.1(0.91.10)为二倍体，dim当计算脱氧核糖核酸非整倍体时，非整倍体被归类为异倍体。自流式细胞术被引入肿瘤研究以来，固体肿瘤中DNA倍性的流式细胞术分析和流式细胞术DNA倍性的公式类型已被用于各种类型的新鲜肿瘤组织和石蜡包埋肿瘤组织中DNA倍性的定量分析，为研究肿瘤DNA含量的分布提供了非常直观的参考信息。实体瘤的染色体倍性分析、染色体倍性的类型以及常见的染色体倍性类型大多与单个DNA有关，

6、表明肿瘤的发生大多是通过单细胞克隆发生的。我们对3050例恶性肿瘤的DNA倍性分析表明，80-90%的DNA倍性是单一的，具有两种或两种以上关系的DNA倍性是罕见的。实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析，实体瘤DNA倍性流式细胞仪分析， 实体瘤DNA倍体的流式细胞仪分析和DNA含量检测结果报告至少应包含以下信息： (1)DNA倍体，包括所有群体的DI(2)主G1峰的变异系数(3) S相比(4)必要的简单评价：如

7、细胞数量不足、片段过多、变异系数过高等。 摘要：流式细胞术在实体瘤中的应用，流式细胞术在泌尿系统肿瘤、膀胱癌、肾细胞癌、前列腺癌中的应用，流式细胞术在实体瘤中的应用，流式细胞术在泌尿系统肿瘤中的应用， 膀胱癌流式细胞术和膀胱癌的诊断流式细胞术在膀胱癌术后随访中的作用流式细胞术在判断膀胱癌恶性程度中的作用流式细胞术在预测膀胱癌复发和预后中的作用流式细胞术在指导膀胱癌治疗中的作用流式细胞术对实体瘤DNA倍性的分析流式细胞术在泌尿系统肿瘤中的应用流式细胞术DNA倍性检测膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤癌细胞分裂和增殖的能力极其活跃细胞的DNA含量有不同程度的增加实体瘤DNA倍体的流式细胞术分析，流式

8、细胞术DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用，膀胱癌标本的来源，以及用膀胱镜或导尿管冲洗膀胱所获得的标本含有较多的细胞，这可以提供良好的流式细胞术检测标本，但受仪器检查的影响，特别是在随访期间，标本需要保留多次。患者往往难以接受，因此只有新鲜的尿样才是真正的无创检查方法。实体肿瘤DNA倍体的流式细胞仪分析、流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用、膀胱癌标本的来源以及尿液作为流式细胞仪检测在膀胱癌诊断中能否获得满意的结果仍存在争议。White等人报道，86名膀胱癌患者在尿液和膀胱冲洗液中进行了流式细胞仪检测。在94%的尿样和97%的膀胱冲洗液中获得了满意的图像。流式细胞术在实体肿瘤中的DN

9、A倍性分析，流式细胞术在泌尿系统肿瘤中DNA倍性检测的应用，膀胱癌标本的来源，普里切特等人也使用新鲜尿液和膀胱冲洗液标本。发现两者在图形显示和肿瘤检出率上无显著差异。流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤、膀胱癌标本来源中的应用本实验室对101例膀胱癌患者进行了流式细胞仪检测，其中78例取300-500毫升新鲜尿液，23例取膀胱镜冲洗液，结果肿瘤检出率分别为84.61%和86.95%。经统计学处理，两组间无显著性差异。流式细胞仪分析实体瘤的DNA倍性，流式细胞仪DNA倍性检测在泌尿系统肿瘤中的应用，以及膀胱癌标本的来源，因此我们认为新鲜尿液标本适用于流式细胞仪标本。对于细胞少、图形不理想的患者

10、，可采取冲洗液、流式细胞仪分析实体瘤DNA倍体、流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用、膀胱癌膀胱冲洗液的收集方法。通过膀胱镜或导尿管向膀胱内注入100-200毫升生理盐水，并泵入3-4次。收集的洗涤液应立即放入冰箱冷藏，储存时间不应超过24小时。如果标本中含有红细胞，可用蒸馏水低渗法去除，流式细胞仪分析实体瘤DNA倍体，流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用，膀胱癌膀胱冲洗液的收集方法，将收集的尿液或膀胱冲洗液离心后，用PBS缓冲液洗涤两次，用细尼龙网过滤除去标本中的杂质或细胞团，离心后弃去上清液，用70%乙醇固定， 储存在冰箱中长达6个月，流式细胞仪分析实体瘤中的DNA倍体

11、，流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用，流式细胞仪在膀胱癌诊断和膀胱癌术后随访中的作用，流式细胞仪在判断膀胱癌恶性程度中的作用，流式细胞仪在预测膀胱癌复发和预后中的作用，流式细胞仪分析实体瘤DNA倍体，流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用， 膀胱癌(用流式细胞仪诊断膀胱癌)，流式细胞仪DNA倍体分析在膀胱癌诊断中的标准，15%的非整倍体或接近二倍体的波浪形超倍体细胞与正常二倍体峰明显分离的G0/l波型变异系数为9%。 上述标准中的任何一项对流式细胞术肿瘤呈阳性。实体瘤染色体倍性流式细胞术分析及其在泌尿系统肿瘤中的应用。膀胱癌(通过流式细胞仪诊断膀胱癌)通过流式细胞仪DNA倍

12、体分析诊断膀胱癌的标准：可疑：无明显的非整倍体细胞群，超过10.15%的超二倍体细胞群，阴性：二倍体分布，10%的超二倍体细胞注：非整倍体波形包括非整倍体、多倍体和高四倍体。近倍性是指在1.111.15范围内的G0/1细胞的异常波形。流式细胞术对实体肿瘤DNA倍体的分析，流式细胞术DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用，膀胱癌(流式细胞术诊断膀胱癌)流式细胞术DNA倍体分析在膀胱癌诊断中的结果：流式细胞术对膀胱癌的诊断具有较高的敏感性和特异性，其阳性率与肿瘤的病理分级和浸润深度有关。流式细胞术分析实体瘤的染色体倍性，流式细胞术在泌尿系统肿瘤中的应用，膀胱癌(流式细胞术诊断膀胱癌)流式细胞术的染色

13、体倍性分析在膀胱癌诊断中的应用。浅表癌58例，其中24例(41.38%)为非整倍体，79.31%为流式细胞仪阳性，43例(T1-T4)为浸润性癌，其中37例(86.04%)流式细胞仪阳性率为95.34%。膀胱癌的流式细胞术分析(流式细胞术对膀胱癌的诊断)流式细胞术分析对膀胱癌的诊断结果：可见，低分期膀胱癌的流式细胞术非整倍体率较低，而高分期和流式细胞术肿瘤的检出率和非整倍体率明显增加。流式细胞术分析实体瘤DNA倍性及其在泌尿系统肿瘤、膀胱癌中的应用流式细胞术分析实体瘤DNA倍性的特点如下：1流式细胞术可以检测细胞核DNA含量异常增加的肿瘤细胞，而细胞形态无特征性改变；2变性肿瘤细胞因形态学改变

14、不能在尿细胞学中诊断，但其细胞核DNA分子未被降解和破坏，因此流式细胞仪仍能检测到。实体瘤DNA倍体的流式细胞术分析，流式细胞术DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用，膀胱癌(FCM诊断膀胱癌)流式细胞术DNA倍体分析的特点：3流式细胞术通过细胞DNA含量、细胞动力学等多种指标来判断肿瘤细胞，具有客观性强、灵敏度高的优点。流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤、膀胱癌(用流式细胞仪诊断膀胱癌)中的应用流式细胞仪DNA倍体分析的特点：4流式细胞仪和尿细胞学有一定比例的假阴性和假阳性病例，而流式细胞仪中的假阴性病例往往是由二倍体肿瘤引起的。对于假阳性病例，通常是由于严重的尿路炎症，但仍需要进行认真的

15、随访。实体瘤DNA倍体的流式细胞仪分析，流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤、膀胱癌(流式细胞仪诊断膀胱癌)中的应用，双参数分析：部分作者对膀胱癌单克隆抗体和肿瘤组织DNA进行双标记染色，进行流式细胞仪检测，根据DNA含量和肿瘤相关抗原的出现评价肿瘤的生物学特性。流式细胞仪分析实体瘤DNA倍体，流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤、膀胱癌(用流式细胞仪诊断膀胱癌)中的应用，由于单克隆抗体只与肿瘤细胞结合，具有很高的特异性，这种方法完全消除了标本中混合炎症细胞对检测结果的影响，从而可以检测到少量非整倍体细胞(用流式细胞仪DNA单染色法可以忽略)，肿瘤诊断率明显提高。摘要：流式细胞术分析实体瘤DNA倍体，流式细胞术DNA倍体检测在泌尿系统肿瘤中的应用，膀胱癌(流式细胞术诊断膀胱癌)流式细胞术DNA倍体分析的特点：尿细胞学与流式细胞术DNA倍体分析相结合可提高诊断率。摘要：流式细胞仪DNA倍体检测在泌尿系肿瘤中的应用，流式细胞仪在膀胱癌诊断和膀胱癌术后随访中的作用，流式细胞仪在判断膀胱癌恶性程度中的作用，流式