生物制药工艺学第四章-第十一章分离技术

1、分离技术，生物制药工艺学第4章到第11章，第4章固相析出分离法改变溶液条件，将溶质作为固体从溶液中分离的操作技术称为固相析出分离法。 析出物为结晶时，称为结晶的析出物为非晶质体固体称为沉淀法。 固相沉积法主要有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、结晶法等。 盐析法是利用各种生物分子在浓盐溶液中的溶解度的差异，在溶液中导入一定量的中性盐，使目标物和杂蛋白沉淀析出，达到精制目的的方法。 盐析的反应历程：高浓度中性盐溶液中存在大量带电的盐络离子，它们能中和生物分子表面的电荷，损伤稳定的电双层，破坏分子周边的水合层，而且大量盐络离子本身的水化作用可使自由水浓度降低，同时破坏水合层，使生物分子相互聚集

2、沉淀。 有机溶剂沉淀法是在水溶液中加入一定量的亲水性有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出的分离纯化方法。 主要反应历程： (1)将亲水性有机溶剂加入溶液中，介质的介电常数降低，溶质分子间的静电引力增加，凝聚形成沉淀。 (2)水溶性有机溶剂本身的水化作用降低了自由水的浓度，压缩了亲水溶质分子表面本来的水合层的厚度，降低了其亲水性，引起了脱水凝聚。 等电点沉淀法的两性电解质是当溶液pH处于等电点(pI )时，分子表面净电荷为零，导致稳定的电双层以及水合膜弱化或破坏，分子间引力增加，溶解度降低。 调节溶解的pH，降低两性溶质溶解度，使沉淀析出的操作。 结晶法改变溶液的某些条件，使其中的溶质以结晶

3、状态析出的过程称为结晶。 (1)盐析结晶法这是生化制药使用最多的结晶方法。 其作用是，通过向结晶溶液中导入中性盐，使溶质的溶解度逐渐降低，使其过饱和，经过一定时间后形成结晶，逐渐成长。 (二)透析晶体(三)有机溶剂晶体(四)等电点晶体(五)的温度诱导晶体，第五章吸附法吸附是物质分子在两相界面浓度的增加。 由于界面分子在云同步上受到不均匀的两相分子的力，界面分子的力场不会饱和，即存在固体表面力，它从外部吸附分子、原子或络离子，在吸附剂的表面附近形成多分子层或单分子层。 物质从流变性(气或液相)浓缩到固体表面而分离的过程称为吸附作用。 表面发生吸附作用的固体叫吸附剂，被吸附的物质叫吸附剂。 常用吸

4、附剂：1)活性碳是吸附能力强的无极性吸附剂，其吸附作用在水溶液中最强，在有机溶剂中弱，吸附能力的顺序为水乙醇甲醇冰乙酸乙基丙酮三氯甲烷。 2 )人工沸石人工沸石是由人造的合成的无机阳离子交换剂。 用于细胞色素c的分离。 3 )磷酸钙元素凝胶在蛋白质的分离纯化中，较常用的吸附剂是磷酸钙元素凝胶。 (羟基磷灰石)活性部位是钙元素络离子。 4 )白陶土5 )氢氧化铝凝胶可用于蛋白质及酶催化剂的分离。 6 )氧化铝活性氧化铝是最常用的吸附剂，特别适于亲脂性成分的分离，广泛用于醇、酚、生物碱、染料、甾类化合物化合物、氰苷类、氨基酸、蛋白质和维生素等物质的分离。 7 )硅凝胶是最常用的8 )滑石粉惰性过滤

5、器9 )硅藻泥惰性过滤器10 )皂土11 )聚酰胺粉粉12 )大孔网聚合物吸附树脂极性、弱极性、非极性大孔吸附树脂强酸性、弱酸性、强碱性、弱碱性等，第6章离子交换法离子交换法利用溶液中各种粒子电荷的带电粒子和离子交换剂这些个的结合是可逆的，可以在一定条件下结合，即使条件改变也会释放。 络离子交换剂由惰性的不溶性载体、功能化学基和平衡络离子组成。/x，z，z，x，x，y，z，z，z，z，可以说，x，z，可以说，x，z，可以说，可以说，x，z，可以说，x，z，z，x，x，y，z，x，y，z，x，x，x，x，y，y，y，z，y，z，x，x，x，x，y，y ， 您可以选择、或者、或者、或者、或者、或者

6、、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者、或者用、亲和色谱法可逆地结合的专一性物质被称为配体，与配体结合的色谱分析法介质被称为沉积基质亲和色谱法的设定校正原理和过程：1)配体固定化选择适当的配体与不溶性的支撑体结合，或者共价键合成为具有专一性亲和性的分离介质。 2 )吸附样品的亲和色谱法介质有选择地吸附酶催化剂和其他生物活性物质，由于杂质和色谱分析法没有亲和性，所以不被吸附而被洗净除去。 3 )选择适当的条件洗脱吸附的亲和介质上的酶催化剂和其他生物活性物质。 利用l，s，l，l，s，s，s，杂质，s，s，l，l，l，配体离心技术离心力场加速混悬剂中固体粒子的沉降速度的方法称为离心技术。 相对离心力通常由离心机的离心力与重力之比表示，也称为分离因子，用符号g或g表示。 第10章膜分离技术，第11章制造型高速液相色谱法制造型HPLC技术，利用大径柱分离制造大量纯物质(0.1g) HPLC的分离依据是样品中各成分间的带电性、极性、疏水性、分子尺寸、等电点、亲和性、螯合性等理化性质的差异。 将试料导入柱头，流动相通过高压泵精确控制其产水量，使得试料中的各成分在柱中形成检查迁移，使得色谱分析法柱按照时间序列流出，进行了检测和分支构造收集。 HPLC光谱重要残奥计：分离度、分离速度、回收率、样本容量，根据固定的相对样品保持反