洁净区环境控制及微生物知识培训.ppt

1、洁净区环境控制和微生物知识训练zwx2013.10，制药生产洁净控制，主要有： )人员控制系统(2)公共工程控制系统(3)设备控制系统(4)材料控制系统(5)生产过程控制品质检测控制系统浮游粒子：洁净室内空气约0.1m到5m之间浮游的固体和液体粒子，用于空气清洁度的分级。 清洁度：以每单位容积空气中的某粒子数划分的清洁度。 静态测试：除净化室(区)的净化空调系统已处于正常运行状态，设有生产流程设备，无生产活动，且无试验员(不得超过2人)的情况外，应在测试记录和报告中进行测试的动态测试：净化室常见微生物存在环境，g球菌：人g芽孢杆菌：不准确清洁，空气g杆菌：水、不良卫生、耐药菌株酵母菌：食物、不

2、良卫生、空气霉木材、食物、细菌形态、球菌一般为1.0 um (如四链球菌、八联球菌、葡萄球菌)杆菌长13 um，宽0.30.5 um (如内毒素：革兰阴性菌死亡解体后静态测试显示一系列内毒素生物活性(耐热、可过滤、易吸附等)、黏质沙雷氏菌的菌落特征、沙门氏菌的菌落特征、绿脓菌的菌落特征、红酵母的菌落、清洁环境监测指标和方法、尘埃颗粒数微生物数静压差温的洁净空调系统已处于正常运行状态，除生产工艺设备已安装、无生产活动且无试验员(不得超过2人)的情况外，在试验记录和报告中应注明测试状态。 动态测试：指洁净室(区)的洁净空调系统已处于正常运行状态，生产设备以预约的工艺模式运行，规定数量的操作员现场操

3、作的状态。 确定重点，确定接近产品的位置；确定与产品接触的表面产品周围经常进行表面气流类型活动的位置，清洁环境监测指标和方法，测试状态：针对单向流，测试空气净化系统运行至少10分钟后进行。 关于非单向流系统，运转至少30分钟后进行，洁净环境监测指标及方法、尘埃粒子数测定：在生产前及每一定的生产周期对洁净后的洁净室进行尘埃粒子数的测定，评价并掌握洁净室的尘埃粒子的含量。 产品接触压缩空气和其他气体如氮气等进行监测，清洁区尘埃颗粒数标准，尘埃颗粒监测周期和取样量，清洁区微生物监测方法，微生物测定：有两种方法：沉降菌测定和浮游菌测定。 沉降菌的测定：采用根据自然沉降原理将空气中的生物性粒子收集到培养

4、基的平盘上，用平板培养皿中的菌落数判定洁净环境内的生物数，评价洁净室(区)的洁净度水平的沉降法。 清洁区微生物监测方法、空气微生物监测浮游菌和沉降菌哪一种更好？沉降菌测试是被动采样法，空气环境破坏小放置时间长，时区环境监测采样方法无法提供定量的数据空气浮游菌测试主动采样法微生物的选择性时间“点”的取样、沉降菌的监测方法、步骤：在皿底显示取样点编号、取样日期和时间，在取样点打开皿盖测试结束后，注意培养皿，从洁净区出来。在30-35的孵化箱中培养了3天。沉降菌监测方法、沉降菌监测注意事项：配置位置和高度(引入抑制物质)采样本身引入的污染(外观清洁、培养基质量、配置位置和人员)培养基脱水问题(新鲜培

5、养基和配置时间)、沉降菌(CFU )标准、浮游菌监测方法专用培养空气中浮游的生物性粒子采用了修正数浓度法，通过使其在适当生长条件下经过数小时繁殖、修正，判断清洁环境内每单位体积的空气中的生微生物数量，评价清洁室(区)的清洁度水平。 浮游菌的监测方法、监测方法空气浮游菌采样位置和高度培养基的脱水问题采样操作对生产环境污染粒子捕获率变化Feller检测的重要性、浮游菌的监测方法、在步骤： (同沉降菌) 30-35的培养箱培养3天。 浮游菌标准、洁净室环境控制、空气洁净度要求为c级、d级时，采用非单向流，通风次数分别大于25次/小时和15次/小时的监测方法表面微生物监测与人卫生监测接触皿采样，平坦的

6、规律性表面采样方法是定量检测方法表面微生物、清洁区表面微生物标准、洁净室环境控制、差压的控制：清洁区与非清洁区之间，不同清洁区间的差压必须在10帕斯卡以上。 必要时，相同清洁度等级的不同功能区域(操作间)之间也应保持适当的差压梯度。 温湿度的控制：没有特别要求的情况下，生产中的洁净室内温度要严格控制在1826，相对湿度要严格控制在45e%。洁净室环境控制、差压测量：在不同水平的相邻两个房间安装差压校正，进行每日记录温湿度测量：在洁净室内放置温湿度校正，进行每日记录。 风量的测量：利用风速校正测量送风口的风速，由风速和送风口的截面积计算出风量。 可以用风量换算房间的换气次数。 洁净室环境评价指标

7、还包括照度噪声的测试。 清洁室环境控制，微生物控制：因为细菌附着在浮游粒子上，在微粒子被过滤的同时，细菌也被很好地过滤。 1、空气净化系统运行良好，控制洁净室环境中的微生物。 2 .采取有效的环境消毒措施。 净化环境的控制、空气过滤器：净化度的控制依赖于良好的空气净化设施，一般采用三段过滤。 初效过滤器新风过滤中效过滤器使用前的高效过滤器的主要对象是1.0m的尘埃对细菌的透过率为0.0001%，对病毒的透过率为0.0036%，因此通过高效过滤器的空气可视为无菌。 洁净室环境控制、日常消毒：每日生产结束后，用75%的乙醇、1.5焦耳消液等消毒剂将设备、桌面、门窗、墙壁等进行清洁。 与消毒剂交换周

8、期：酚酸、75乙醇、新凝胶灭(0.15 )。 75乙醇和钕灭(0.15 )，每隔1个月交替使用。 记录清洁区环境控制和评价原则、系统环境监测方案监测项目的采样位置和规划现场监测方法和结果，培训微生物鉴别偏差调查和纠正措施人员，控制清洁环境，减少清洁区作业人员对环境的影响：在药品生产过程中，人为污染最大因此，控制清洁区人员的多少、操作幅度、工作服的样式、质量及穿着等对微粒和细菌的含量有显着影响。清洁环境的控制，保持清洁区的环境，是我们进入清洁区的每个人都必须坚持的，清洁工作服的穿着，清洗和灭菌循环要严格控制工作人员的数量，严格控制约束者的行为，保证清洁区的净化水平。 养成良好的卫生习惯。 不仅包

9、括环境卫生，还包括个人卫生和技术卫生。进入清洁区人员的要求、新员工、常驻人员、疾病、健康检查、出港、出港治疗或岗位限定、每年一次、合格、清洁区内的个人卫生管理规章、包装区域内的个人卫生管理规章、工作服清洗消毒管理规章、 药品生产车间、工程、车间都应按照生产和空气清洁度水平要求制定清洁规程。 内容包括清洁方法、清洁程序、清洁周期、使用的清洁剂和消毒剂、清洁工具的清洁方法和保管场所。 清洁区卫生管理规程除了满足一般生产区的要求外，每天要全面擦拭试验车间的墙面、天花板、照明、排风口及其他附属装置，定期对室内消毒，按照SOP的规定对环境检查尘埃颗粒、沉降菌、浮游菌数，并有相关记录。 清洁区卫生管理规程

10、，为有效防止和避免设备功能不正常或设备容器不清洁、不保养对药品生产和质量的污染，所有设备建立书面设备保养和清洁规程，使与药品直接接触的设备表面光滑、平坦、易清洗消毒、清洁、清洁区卫生管理规程、人是药品生产的最大污染源之一，进出清洁区的人必须严格按照工艺要求的清洁工艺进出。 传染病患者、健康的传染病病毒携带者、体表有伤者、皮肤病患者及药物过敏者不得从事直接接触药品的生产操作，呼吸道感染、肠炎、有皮肤病者不得进入清洁。 进入清洁区卫生管理规程、清洁区的人不得化妆，不得涂手脚指甲油，不得接种假睫毛，头发不得留肩。 做清洁区的工作人员请不要佩戴装饰品和手表。 不得将与手机、钥匙及生产无关的物品带入清洁

11、区。 d类清洁区车间人员不得穿清洁衣服到一般生产区。清洁区卫生管理规程、清洁区人数应在要求控制(标志)、操作和行动等方面自我约束。 本车间以外人员应进入清洁区(包括维护、辅助人员)，定期进行卫生和微生物学基础知识、清洁工作等方面的培训和评价。 本公司以外人员进入清洁区，必须按照规定的程序进出，严格执行工作，保持登记记录。清洁区卫生管理规程、工作服应制定清洗循环。 工作服包括服装和包头、脸、胳膊等的保护用品。 不同空气净化程度使用的工作服应分别清洗、整理，必要时消毒或灭菌。 清洗、灭菌工作服时，请勿带入附加的颗粒物质和纤维毛。 清洁工作服的质量应光滑，不产生静电，纤维和颗粒物质不脱落。 无菌工作

12、服应复盖所有头发、胡须及脚部，以阻止人体脱落物。清洁区卫生管理规程、d类清洁区工作服每两天清洗一次，a级、b级和c级洁净区工作服每级清洗灭菌，超过48小时再灭菌的a级、b级和万级清洁区工作服只能使用一次，下次使用要重新灭菌。洁净室清洗三原则、洁净室清洗三原则、原则一：经灭菌的精制水或注射用水和新鲜过滤的洗涤剂：所有过滤的洗涤剂应放入清洁灭菌的容器中，准确粘贴预先过滤的洗涤剂在洁净室中保管洁净室洁净三原则，原则二：使用洁净工具和材料防止污染物进入洁净室：不锈钢表面好，塑料表面容易受损，尘粒和微生物容易滞留的带木纹的清扫工具，由于尘粒容易脱落，不要使用因为有微生物滞留，请不要使用布和拉布的布适合洁

13、净室，用难以脱落的纤维材料制成的抹布附着尘埃和细菌，请只使用一次洁净室使用的吸尘器请安装HEPA过滤器，定期进行测试。洁净室清洗三原则，原则三：清洗过程中不得增加洁净室污染物：正确的清洗顺序；正确的行为。 清洁区的清洁频率取决于清洁室的尘粒和微生物监测结果(空气、表面)满足GMP要求的分注区域在每批分注后，必须立即清洁的所有清洁区域的地面、桌面、设备的表面每天至少清洁一次，是常用灭菌非最终灭菌法：过滤灭菌法、无菌生产工艺。 常用的灭菌方法，一、湿热灭菌法：本法系统是物质在灭菌器内利用高压蒸汽或其他热力学灭菌手段灭菌，灭菌能力非常强，是热力学灭菌中最有效用途最广泛的方法。 药品、药品溶液、玻璃器

14、具、培养基、无菌衣、调味汁以及其他不会对高温和湿热产生变化或损伤的物质，可以用本法灭菌。 湿热灭菌法使用的生物指示剂：嗜热芽孢杆菌、被孢霉菌、培养：56 /48h .灭菌效果验证应进行满载热分布/热透过、细菌挑战性、空载试验、热透过F0值。常用的灭菌方法，二、干热灭菌法：本法系指物质在干燥空气中加热杀菌的方法。 160170 2小时以上、170180 1小时以上、250 45分钟以上(热源除外) 。 干热灭菌法使用的生物指示剂：枯草芽孢杆菌孢子三、灭菌过滤法：本法系利用细菌不能通过致密有孔滤材的原理，去除对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌，达到无菌要求。 过滤装置通常有过滤柱、过滤膜等。

15、用于过滤灭菌法的生物指示剂：黏质沙雷氏菌、缺陷假单孢菌、常用灭菌方法，四、放射线灭菌法：本法系通过将最终产品的容器和包装暴露于适当的放射线源(通常为Co60 )发射的放射线或适当的电子加速器发射的放射线中，达到灭菌的目的。 放射线灭菌法使用的生物指示剂： Bacillus孢子五、环氧乙烷灭菌法：本法系将产品暴露在环氧乙烷填充的环境中，以达到灭菌的目的。 本方法适用于煤气中的稳定物质。 用于环氧乙烷灭菌法的生物指示剂有枯草芽孢杆菌孢子、常用菌种保存方法、1、传代培养保存法有斜面培养、穿刺培养、俞肉培养等(后者为了保存厌氧细菌)，培养后在冰箱内保存46种。 2 .流动残奥片遮荫法是传代培养的一种变

16、态方法，能够适当延长保存时间，是斜面培养物和穿刺培养物上遮荫灭菌的流动残奥片，既能防止培养基水分蒸发导致菌种死亡，又能阻止氧气进入，减弱代谢作用。 3、载体保存法是将微生物吸附在适当的载体如土壤、砂、硅胶、滤纸上，然后进行干燥的保存法，如砂土保存法和滤纸保存法的应用相当广泛。 4 .冷冻保存法可分为低温冰箱(2030、5080 )、干冰醇快速冻结(约70 )、液氮(196 )等保存法。 5 .冷冻干燥保存法将微生物在超低温(70左右)下迅速冷冻后，在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。各种菌种的保存条件和时间、菌种的传代、方法1 :菌斜面菌斜面(保存)方法2 :菌斜面营养肉汤分离平板菌斜面常用分离平板：大肠菌EMB琼脂平板； 绿脓菌溴化十六烷三甲基铵琼脂培养基； 金黄色葡萄球菌甘露醇氯化钠琼脂培养基； 沙门氏菌SS琼脂平板。 对照菌液的制备、革兰氏染