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文档简介

1、.常用溶剂的配制方法1.磷酸缓冲液:0.15M,pH=7.4磷酸缓冲液:KH2PO4:2.041g+100ml水 K2HPO43H2O:10.3g+300mL水两液混合即成400mL,0.15M,pH=7.4的磷酸缓冲液0.2mol/L 不同pH的磷酸缓冲液:先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液,然后按下表配制:pHKH2PO4(mL)K2HPO43H2O(mL)pHKH2PO4(mL)K2HPO43H2O(mL)5.793.56.56.945.055.05.892.58.07.039.061.05.990.010.07.133.067.06.087.7

2、12.37.228.072.06.185.015.07.323.077.06.281.018.57.419.081.06.377.522.57.516.084.06.473.526.57.613.087.06.568.531.57.710.590.06.662.537.57.88.591.56.756.543.57.97.093.06.851.049.08.05.394.72.硼酸缓冲液0.15M,pH=8.2硼酸缓冲液:四硼酸钠溶液:2g+35 mL水 硼酸溶液:3.246g硼酸+350 mL水两液混合即成700 mL,0.15M,pH=8.2的硼酸缓冲液0.2 mol/L(硼酸根),不同p

3、H的硼酸缓冲液:先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液,然后按下表配制:pH四硼酸钠mL硼酸mLpH四硼酸钠mL硼酸mL7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.03.甘氨酸-盐酸缓冲液:0.2 mol/L0.2 mol/L甘氨酸溶液(15.01g/L)pH0.2 mol/L甘氨酸mL0.2 mol/L盐酸mLpH0.2 mol/L甘氨酸mL0.2 mol/L盐酸mL2.05044.43.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.450

4、6.42.85016.83.6505.04.柠檬酸缓冲液:0.1mol/LC6H8O7H2O:0.1mol/L 溶液为21.01g/LNa3C6H5O72H2O:0.1mol/L溶液为29.41g/LpH0.1mol/L柠檬酸mL0.1mol/L柠檬酸钠mLpH0.1mol/L柠檬酸mL0.1mol/L柠檬酸钠mL3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.

5、411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.44.89.210.80.1M pH=4柠檬酸缓冲液222mLV1:柠檬酸 V2:柠檬酸钠V1=131mL0.1*0.131*210.14=2.75g V2=91mL0.1*0.091*294.10=2.68g0.1M pH=2.3柠檬酸缓冲液412mLV1:柠檬酸 V2:柠檬酸钠V1=400mL0.1*0.4*210.14=8.40g V2=12mL0.1*0.012*294.10=0.353g1M pH=10碳酸缓冲液211mLV1:碳酸钠 V2:碳酸氢钠V1=150mL1*0.15*106=15.9g V2=61m

6、L1*0.061*84=5.12g原来1M pH=7.4磷酸缓冲液203mLV1:K2HPO43H2O V2:KH2PO4V1=150mL0.15*1*228.22=34.23g V2=53mL0.053*1*136.08=7.21g现在1M pH=7.4磷酸缓冲液134mLV1:K2HPO43H2O V2:KH2PO4V1=100mL0.1*1*228.22=22.82g V2=34mL0.034*1*136.09=4.3g0.1M pH=8磷酸缓冲液20.15mLV1:K2HPO43H2O V2:KH2PO4V1=20mL0.1*0.02*228.22=0.46g V2=0.15mL0.1

7、*0.15*10-3*136.08=0.002g0.5M pH=8Tris-HCl缓冲液165mLV1:Tris V2:HClV1=105mL 0.5*0.105*12.1.=6.36g V2=60mL(0.5M HCl)0.2M pH=4.3柠檬酸缓冲液372mLV1:柠檬酸V2:柠檬酸钠V1=300mL0.3*0.2*210.14=12.61g V2=72mL0.2*0.072*294.10=4.24g0.2M pH=4柠檬酸缓冲液340mL V1:柠檬酸V2:柠檬酸钠V1=200mL0.1*0.2*210.14=8.41g V2=140mL0.2*0.14*294.10=8.23g5.T

8、ris-HCl缓冲液:0.1mol/L100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀,可得0.1mol/L,不同pH的缓冲液。pH0.1mol/L盐酸(mL)pH0.1mol/L盐酸(mL)pH0.1mol/L盐酸(mL)7.289.47.869.08.434.47.386.87.964.08.529.47.484.08.058.48.624.87.580.68.152.48.720.67.677.08.245.88.817.07.773.28.339.88.914.0200mL 0.1M Tris(2.42g)加入0.1M HCl 24mLpH=

9、9,0.1M Tris-HCl buffer6.醋酸缓冲液:0.2mol/L0.2mol/L醋酸钠:27.22g三水醋酸钠(无水的为16.4g)+1L水0.2mol/L醋酸:11.55mL冰醋酸+1L水pH醋酸钠mL醋酸mLpH醋酸钠mL醋酸mL3.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.607.碳酸缓冲液:0.1 mol/L(Ca2+、Mg2+存在时不得使用)pH0.1 mol/

10、L碳酸钠(mL)0.1 mol/L碳酸氢钾(mL)20379.168.77199.409.12289.519.40379.789.50469.909.725510.149.906410.2810.087310.5310.288210.8310.57910.1 mol/L MES缓冲液:1.921gMES+100mL水,pH=4.098.电泳溶液:电泳缓冲液:3gTris碱、14.4g甘氨酸和1gSDS溶于水中,调pH至8.3左右,加水定容至1L。丙烯酰胺溶液(49.5%T,3%C):48g丙烯酰胺和1.5gbis溶于100 mL重蒸水中。分离胶缓冲液(4):75ml2 mol/L Tris-H

11、Cl缓冲液(pH=8.8)+4ml 0.1 mol/L SDS+46mL重蒸水。浓缩胶缓冲液(4):50ml 2mol/L Tris-HCl缓冲液(pH6.8)+4ml 0.1mol/L SDS+46mL重蒸水2%茚三酮溶液:50mL 95%乙醇+1g茚三酮(避光,4保存)2%乙醇胺溶液:2mL乙醇胺+98mL硼酸缓冲液(0.15M,pH=8.2),调pH=8.22M醋酸溶液:114.4mL冰醋酸+去离子水定容至1L0.5mol/LEDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L考马斯亮蓝溶液:考马斯亮蓝G-250 100m

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