玉米组培技术.ppt

1、玉米组织培养，主要内容：植物组织培养的意义，玉米组织培养的目的，研究进展，目前玉米组织培养的主要方法，植物组织培养的意义，植物组织培养可以产生大量的优良无性系，细胞融合可以打破种属之间的界限，单倍体，三倍体，其他多倍体和非整倍体可以通过克服远缘杂交的不亲和障碍获得。植物细胞的组织培养已成为细胞水平分析和研究的理想材料。玉米组织培养的目的是使外植体能够高频率诱导愈伤组织，建立高效的体细胞再生体系，为玉米遗传转化和细胞工程研究创造有利条件。1949年，拉鲁首次以甜玉米胚乳为外植体诱导玉米愈伤组织，但未获得再生植株。1975年，Green和Phillips首次以A188的未成熟胚为外植体诱导二倍体愈

2、伤组织并再生出第一株克隆植株。玉米组织培养的研究现状已经能够从各种外植体诱导愈伤组织和再生植株。例如幼胚、花药、幼穗等。其中幼胚是目前最容易诱导和最常用的外植体。玉米组织培养的主要方法(简介)，1 .玉米花粉和花药的组织培养一般可以获得单倍体植株，这有利于促进玉米遗传育种的有效进展。2.离体培养的玉米根尖和茎尖分生组织具有良好的分化性能。玉米茎尖和根尖的离体培养有利于促进整个玉米植株的生长，材料的选择不受季节的限制。3.玉米幼胚的组织培养玉米幼胚为二倍体，具有很强的分生能力。未成熟胚是最容易诱导的外植体，也是目前最常用的外植体，但获得未成熟胚的时间受到季节的严格限制。玉米幼胚组织培养的全过程。

3、接种室消毒准备，诱导培养基灭菌准备(N6肌醇L-脯氨酸1.38克/升蔗糖30克/升琼脂7克/升水解酪蛋白0.5克/升2，4-D2mg/毫升)，2。未成熟胚的外部消毒和选择，用75%酒精擦拭玉米的外叶至干净的工作台，用75%酒精擦拭玉米的外叶，剥去一层并摩擦一层，直到用小刀去除三分之一的玉米种子，将未成熟胚接种在制备的诱导培养基(暗培养)上。3。继代培养制备用继代培养基(N6水解酪蛋白0.1g/L L-脯氨酸0.69g/L甘露醇20g/L蔗糖30g/L琼脂6.5g/L 2，4-D1mg/ml)诱导2次，待产生透明、黄色、坚硬的愈伤组织后，可用于转化(一般继代培养3次)；4.转化浸染培养(22-2

4、5，暗培养3天)、恢复培养(暗培养3天)、筛选培养、分化培养、生根培养和壮苗；5.移栽和管理移栽前，移栽基质应消毒。移栽前，可将培养物移至自然光下2-3天不开放，然后再开放培养1-2天，以适应未来的自然湿度条件。移栽玉米组培苗时，应先清洗根培养基，以免被细菌或真菌污染，影响幼苗生长。移栽，玉米茎尖组织培养的全过程。在接种室中制备工作灭菌制备培养基(MS蔗糖30g/L琼脂6.5g/L)，1。给玉米种子消毒。将200，300粒玉米种子放入500毫升三角瓶中，用75%酒精清洗8分钟，用0.1%氯化汞清洗5分钟，用无菌水清洗2次，静置8小时，用0.1%氯化汞清洗8分钟，用无菌水清洗5次，放入盘盒中避光3天。2.培养三天后，接种并取出种子，将其接种到MS固体培养基中，根向下延伸到培养基中，芽向上，那些发芽不良的，接种到MS固体培养基中的芽放回28，并在黑暗中培养3-4天。3。玉