0.2%苯扎溴铵溶液消毒效果验证

1、430 食品与药品 Food and Drug 2010年第12卷第11期 3.1 色谱条件的优化 通过对不同色谱柱、载气流量和柱温的考察，结 合系统适用性的要求，最终确定最佳的色谱条件，使 对照品中主成分、内标及溶剂的分离度达到要求。 3.2 溶剂和内标物的选择 乙酸乙酯对冰片具有较好的溶解性，并且样品中 其他干扰成分的溶出较少，故选择其作为溶剂。水杨 酸甲酯在该色谱条件下色谱峰稳定，峰形好，保留时 间适中，不干扰对照品色谱峰，故选其作为内标。 我们首次建立了检测气相色谱法伤科接骨片中冰 片的含量，方法验证证明该方法准确、灵敏度高，在 考察的浓度范围内线性关系良好（r = 0.999），回收

2、 率符合规定，可作为伤科接骨片中冰片含量的质量控 制方法。 参考文献 1 魏文鹏. 伤科接骨片的薄层色谱鉴别J. 广东药学，2000，10 （3）：17-18. 2 黄卫东，吕武清. 冰片的研究进展J. 中国药业，2008，17 （4）：64-66. 3 吴烈钧. 气相色谱检测方法M. 北京：化学工业出版社，2001： 191-192. 0.2 %苯扎溴铵溶液消毒效果验证 曲建全，曲静，宋晓红，李美颜 （山东福瑞达生物医药有限公司，山东 济南 250101） 摘 要：目的 验证0.2 %苯扎溴铵溶液的消毒效果。方法 定量悬浮试验，用金黄色葡糖球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌3 次验证0.2 %苯扎

3、溴铵溶液的消毒效果。结果 3次试验，3种试验菌的杀菌率均大于99.9 %。结论 0.2 %苯扎溴铵溶液可以 作为细菌和真菌的消毒剂使用。 关键词：苯扎溴铵；消毒；杀菌率 中图分类号：R187+.1 文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2010)11-0430-03 收稿日期：2010-06-28 作者简介：曲建全（1974-），男，山东招远人，工程师，主要从事生化药品方面的工作 E-mail: Disinfectant Efficacy Validation of 0.2% Bromogeramine Solution QU Jian-quan, QU Jing, SONG Xiao

4、-hong, LI Mei-yan (Shandong Freda Biopharm Co., Ltd., Jinan 250101, China) Abstract: Objective To validate the disinfectant efficacy of 0.2% bromogeramine solution. Methods The quantitative suspension test was carried out to validate the disinfectant efficacy of 0.2% bromogeramine solution for Staph

5、ylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans, respectively. Results The three tests showed the sterilization rates of 0.2% bromogeramine solution for Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans were all greater than 99.9%. Conclusion The 0.2% bromogeramine solution can be used

6、for the disinfection of bacteria and fungi. Key Words: bromogeramine; disinfection; sterilization rate 苯扎溴铵（新洁尔灭）是一种常用的季铵盐类消 毒剂，浓度较低即有抑菌作用，浓度较高时可杀灭多 种细菌繁殖体和部分病毒，但不能杀灭细菌芽孢，属 低效消毒剂。此类消毒剂性质稳定，易储存，毒性腐 蚀性较小，刺激性小，被广泛应用。本文验证了0.2 % 苯扎溴铵溶液的消毒效果。 1 材料与仪器 1.1 仪器设备 XW-80A电动混合器（上海精科）；CW-CJ-2FD 净化工作台（苏州安泰）；LRH-15

7、0B恒温培养箱（广 食品与药品 Food and Drug 2010年第12卷第11期 431 东医疗器械）；YX-400B不锈钢双层立式蒸汽压力消 毒器（上海三申）。 1.2 用具 培养皿，刻度吸管（1.0，5.0 mL），接种针，试 管，试管架，秒表。 1.3 培养基 营养琼脂培养基（100311，北京三药）；沙氏葡 萄糖琼脂培养基（20090320，青岛海博）。 1.4 试剂 稀释液：磷酸盐缓冲液（PBS）0.03 mol/L，pH 7.2，无水磷酸氢二钠2.83 g、磷酸二氢钾1.36 g、蒸馏 水1 000 mL配制1；消毒剂：0.2 %苯扎溴铵溶液，用 前经薄膜过滤除菌；中和剂：含

8、1 %卵磷脂、0.3 %聚 山梨酯80的磷酸盐缓冲液。除消毒剂外，余者均经 121 ，20 min高压灭菌后使用2。 1.5 试验菌种 金黄色葡萄球菌 CMCC(B) 26 003（细菌繁殖体 中化脓性球菌的代表）。 大肠埃希菌 CC(B) 44 102（细菌繁殖体中肠道菌 的代表）。 白色念珠菌 CC(F) 98 001（致病性真菌的代 表）。 1.6 菌液制备 取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌24 h培养物， 白色念珠菌48 h1 培养物，用上述无菌磷酸盐缓冲液 （PBS）制成菌悬液，浓度为（15）108 cfu/mL。 2 中和剂鉴定试验1 2.1 目的 观察中和剂对测试消毒剂是否有良好的中

9、和作 用，对试验菌及其恢复期培养是否有害或有不良影响。 2.2 试验菌 细菌繁殖体试验，可从大肠埃希菌或金黄色葡萄 球菌中任选其一试验。本试验选择金黄色葡萄球菌和 白色念珠菌进行中和剂鉴定试验。 2.3 试验分组 2.3.1 第1组 消毒剂+菌悬液培养，观察消毒剂对 试验菌有无杀灭或抑制能力。 2.3.2 第2组 （消毒剂+菌悬液）+中和剂培养，观 察残留消毒剂中和后试验菌能否恢复生长。 2.3.3 第3组 中和剂+菌悬液培养，观察中和剂是 否抑菌。 2.3.4 第4组 （消毒剂+中和剂）+菌悬液培养，观 察中和产物或未被完全中和的残留消毒剂对试验菌生 长有无抑制作用。 2.3.5 第5组 P

10、BS+菌悬液培养，作为菌数对照。 2.3.6 第6组 PBS+中和剂+培养基培养，作为阴性 对照。取1 mL分别置入2个平皿，然后倒入相应的培养 基培养，不得有菌生长。 2.3.7 金黄色葡萄球菌用营养琼脂培养基，37 培养 48 h；白色念珠菌用沙氏葡萄糖琼脂培养基，25 培 养72 h。按稀释倍数计算回收菌数（cfu/mL）。 2.4 评价 试验结果如符合下列全部条件，所测中和剂可判 为合格。 （1）第1组无试验菌，或仅有少数试验菌生长； （2）第2组试验菌菌落生长较第1组多，但较第35组 少；（3） 第35组试验菌生长量相似，其组间菌落 数误差率不超过15 %，计算第3、4、5组间菌落数

11、误差 率，见下式： 杀菌率= 100 % 对照组中和剂管平均活菌数试验组中和剂管平均活 对照组中和剂管平均活菌数 组间菌落数误差率= 100 %（4）第6组无菌生 长；（5）连续3次试验均评价合格。 3 0.2 %苯扎溴铵溶液消毒效果验证（定量悬浮试验） 方法2 3.1 试管按需要量分组 试验组分3组由左向右逐管依次为消毒剂、中和 剂、10-1、10-2，对照组分3组并由左向右逐管依次为稀 释液、中和剂、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，各管含 4.5 mL相应试剂，标明10-1、10-2等试管含有稀释液 4.5 mL，即混合液10倍系列稀释。 3.2 菌液置入试管的步骤 分别

12、吸取各试验菌液0.5 mL，置入消毒剂试管， 对照组置入稀释液试管，迅速混匀并立即计时。待试 验菌液与消毒剂相互作用至预定时间30 min，吸取0.5 mL 混合液，置入中和剂试管，迅速混匀并计时，中和作 用10 min后，吸取0.5 mL样液置入10-1的试管，混匀后 吸取0.5 mL样液置10-2试管（对照组以此类推，至最后 1管）。 3.3 活菌培养计数测定存活菌数 432 食品与药品 Food and Drug 2010年第12卷第11期 试验组取中和剂管、10-1、10-2管测定存活菌数， 对照组取10-3、10-4、10-5管测定存活菌数，每管样液接 种2个平皿，每平皿接种样液1

13、mL。测定金黄色葡萄球 菌、大肠埃希菌用营养琼脂培养基，白色念珠菌用沙 氏葡萄糖琼脂培养基。 3.4 杀菌率的计算 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的试验平皿置入37 培养箱培养48 h，白色念珠菌平皿置入25 培养箱培 养72 h，计数最终结果，计算杀菌率。 3.5 验证试验重复3次，计算各组活菌数与杀菌率。 4 结果与讨论 4.1 结果 4.1.1 3次中和剂鉴定试验每种试验菌每组的回收菌落 数及误差率 见表1。 4.1.2 3次试验每种试验菌的培养计数结果与杀菌率 见 表2。 4.2 讨论 4.2.1 由表1可见，两种试验菌每次试验结果3、4、5组 菌数均相似，误差率均低于15 %；第1组均无

14、菌生长； 第2组菌数明显少于3、4、5组；第6组无菌生长。所 以，此中和剂可消除消毒剂对试验菌的作用，中和产 物对试验菌无毒害，可判定此中和剂合格。 表1 中和剂鉴定试验结果 菌 名次 数 各组回收菌落数/cfumL-1 3、4、5组间 菌落数误差率/% 1 2 3 4 5 6 金黄色 葡萄球菌 1 0 490 1.26106 1.23106 1.22106 0 1.34 2 0 560 1.28106 1.24106 1.26106 0 1.06 3 0 550 1.28106 1.25106 1.23106 0 1.33 白色念珠菌 1 0 970 1.15106 1.12106 1.11

15、106 0 1.47 2 0 980 1.14106 1.12106 1.13106 0 0.60 3 0 950 1.15106 1.13106 1.12106 0 0.88 表2 试验结果 次 数菌种 对照组菌落 数/cfumL-1 试验组菌落 数/cfumL-1 杀菌 率/% 1 11.2310648099.96 21.3710674099.95 31.1110697099.91 2 11.2610658099.95 21.3310673099.94 31.1310696099.92 3 11.2710655099.96 21.4110677099.95 31.12106 100099.

16、91 菌种：1-金黄色葡萄球菌；2-大肠埃希菌；3-白色念珠菌 4.2.2 由表2可见，经过3次消毒验证试验，0.2 %苯扎 溴铵溶液对每种试验菌的杀菌率均大于99.9 %，其消 毒效力可使每种试验菌的活细胞下降数量均大于3个对 数单位，可用于细菌和真菌消毒。 4.2.3 由于卵磷脂能中和季铵盐，卵磷脂加聚山梨酯80 是优良的乳化剂，利用乳化和增溶原理包裹消毒剂， 降低水相中消毒剂的浓度，达到屏蔽消毒剂作用的目 的。 参考文献 1 中华人民共和国卫生部. 消毒技术规范 第一分册 实验技术规范 S. 第三版. 1999：17，123. 2 汪穗福. 微生物检测验证技术M. 北京：中国医药科技出版社. 2005：66. 0.2%苯扎溴铵溶