高中生物《第二章 第二节 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课件1 新人教版选修1

1、微生物的培养和应用，土壤中尿素分解菌的分离和计数，(1)尿素分解菌的筛选和分离，(1)实验方法：的选择性培养，人为地提供有利于目标微生物生长的条件(包括养分、温度、酸碱度等)。)，同时抑制其他微生物的生长。在微生物学中，培养基：将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)实验原理：培养基：用青霉素分离酵母、霉菌等真菌，培养基：用高浓度盐分离金黄色葡萄球菌。无氮源无氮培养基：用于分离无含碳有机物的固氮菌：用于分离无碳氮源的自养微生物：分离自养固氮微生物并改变一定条件：如温度和酸碱度，(3)培养基组成分析，其中葡萄糖既是碳源又是能源；尿素是培养基中唯一的氮源。因此，原则上，只

2、有能够利用尿素的微生物才能在培养基中生长。它具有选择功能，可以使用尿素选择和分析微生物。(2)微生物生长的测量方法：1 .直接计数法：参见强制性3注：接种微生物，在液体培养基中培养，并定期取样计数。2.间接计数法：是根据培养基上微生物形成的菌落数来估计样品溶液中的活菌数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面上生长的菌落来自样品稀释度中的活细菌。因此，适当的稀释是成功计数菌落数的关键。为了保证结果的准确性，通常将经过多次稀释的细菌溶液涂在平板上，然后选择菌落数为30，300的平板进行计数。(1)理论基础：说明：1)在间接计数中，适当稀释是成功计数菌落数的关键(见实验设计)；2)间接计数的菌落数通常

3、低于活菌数。(2)操作：1)设置重复组：以增强实验的说服力和准确性(至少2个板)；2)选择含有30-300个菌落的平板进行计数。(3)计算公式：C代表在一定稀释度下平板上生长的菌落平均数，V代表涂布平板时所用稀释剂的体积(毫升)，M代表稀释倍数，1。想想看，如何从平板上的菌落数推断每克样品的菌落数？答：计算一定稀释度下平板上的菌落数，最好是3个平板，计算平板上的平均菌落数，然后根据教科书旁边一栏的公式计算。学生甲的成绩与其他学生不同，有三种可能的解释。首先，由于土壤样品不同；二是由于培养基污染或操作不当；第三，实验组太少，缺乏可重复性。(3)设置控制。对照实验是指除被测条件(实验变量或自变量)

4、外，其他条件(自变量)相同的实验。分为：空白控制、条件控制、相互控制和标准控制等。另一方案(空白对照):培养A学生配制的培养基，不添加土壤样品作为空白对照，以证明培养基是否被污染。从这个例子可以看出，为了使实验结果令人信服，控制的设置是必要的。有两个实验方案，一个方案(交叉引用):其他学生可以使用与A相同的土样，并增加实验组的数量(每个学生制作四个板)。如果结果与A一致，则证明A是正确的；如果结果不同，则证明操作错误或培养基制备有问题。4.实验案例，实验的具体操作步骤如下： 1。土壤取样从肥沃和潮湿的土壤中取样。首先将表层土铲约3厘米，然后取样，并将样品包装(预先消毒)到准备好的信封中。从土壤

5、样品中分离和计数细菌，制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择性培养基，将细菌溶液稀释相同倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多于选择性培养基，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可作为判断选择性培养基是否起到选择性作用的对照。因为最初的实验，我们不确定稀释的范围，所以我们选择了一个更宽的范围：稀释倍数是103107。每次稀释需要三种选择性培养基和一种牛肉膏蛋白胨培养基，因此总共需要15种选择性培养基和5种牛肉膏蛋白胨培养基。2.准备培养基，将10 g土壤样品加入到含有90毫升无菌生理盐水的锥形瓶中(锥形瓶的体积为250毫升)，充分摇匀，吸取1毫升上清液，将其转移到含有9毫升生理盐水的无菌大试管中，按等比例

6、依次稀释至107倍，并根据107103倍的稀释度从低到高涂布平板，无需更换移液管。3.微生物的培养和观察：将包被的培养皿置于30。随着培养时间的延长，会产生不同的菌落。比较牛肉酱培养基和选择性培养基中菌落的数量和形态，并做好记录。选择培养基中不同形式的菌落，接种到含有酚红的培养基斜面上，观察是否能产生教科书中图2-10所示的显色反应。为什么要用不同的稀释液来分离不同的微生物？确定土壤中细菌总数和分解土壤中尿素的细菌数量的稀释范围是否相同？答：这是因为土壤中各种微生物的数量(单位：植物/千克)不同。例如，在干旱土壤的上层样品中，需氧和兼性厌氧菌的数量约为2185万，放线菌的数量约为477万，霉菌

7、的数量约为23.1万。因此，为了获得不同类型的微生物，有必要根据不同的稀释度分离它们，同时，应该提供选择性培养条件。4.计数细菌。当菌落数稳定后，选择菌落数为30300的平板进行计数。在相同的稀释度下，对至少三个平板重复计数，然后计算平均值，并根据平板对应的稀释度计算样品中的细菌数量。5.操作提示，无菌操作，标记好，计划好时间，曙红-亚甲基蓝培养基是一种鉴别培养基，可用于检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为其代谢产物与曙红-亚甲基蓝结合，使菌落呈现深紫色和金属光泽，使大肠杆菌菌落显示出来，但不能促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。附件：大肠杆菌培养基鉴定，大肠杆菌有黑色中心，有或没有金属

8、光泽，大肠杆菌在曙红亚甲基蓝琼脂(EMB)上的典型特征，实施例2在测定微生物种群增长规律时，种内斗争最显著和激烈的时期是一个调整期，b对数期，c稳定期，d衰退期，分析：种内斗争是一个生态因素。种内竞争反映了种内生物对生存空间和生物资源的竞争。当生存空间丰富、营养丰富时，种内斗争的程度相对较低。随着微生物个体数量的增加，每个个体拥有的生存空间和养分越来越少，对生存空间和资源的竞争也越来越激烈。因此，在稳定时期，种内斗争是最激烈的。在衰退期，微生物数量开始减少，酸碱度极不适合微生物的生存，次生代谢产物大量积累。这时，微生物生存的斗争主要是与无机环境的斗争。答：丙，例3(江苏，2005)抗生素作为一种治疗细菌感染的药物，因其高效和巨大的经济价值而使抗生素行业经久不衰。其中，青霉素的发现和应用具有划时代的意义。青霉素被发酵产生青霉素。青霉菌的代谢类型是青霉素是青霉菌的代谢产物。在生产和科学方面青霉菌生长的测定：取一定体积的发酵液，反复离心洗涤，然后计算发酵罐中细菌的总重量。异养需氧型，次级，对数，个体形态，生理特征，称细菌湿重(干燥后称重量)，分析：青霉菌属真菌，其代谢型应为异养需氧型，而青霉素作为其代谢产物，对其生长和繁殖不是必需的，因此青霉素应属于次级代谢产物。在测量青霉菌在培养基上的生长时，有